CCD 841 CoN，ATCC細胞(bao)株(zhu)簡介：

產(chan)品名(ming)稱：CCD 841 CoN

來源：美(mei)國ATCC

數(shu)量：大量

生(sheng)長(chang)狀態(tai)：貼壁生(sheng)長(chang)

器官來源：結腸

細胞形態：上皮樣

相(xiang)關疾(ji)病(bing)：正(zheng)常

是否是腫(zhong)瘤細(xi)胞：0

物(wu)種來源：人

運(yun)輸方式：凍存運(yun)輸

庫(ku)存狀態：現(xian)貨

復蘇周期(qi)：10個(ge)工(gong)作日左右

美(mei)(mei)國(guo)ATCC品(pin)牌介紹：美(mei)(mei)國(guo)菌(jun)種(zhong)(zhong)保藏中(zhong)心，又(you)稱美(mei)(mei)國(guo)模式菌(jun)種(zhong)(zhong)收集中(zhong)心(ATCC)，是位(wei)于馬(ma)里蘭洲(zhou)洛克菲勒的(de)(de)一(yi)家私營的(de)(de)，非(fei)贏利(li)性(xing)組(zu)織。目前它可以提(ti)供各種(zhong)(zhong)動植(zhi)物(wu)細(xi)胞、標準品(pin)、菌(jun)株(zhu)達(da)兩萬多(duo)種(zhong)(zhong)。ATCC的(de)(de)成立(li)可追溯到(dao)1925年(nian)，一(yi)個科(ke)學委員會認識(shi)到(dao)科(ke)學研(yan)究對(dui)于微生物(wu)的(de)(de)大(da)量需求而萌發了(le)創(chuang)建一(yi)個微生物(wu)相關(guan)制品(pin)供應中(zhong)心的(de)(de)想法。慧穎(ying)生物(wu)通過自己(ji)的(de)(de)渠(qu)道為國(guo)內科(ke)研(yan)以及生產用戶(hu)提(ti)供美(mei)(mei)國(guo)ATCC細(xi)胞株(zhu)、菌(jun)株(zhu)等生物(wu)標準品(pin)。貨期短，*，不需要客戶(hu)填寫(xie)詳(xiang)細(xi)資料，幫客戶(hu)辦理(li)一(yi)切海關(guan)手(shou)續，方便快(kuai)捷(jie)！

CCD 841 CoN，ATCC細(xi)胞株，細(xi)胞(bao)培(pei)養的過(guo)程(cheng)中，經常見到黑(hei)色的顆(ke)粒(li)或小黑(hei)點，這種情況(kuang)是怎么(me)引起的呢？該(gai)怎么(me)避(bi)免呢？

原因(yin)：

黑(hei)點，大概有細胞(bao)本身帶(dai)的，環境有的，還有人(ren)身上帶(dai)進細胞(bao)間的， 還有就是血(xue)清和培養基。

解決辦法：

1、如果小(xiao)黑(hei)點(dian)有(you)增殖(zhi)趨勢，那么就有(you)可能(neng)是污染了，需要(yao)處理；

2、如果小黑點沒有增殖(zhi)趨勢，且不影(ying)響細胞(bao)生(sheng)長，也(ye)不影(ying)響實驗的話，則可能

a、是「黑膠蟲(chong)(chong)」，黑膠蟲(chong)(chong)究(jiu)竟是一種(zhong)生(sheng)物還是非生(sheng)物，本身就存在(zai)爭議。有(you)人認為是從血(xue)清(qing)(qing)(qing)中(zhong)來的(de)(de)(de)(de)(de)一種(zhong)原蟲(chong)(chong)，也(ye)(ye)有(you)人認為是細菌，或是真菌，也(ye)(ye)有(you)人認為是血(xue)清(qing)(qing)(qing)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋(dan)白的(de)(de)(de)(de)(de)結晶。「黑膠蟲(chong)(chong)」可(ke)(ke)寄生(sheng)于(yu)動(dong)物細胞(bao)(bao)(bao)，也(ye)(ye)可(ke)(ke)以生(sheng)存于(yu)培養基(ji)中(zhong)，依靠細胞(bao)(bao)(bao)和培養基(ji)中(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)營養為生(sheng)，并(bing)隨(sui)細胞(bao)(bao)(bao)傳代而傳代。「黑膠蟲(chong)(chong)」與細胞(bao)(bao)(bao)競爭性生(sheng)長，開(kai)始時(shi)對細胞(bao)(bao)(bao)并(bing)沒有(you)什么影響，但(dan)當(dang)黑膠蟲(chong)(chong)的(de)(de)(de)(de)(de)數量多到一定(ding)程度(du)的(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)候(hou)， 細胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)長就會受到影響直至死亡(wang)，嚴重影響了科研活動(dong)的(de)(de)(de)(de)(de)開(kai)展(zhan)和進行。以前(qian)（這(zhe)個至少(shao)是 10 年以前(qian)），很多實驗室在(zai)養細胞(bao)(bao)(bao)時(shi)用國產(chan)血(xue)清(qing)(qing)(qing)，那時(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)(qing)可(ke)(ke)能(neng)質量不過關，有(you)所謂的(de)(de)(de)(de)(de)「黑膠蟲(chong)(chong)」，但(dan)是也(ye)(ye)沒有(you)明確的(de)(de)(de)(de)(de)鑒(jian)定(ding)。但(dan)是現在(zai)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)(qing)，即使國產(chan)的(de)(de)(de)(de)(de)，如四季青等(deng)稍大點的(de)(de)(de)(de)(de)廠家(jia)，產(chan)品里這(zhe)種(zhong)現象就少(shao)見了。

b、是細胞碎片，或血(xue)清里德沉淀(dian)析出，在做布(bu)朗運動(dong)。

c、是核糖體(ti)，也可能是雜質(zhi)

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，傳代(dai)培養(yang)

懸浮細胞:

1.懸(xuan)浮細胞(bao)(bao)常規傳代操作為(wei)半量換(huan)液，分瓶傳代，即(ji)取出(chu)一半細胞(bao)(bao)懸(xuan)液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的*培養基，于培養箱中培養；也可根據細胞(bao)(bao)密度(du)分多瓶傳代。

2.注意培養基PH值變化情況(kuang)，定(ding)期換液(ye)，待細胞(bao)密度達到(dao)70-80%時重(zhong)復傳代操作或(huo)者凍(dong)存。

半貼壁半懸(xuan)浮細胞：

1.若懸浮細胞(bao)較多且折光率良好，可離心(xin)收集，繼續培養。

2.若有少(shao)量(liang)細胞懸浮，也(ye)可(ke)不(bu)用(yong)收集，傳代操作按常規貼(tie)壁細胞操作流(liu)程(cheng)處理(li)。

3.若懸浮細(xi)胞(bao)較多(duo)，離(li)心收集，原瓶中貼壁(bi)細(xi)胞(bao)按照常規(gui)規(gui)貼壁(bi)細(xi)胞(bao)操作流程進行消(xiao)化、終止消(xiao)化、吹打，并與之前收集的懸浮細(xi)胞(bao)混懸，分瓶培(pei)養。

貼壁細胞:

1.吸(xi)出原培養瓶(ping)中的培養基(ji)，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶(mei)進行消(xiao)化（注意把握消(xiao)化時間，通常控制在(zai)1~2min）

2.鏡(jing)下觀察消化情況，在細胞(bao)邊緣(yuan)縮小時(shi)去(qu)掉(diao)胰酶，加6~8 ml *培養基，輕輕吹(chui)(chui)打細胞(bao)層，盡(jin)量把細胞(bao)層吹(chui)(chui)落、吹(chui)(chui)散；

3.取出部分細胞懸液轉移到新的培(pei)(pei)養(yang)皿/瓶中，添加適當的*培(pei)(pei)養(yang)基，于培(pei)(pei)養(yang)箱中培(pei)(pei)養(yang)；

4.注意培養(yang)基(ji)PH值變化情況，定期換(huan)液(ye)，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者(zhe)凍(dong)存。

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