RPE-J，ATCC細胞株(zhu)簡介(jie)：

產(chan)品名稱：RPE-J

來源(yuan)：美國ATCC

數(shu)量(liang)：大量(liang)

生長狀(zhuang)態：貼壁生長

器官來源(yuan)：眼

細(xi)胞形態：上皮樣

相關疾(ji)病：其他(ta)疾(ji)病

品系：Long-Evans

是否(fou)是腫(zhong)瘤細(xi)胞：0

物(wu)種來源：大鼠(shu)

運(yun)輸(shu)方式：凍存運(yun)輸(shu)

庫存狀態：現貨

復(fu)蘇周期：10個(ge)工作日左右

美國ATCC品牌(pai)介紹：美國菌(jun)種保藏中心(xin)，又稱(cheng)美國模(mo)式菌(jun)種收集中心(xin)(ATCC)，是(shi)位于(yu)(yu)馬里蘭洲洛(luo)克(ke)菲勒(le)的(de)(de)一家私營(ying)的(de)(de)，非贏利性(xing)組織。目前它(ta)可以提供(gong)各種動植物(wu)細(xi)(xi)胞、標準品、菌(jun)株達兩萬多(duo)種。ATCC的(de)(de)成立可追溯(su)到(dao)1925年，一個科學委(wei)員(yuan)會認識到(dao)科學研(yan)究(jiu)對于(yu)(yu)微(wei)(wei)生物(wu)的(de)(de)大量(liang)需(xu)求而(er)萌發了創建一個微(wei)(wei)生物(wu)相關制品供(gong)應中心(xin)的(de)(de)想法。慧穎生物(wu)通(tong)過自己的(de)(de)渠道為國內(nei)科研(yan)以及(ji)生產用戶提供(gong)美國ATCC細(xi)(xi)胞株、菌(jun)株等生物(wu)標準品。貨期短，*，不需(xu)要客戶填寫(xie)詳細(xi)(xi)資料，幫客戶辦理一切海關手續(xu)，方便快捷！

RPE-J，ATCC細(xi)胞株，細胞培養(yang)的過程中(zhong)，經(jing)常見到黑色的顆粒(li)或小黑點，這種情(qing)況是怎(zen)么引(yin)起的呢？該怎(zen)么避免呢？

原因：

黑(hei)點，大概有細(xi)胞(bao)本身帶的(de)，環境有的(de)，還有人身上(shang)帶進(jin)細(xi)胞(bao)間的(de)， 還有就是血清和培養基(ji)。

解(jie)決辦法：

1、如果小黑(hei)點有(you)增殖趨(qu)勢，那(nei)么就有(you)可能是污染了，需要(yao)處理；

2、如(ru)果小(xiao)黑點沒(mei)有增殖趨(qu)勢(shi)，且不影(ying)響細胞生長(chang)，也不影(ying)響實(shi)驗的(de)話，則可能

a、是(shi)(shi)(shi)「黑膠蟲」，黑膠蟲究竟是(shi)(shi)(shi)一種生(sheng)(sheng)物還(huan)是(shi)(shi)(shi)非生(sheng)(sheng)物，本身就(jiu)存在(zai)爭議(yi)。有(you)人認為(wei)(wei)是(shi)(shi)(shi)從(cong)血(xue)清(qing)中來的(de)(de)一種原(yuan)蟲，也有(you)人認為(wei)(wei)是(shi)(shi)(shi)細(xi)菌，或是(shi)(shi)(shi)真菌，也有(you)人認為(wei)(wei)是(shi)(shi)(shi)血(xue)清(qing)中的(de)(de)蛋白的(de)(de)結晶。「黑膠蟲」可寄生(sheng)(sheng)于動物細(xi)胞(bao)(bao)，也可以(yi)生(sheng)(sheng)存于培養(yang)基中，依(yi)靠細(xi)胞(bao)(bao)和培養(yang)基中的(de)(de)營(ying)養(yang)為(wei)(wei)生(sheng)(sheng)，并(bing)隨(sui)細(xi)胞(bao)(bao)傳代而傳代。「黑膠蟲」與(yu)細(xi)胞(bao)(bao)競爭性生(sheng)(sheng)長(chang)，開始時(shi)對細(xi)胞(bao)(bao)并(bing)沒(mei)有(you)什么影響，但當黑膠蟲的(de)(de)數量多(duo)到(dao)一定程度的(de)(de)時(shi)候(hou)， 細(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)(sheng)長(chang)就(jiu)會(hui)受到(dao)影響直(zhi)至死亡，嚴重影響了科研(yan)活動的(de)(de)開展(zhan)和進(jin)行。以(yi)前（這(zhe)個至少是(shi)(shi)(shi) 10 年以(yi)前），很多(duo)實驗室在(zai)養(yang)細(xi)胞(bao)(bao)時(shi)用(yong)國產血(xue)清(qing)，那時(shi)的(de)(de)血(xue)清(qing)可能(neng)質量不過(guo)關，有(you)所謂的(de)(de)「黑膠蟲」，但是(shi)(shi)(shi)也沒(mei)有(you)明確的(de)(de)鑒定。但是(shi)(shi)(shi)現在(zai)的(de)(de)血(xue)清(qing)，即使國產的(de)(de)，如四(si)季青等稍(shao)大點的(de)(de)廠(chang)家，產品里這(zhe)種現象就(jiu)少見了。

b、是細胞碎片，或(huo)血清里(li)德沉淀析出，在做布朗(lang)運動。

c、是核糖體(ti)，也可(ke)能是雜質

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，傳代培養

懸浮細胞:

1.懸(xuan)浮細胞常規傳(chuan)(chuan)代操作(zuo)為半量換液，分瓶(ping)(ping)傳(chuan)(chuan)代，即取出(chu)一半細胞懸(xuan)液轉移到新的培(pei)養皿(min)/瓶(ping)(ping)中，添加適當的*培(pei)養基，于(yu)培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；也可根據細胞密度分多瓶(ping)(ping)傳(chuan)(chuan)代。

2.注(zhu)意培養基PH值變化情況(kuang)，定(ding)期換液，待細胞密(mi)度達到70-80%時(shi)重復傳代操(cao)作或者凍存(cun)。

半貼壁(bi)半懸浮(fu)細胞(bao)：

1.若懸浮細胞較多(duo)且折(zhe)光率良好，可離心收(shou)集，繼續培養(yang)。

2.若有(you)少量(liang)細胞(bao)懸浮(fu)，也(ye)可不用收集(ji)，傳(chuan)代操作按常(chang)規(gui)貼壁細胞(bao)操作流程處理(li)。

3.若懸浮細胞較(jiao)多，離(li)心收(shou)集，原瓶中(zhong)貼壁細胞按(an)照常規(gui)(gui)規(gui)(gui)貼壁細胞操作流程進(jin)行消化、終止消化、吹打(da)，并與(yu)之前收(shou)集的懸浮細胞混懸，分瓶培養。

貼壁細胞(bao):

1.吸出原培(pei)養瓶(ping)中的培(pei)養基(ji)，PBS緩(huan)沖液(ye)潤洗(xi)細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的胰酶(mei)進行(xing)消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）

2.鏡下觀(guan)察消(xiao)化情況，在(zai)細(xi)胞(bao)邊緣縮小時去(qu)掉胰(yi)酶(mei)，加6~8 ml *培養基，輕輕吹打細(xi)胞(bao)層，盡量(liang)把(ba)細(xi)胞(bao)層吹落、吹散；

3.取出部分細胞懸(xuan)液轉移到(dao)新的培養(yang)(yang)皿/瓶中，添加適當(dang)的*培養(yang)(yang)基(ji)，于培養(yang)(yang)箱(xiang)中培養(yang)(yang)；

4.注意培養(yang)基PH值變(bian)化情(qing)況，定期換液，待細胞密度達(da)到70-80%以(yi)后重復傳(chuan)代操作或者(zhe)凍存。

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