RS4;11，ATCC細胞株簡介：

產品(pin)名稱：RS4;11

來源(yuan)：美國ATCC

數(shu)量：大量

生長狀(zhuang)態：懸浮生長

器官(guan)來源：骨髓

細胞形態：淋巴樣

相關疾(ji)病：白血病

是否是腫瘤細胞(bao)：0

物種(zhong)來(lai)源：人

運(yun)輸方式：凍存(cun)運(yun)輸

庫存狀態(tai)：現貨

復(fu)蘇周期：10個工作(zuo)日左右

美(mei)(mei)國ATCC品牌介紹(shao)：美(mei)(mei)國菌(jun)種保藏中心(xin)，又稱美(mei)(mei)國模式菌(jun)種收集中心(xin)(ATCC)，是位(wei)于馬里蘭洲洛克菲(fei)勒的一家私營的，非贏利性組織。目(mu)前(qian)它可(ke)以(yi)提(ti)(ti)供(gong)各種動植物(wu)(wu)細胞(bao)、標(biao)準品、菌(jun)株達兩(liang)萬多種。ATCC的成立可(ke)追溯到(dao)1925年，一個(ge)科(ke)學(xue)(xue)委員(yuan)會認識(shi)到(dao)科(ke)學(xue)(xue)研究對于微生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)的大量需求而萌發了創建一個(ge)微生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)相(xiang)關制品供(gong)應中心(xin)的想(xiang)法。慧穎生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)通過自己的渠道為國內科(ke)研以(yi)及生(sheng)(sheng)(sheng)產用戶提(ti)(ti)供(gong)美(mei)(mei)國ATCC細胞(bao)株、菌(jun)株等生(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)(wu)標(biao)準品。貨(huo)期短，*，不需要客(ke)(ke)戶填(tian)寫詳(xiang)細資料，幫(bang)客(ke)(ke)戶辦理一切海關手續，方便快捷！

RS4;11，ATCC細(xi)胞株，細胞培養的(de)過程(cheng)中，經常見到黑色的(de)顆粒或小黑點，這種情況(kuang)是(shi)怎(zen)么(me)(me)引(yin)起的(de)呢？該怎(zen)么(me)(me)避免呢？

原(yuan)因：

黑(hei)點(dian)，大概有細(xi)胞本身帶(dai)的，環境有的，還有人身上帶(dai)進細(xi)胞間的， 還有就是血清和培養基。

解決辦法(fa)：

1、如果小黑點有增(zeng)殖趨勢，那么就有可能是污染了，需要處理；

2、如(ru)果小黑(hei)點(dian)沒有增殖趨勢，且不(bu)影響細胞(bao)生長(chang)，也不(bu)影響實驗(yan)的話，則可能

a、是(shi)(shi)「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲」，黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲究竟是(shi)(shi)一種(zhong)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)還是(shi)(shi)非生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)物(wu)，本身就存在(zai)(zai)爭議。有(you)人認(ren)為(wei)(wei)是(shi)(shi)從血(xue)(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)來的(de)(de)(de)一種(zhong)原蟲，也(ye)(ye)有(you)人認(ren)為(wei)(wei)是(shi)(shi)細(xi)(xi)(xi)菌，或是(shi)(shi)真菌，也(ye)(ye)有(you)人認(ren)為(wei)(wei)是(shi)(shi)血(xue)(xue)(xue)清(qing)中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)蛋白的(de)(de)(de)結晶。「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲」可寄生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)于(yu)(yu)動(dong)物(wu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，也(ye)(ye)可以(yi)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)存于(yu)(yu)培(pei)養(yang)基中(zhong)(zhong)，依(yi)靠細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)和培(pei)養(yang)基中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)營養(yang)為(wei)(wei)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)，并(bing)(bing)隨細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)傳代而(er)傳代。「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲」與細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)競(jing)爭性生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)，開始時(shi)(shi)對細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)并(bing)(bing)沒有(you)什么影(ying)響(xiang)，但(dan)當(dang)黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲的(de)(de)(de)數量(liang)多到(dao)一定程度的(de)(de)(de)時(shi)(shi)候， 細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)生(sheng)(sheng)(sheng)(sheng)長(chang)(chang)就會受到(dao)影(ying)響(xiang)直至死亡(wang)，嚴重影(ying)響(xiang)了(le)科研活動(dong)的(de)(de)(de)開展和進行(xing)。以(yi)前(qian)（這個至少(shao)是(shi)(shi) 10 年以(yi)前(qian)），很(hen)多實驗室(shi)在(zai)(zai)養(yang)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)時(shi)(shi)用國產血(xue)(xue)(xue)清(qing)，那時(shi)(shi)的(de)(de)(de)血(xue)(xue)(xue)清(qing)可能質量(liang)不過關，有(you)所謂(wei)的(de)(de)(de)「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲」，但(dan)是(shi)(shi)也(ye)(ye)沒有(you)明(ming)確的(de)(de)(de)鑒定。但(dan)是(shi)(shi)現(xian)在(zai)(zai)的(de)(de)(de)血(xue)(xue)(xue)清(qing)，即(ji)使國產的(de)(de)(de)，如四季青等稍大點(dian)的(de)(de)(de)廠家，產品(pin)里這種(zhong)現(xian)象就少(shao)見了(le)。

b、是細(xi)胞碎片，或(huo)血清里德沉淀析出，在做布(bu)朗(lang)運動。

c、是核(he)糖體，也可能是雜質

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，傳(chuan)代培(pei)養

懸浮細胞:

1.懸浮細胞常規傳代(dai)操作為半量(liang)換液(ye)，分瓶傳代(dai)，即取出(chu)一半細胞懸液(ye)轉移到新(xin)的培養(yang)皿/瓶中(zhong)，添加(jia)適當的*培養(yang)基，于培養(yang)箱中(zhong)培養(yang)；也可根據(ju)細胞密(mi)度(du)分多瓶傳代(dai)。

2.注(zhu)意培養基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到(dao)70-80%時重復傳代操作或(huo)者凍存(cun)。

半貼壁半懸浮(fu)細胞：

1.若(ruo)懸(xuan)浮細胞(bao)較多且折光率良好，可離心收集，繼續培養。

2.若有(you)少(shao)量(liang)細(xi)胞懸浮，也可(ke)不用收(shou)集，傳代操作(zuo)按常規貼壁(bi)細(xi)胞操作(zuo)流程處理。

3.若懸浮細(xi)胞較多，離心收(shou)集，原(yuan)瓶(ping)中貼壁細(xi)胞按照常規(gui)規(gui)貼壁細(xi)胞操作(zuo)流程(cheng)進行消(xiao)化、終(zhong)止(zhi)消(xiao)化、吹打，并與之前收(shou)集的懸浮細(xi)胞混懸，分瓶(ping)培養。

貼壁細胞:

1.吸出原培(pei)養瓶中的培(pei)養基(ji)，PBS緩沖液潤洗(xi)細胞兩次，加(jia)2~3 ml 含(han)0.25% EDTA的胰(yi)酶(mei)進行消化(hua)（注意把握消化(hua)時(shi)間(jian)，通常(chang)控(kong)制在1~2min）

2.鏡下觀察消(xiao)化情況，在細(xi)胞(bao)邊緣縮(suo)小時去(qu)掉胰酶，加6~8 ml *培養基，輕輕吹(chui)打細(xi)胞(bao)層，盡量把細(xi)胞(bao)層吹(chui)落、吹(chui)散(san)；

3.取出部分(fen)細胞懸液轉移到新的(de)培養皿/瓶中(zhong)，添加適當的(de)*培養基，于培養箱中(zhong)培養；

4.注意(yi)培(pei)養基PH值(zhi)變(bian)化情況，定期換液，待細胞密度達到(dao)70-80%以后重(zhong)復傳代操作或者(zhe)凍存。

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