Calu-3，ATCC細胞株簡(jian)介：

產品名稱：Calu-3

來源：美國ATCC

數量：大量

生(sheng)長狀(zhuang)態(tai)：貼壁生(sheng)長

器官來源(yuan)：肺

細胞形態：上(shang)皮樣(yang)

相關疾(ji)病：其(qi)他疾(ji)病

是否(fou)是腫瘤細(xi)胞：0

物種來源：人

運輸方式：凍存(cun)運輸

庫存狀態：現貨(huo)

復蘇周(zhou)期：10個工作日左右

美國(guo)(guo)ATCC品(pin)牌介紹：美國(guo)(guo)菌種(zhong)(zhong)保(bao)藏中(zhong)心(xin)，又稱美國(guo)(guo)模式菌種(zhong)(zhong)收集(ji)中(zhong)心(xin)(ATCC)，是(shi)位于馬里蘭洲洛克菲勒的一(yi)(yi)家私(si)營的，非(fei)贏利性組織。目(mu)前(qian)它(ta)可(ke)以提供各種(zhong)(zhong)動植物(wu)細(xi)胞、標準品(pin)、菌株達(da)兩萬多種(zhong)(zhong)。ATCC的成立可(ke)追溯到(dao)1925年，一(yi)(yi)個科學(xue)委員會認識到(dao)科學(xue)研究對于微(wei)生(sheng)物(wu)的大量需求(qiu)而萌(meng)發了創建一(yi)(yi)個微(wei)生(sheng)物(wu)相關制品(pin)供應中(zhong)心(xin)的想(xiang)法。慧穎(ying)生(sheng)物(wu)通(tong)過自己的渠道(dao)為國(guo)(guo)內(nei)科研以及生(sheng)產用戶(hu)提供美國(guo)(guo)ATCC細(xi)胞株、菌株等生(sheng)物(wu)標準品(pin)。貨(huo)期短(duan)，*，不(bu)需要客(ke)戶(hu)填寫詳(xiang)細(xi)資(zi)料，幫(bang)客(ke)戶(hu)辦理一(yi)(yi)切海關手續，方便快捷！

Calu-3，ATCC細胞株，細胞培(pei)養的過程中，經常見到黑色的顆粒或小(xiao)黑點，這種情況(kuang)是怎么引起的呢(ni)？該怎么避免(mian)呢(ni)？

原因(yin)：

黑點，大概有細(xi)胞本(ben)身(shen)帶的(de)，環境有的(de)，還有人身(shen)上帶進細(xi)胞間的(de)， 還有就是血清和培(pei)養基。

解決辦法：

1、如果(guo)小黑(hei)點有(you)增殖趨(qu)勢，那么就有(you)可能是污染了，需要處理；

2、如(ru)果小黑點沒有增殖趨勢，且不影響細胞(bao)生長(chang)，也不影響實驗的話，則可能

a、是(shi)(shi)(shi)「黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)」，黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)究竟是(shi)(shi)(shi)一(yi)種(zhong)生物(wu)還是(shi)(shi)(shi)非生物(wu)，本身(shen)就(jiu)(jiu)存(cun)在爭議。有(you)人認(ren)為(wei)是(shi)(shi)(shi)從血清(qing)中來的一(yi)種(zhong)原蟲(chong)(chong)，也有(you)人認(ren)為(wei)是(shi)(shi)(shi)細(xi)菌，或(huo)是(shi)(shi)(shi)真菌，也有(you)人認(ren)為(wei)是(shi)(shi)(shi)血清(qing)中的蛋白的結晶。「黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)」可寄生于(yu)動物(wu)細(xi)胞(bao)(bao)，也可以(yi)生存(cun)于(yu)培(pei)養基中，依靠細(xi)胞(bao)(bao)和(he)培(pei)養基中的營養為(wei)生，并(bing)隨(sui)細(xi)胞(bao)(bao)傳代(dai)而傳代(dai)。「黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)」與(yu)細(xi)胞(bao)(bao)競爭性生長，開(kai)始時(shi)(shi)(shi)對細(xi)胞(bao)(bao)并(bing)沒(mei)有(you)什么影(ying)(ying)響，但當(dang)黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)的數量多(duo)(duo)到一(yi)定程度的時(shi)(shi)(shi)候， 細(xi)胞(bao)(bao)生長就(jiu)(jiu)會受(shou)到影(ying)(ying)響直至死亡，嚴重影(ying)(ying)響了科研(yan)活(huo)動的開(kai)展和(he)進行。以(yi)前（這個至少是(shi)(shi)(shi) 10 年以(yi)前），很多(duo)(duo)實(shi)驗室在養細(xi)胞(bao)(bao)時(shi)(shi)(shi)用(yong)國產血清(qing)，那時(shi)(shi)(shi)的血清(qing)可能質量不過關(guan)，有(you)所謂的「黑膠(jiao)蟲(chong)(chong)」，但是(shi)(shi)(shi)也沒(mei)有(you)明(ming)確的鑒定。但是(shi)(shi)(shi)現(xian)在的血清(qing)，即使國產的，如四季青等稍大點的廠(chang)家，產品里(li)這種(zhong)現(xian)象就(jiu)(jiu)少見(jian)了。

b、是細胞碎片，或血清里德沉淀析(xi)出，在做布(bu)朗運動。

c、是核糖(tang)體(ti)，也可能是雜(za)質(zhi)

說(shuo)明書\價格(ge)

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，傳(chuan)代培(pei)養

懸(xuan)浮細(xi)胞:

1.懸浮細胞(bao)常規(gui)傳代操作為半量(liang)換液，分瓶(ping)傳代，即取出一半細胞(bao)懸液轉移到新(xin)的(de)培(pei)養皿/瓶(ping)中，添(tian)加適當的(de)*培(pei)養基(ji)，于培(pei)養箱中培(pei)養；也可根(gen)據細胞(bao)密度分多瓶(ping)傳代。

2.注意培養(yang)基(ji)PH值變化情況，定期換液，待細(xi)胞密度達到70-80%時(shi)重復傳代操作或者凍存(cun)。

半貼(tie)壁(bi)半懸浮(fu)細(xi)胞：

1.若(ruo)懸浮細胞較(jiao)多且折光率良好，可離心收集(ji)，繼續培養。

2.若有少(shao)量細胞(bao)懸浮(fu)，也可不用(yong)收(shou)集，傳代操作(zuo)按常規貼壁細胞(bao)操作(zuo)流(liu)程(cheng)處理。

3.若懸(xuan)浮(fu)細胞較多，離心收(shou)(shou)集，原瓶中貼壁細胞按照(zhao)常規(gui)規(gui)貼壁細胞操作流程進(jin)行(xing)消化、終止消化、吹打，并與之前收(shou)(shou)集的懸(xuan)浮(fu)細胞混懸(xuan)，分(fen)瓶培(pei)養。

貼壁(bi)細胞:

1.吸出原培(pei)養瓶(ping)中的培(pei)養基，PBS緩沖液潤洗細胞(bao)兩次(ci)，加2~3 ml 含(han)0.25% EDTA的胰酶進行(xing)消化（注(zhu)意把握消化時間，通常(chang)控制在(zai)1~2min）

2.鏡下觀察(cha)消化(hua)情(qing)況(kuang)，在細(xi)胞(bao)(bao)邊緣縮小時去掉(diao)胰酶，加6~8 ml *培養基，輕輕吹打細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)，盡量把細(xi)胞(bao)(bao)層(ceng)吹落、吹散；

3.取出(chu)部分細胞(bao)懸液轉移到新(xin)的培養(yang)皿(min)/瓶中，添加適當的*培養(yang)基，于培養(yang)箱中培養(yang)；

4.注意培養基PH值變化情況，定期(qi)換(huan)液，待(dai)細(xi)胞密度達到70-80%以后重(zhong)復(fu)傳代操作(zuo)或者凍存。

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