RAW 264.7，ATCC細胞株簡介：

產品名稱：RAW 264.7

來源：美國ATCC

數量：大量

生(sheng)長(chang)狀(zhuang)態(tai)：貼壁生(sheng)長(chang)

組織來源：ascites

細(xi)(xi)胞形態：單(dan)核細(xi)(xi)胞/巨噬細(xi)(xi)胞

相(xiang)關疾(ji)病：其(qi)他疾(ji)病

品系：BALB/c

是(shi)否是(shi)腫瘤細胞(bao)：0

物(wu)種來源：小鼠

運(yun)輸方式：凍存運(yun)輸

庫(ku)存狀態(tai)：現(xian)貨

復(fu)蘇周期：10個工作日(ri)左右

美(mei)(mei)國(guo)ATCC品(pin)(pin)牌介(jie)紹(shao)：美(mei)(mei)國(guo)菌種(zhong)保(bao)藏中(zhong)心，又稱美(mei)(mei)國(guo)模式菌種(zhong)收集中(zhong)心(ATCC)，是位(wei)于(yu)馬里蘭洲洛克菲勒的(de)一家私營的(de)，非贏利(li)性組織。目前它可以提(ti)供各種(zhong)動(dong)植物(wu)(wu)細(xi)(xi)胞(bao)、標準品(pin)(pin)、菌株(zhu)達(da)兩萬多種(zhong)。ATCC的(de)成立(li)可追溯到1925年，一個科學(xue)委(wei)員會認識(shi)到科學(xue)研究對于(yu)微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)的(de)大量需求而(er)萌發了(le)創建一個微(wei)生(sheng)物(wu)(wu)相關制品(pin)(pin)供應(ying)中(zhong)心的(de)想法。慧穎(ying)生(sheng)物(wu)(wu)通(tong)過自(zi)己的(de)渠道為國(guo)內科研以及(ji)生(sheng)產用戶提(ti)供美(mei)(mei)國(guo)ATCC細(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)、菌株(zhu)等生(sheng)物(wu)(wu)標準品(pin)(pin)。貨(huo)期短，*，不需要客戶填寫(xie)詳細(xi)(xi)資料(liao)，幫客戶辦理(li)一切海關手續(xu)，方便(bian)快捷！

RAW 264.7，ATCC細胞株(zhu)，細胞培(pei)養的過程中，經常見(jian)到黑色的顆粒或小(xiao)黑點，這種情況是怎么(me)引起(qi)的呢？該怎么(me)避免呢？

原(yuan)因(yin)：

黑點，大概有(you)細(xi)胞本身(shen)帶的(de)，環境有(you)的(de)，還有(you)人身(shen)上帶進細(xi)胞間的(de)， 還有(you)就是血(xue)清和(he)培養基。

解決辦(ban)法：

1、如果小(xiao)黑點(dian)有(you)增(zeng)殖趨勢，那么(me)就有(you)可能是污染(ran)了(le)，需要(yao)處理；

2、如果小黑點(dian)沒有增殖趨勢，且不影響細(xi)胞生長(chang)，也不影響實驗的(de)話，則可能(neng)

a、是(shi)(shi)「黑膠(jiao)(jiao)蟲」，黑膠(jiao)(jiao)蟲究竟是(shi)(shi)一(yi)種(zhong)生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)還是(shi)(shi)非生(sheng)(sheng)物(wu)(wu)，本身就存在爭議。有(you)(you)人(ren)(ren)認(ren)為(wei)是(shi)(shi)從血(xue)(xue)清(qing)(qing)中來(lai)的(de)(de)(de)一(yi)種(zhong)原蟲，也(ye)有(you)(you)人(ren)(ren)認(ren)為(wei)是(shi)(shi)細(xi)菌，或是(shi)(shi)真菌，也(ye)有(you)(you)人(ren)(ren)認(ren)為(wei)是(shi)(shi)血(xue)(xue)清(qing)(qing)中的(de)(de)(de)蛋白的(de)(de)(de)結晶(jing)。「黑膠(jiao)(jiao)蟲」可寄(ji)生(sheng)(sheng)于(yu)動物(wu)(wu)細(xi)胞，也(ye)可以(yi)生(sheng)(sheng)存于(yu)培(pei)養(yang)基(ji)中，依靠細(xi)胞和培(pei)養(yang)基(ji)中的(de)(de)(de)營養(yang)為(wei)生(sheng)(sheng)，并(bing)隨(sui)細(xi)胞傳(chuan)代(dai)而(er)傳(chuan)代(dai)。「黑膠(jiao)(jiao)蟲」與細(xi)胞競爭性生(sheng)(sheng)長(chang)，開始時(shi)對細(xi)胞并(bing)沒有(you)(you)什么影響，但(dan)當黑膠(jiao)(jiao)蟲的(de)(de)(de)數(shu)量多到一(yi)定(ding)程度的(de)(de)(de)時(shi)候， 細(xi)胞生(sheng)(sheng)長(chang)就會受到影響直(zhi)至(zhi)死亡，嚴重(zhong)影響了(le)科研活(huo)動的(de)(de)(de)開展和進行。以(yi)前（這個至(zhi)少(shao)是(shi)(shi) 10 年以(yi)前），很多實驗室在養(yang)細(xi)胞時(shi)用國產(chan)血(xue)(xue)清(qing)(qing)，那時(shi)的(de)(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing)可能(neng)質(zhi)量不過關，有(you)(you)所謂的(de)(de)(de)「黑膠(jiao)(jiao)蟲」，但(dan)是(shi)(shi)也(ye)沒有(you)(you)明確的(de)(de)(de)鑒定(ding)。但(dan)是(shi)(shi)現在的(de)(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing)，即使國產(chan)的(de)(de)(de)，如四季青等稍大點的(de)(de)(de)廠家，產(chan)品(pin)里這種(zhong)現象就少(shao)見了(le)。

b、是(shi)細胞碎片，或血(xue)清(qing)里(li)德沉淀析(xi)出，在(zai)做(zuo)布朗運動。

c、是(shi)核(he)糖體(ti)，也可能是(shi)雜質

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，傳代培養(yang)

懸浮細胞(bao):

1.懸浮細胞(bao)常(chang)規傳代操作(zuo)為半量換液，分瓶(ping)傳代，即(ji)取(qu)出一半細胞(bao)懸液轉(zhuan)移到(dao)新的培養(yang)皿(min)/瓶(ping)中，添加適(shi)當的*培養(yang)基，于培養(yang)箱中培養(yang)；也(ye)可根據細胞(bao)密度分多瓶(ping)傳代。

2.注(zhu)意(yi)培養基PH值變化情(qing)況，定期(qi)換液(ye)，待細胞密度(du)達到70-80%時重(zhong)復傳代操(cao)作或(huo)者凍存。

半貼壁半懸浮細胞(bao)：

1.若懸(xuan)浮(fu)細(xi)胞較多且(qie)折光率(lv)良好，可(ke)離心收集，繼(ji)續培養(yang)。

2.若有少量細(xi)胞懸浮，也可不用收集，傳代操(cao)作按常規貼(tie)壁細(xi)胞操(cao)作流程處理。

3.若懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)較(jiao)多(duo)，離(li)心收集，原(yuan)瓶(ping)中貼壁細(xi)胞(bao)按照(zhao)常規(gui)規(gui)貼壁細(xi)胞(bao)操(cao)作(zuo)流程進行消化(hua)、終止消化(hua)、吹打，并與之前收集的(de)懸(xuan)浮細(xi)胞(bao)混懸(xuan)，分瓶(ping)培(pei)養。

貼壁細胞:

1.吸出原培(pei)養(yang)瓶(ping)中的(de)培(pei)養(yang)基(ji)，PBS緩沖液(ye)潤洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的(de)胰酶進行消(xiao)化(hua)（注意把(ba)握(wo)消(xiao)化(hua)時間，通常(chang)控制在1~2min）

2.鏡(jing)下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小時(shi)去掉(diao)胰酶，加6~8 ml *培養(yang)基(ji)，輕輕吹(chui)打細胞層(ceng)，盡量把細胞層(ceng)吹(chui)落、吹(chui)散(san)；

3.取出部(bu)分細胞(bao)懸液轉(zhuan)移到新的(de)培(pei)(pei)養皿/瓶中(zhong)，添加(jia)適(shi)當的(de)*培(pei)(pei)養基，于培(pei)(pei)養箱中(zhong)培(pei)(pei)養；

4.注意(yi)培養基(ji)PH值變(bian)化(hua)情(qing)況，定期(qi)換(huan)液，待細胞密度達(da)到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

慧穎(ying)生(sheng)物(wu)作(zuo)為國(guo)內(nei)幾大生(sheng)物(wu)試(shi)劑(ji)(ji)供(gong)(gong)應商，提(ti)供(gong)(gong)產品種類多，囊(nang)括：檢(jian)(jian)測試(shi)劑(ji)(ji) 、圖像(xiang)光學 、免疫檢(jian)(jian)測 、生(sheng)物(wu)器材 、原(yuan)料試(shi)劑(ji)(ji)、檢(jian)(jian)驗醫技、抗(kang)原(yuan)抗(kang)體、家用(yong)醫療、消耗(hao)材料、檢(jian)(jian)測治(zhi)療、生(sheng)物(wu)耗(hao)材等，公(gong)(gong)司(si)坐(zuo)落于(yu)上海眾仁路(lu)399號運通(tong)星(xing)財富廣(guang)場，公(gong)(gong)司(si)交通(tong)便利，環(huan)境優(you)雅(ya)，慧穎(ying)生(sheng)物(wu)幾十名(ming)員工，熱烈(lie)歡迎您的參觀指導。

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