3D4/21，ATCC細胞株簡介：

產品名稱(cheng)：3D4/21

來源：美國ATCC

數量(liang)：大量(liang)

生長狀態：貼壁生長

器官來源：肺(fei)

細(xi)胞(bao)(bao)形態：單(dan)核細(xi)胞(bao)(bao)/巨噬(shi)細(xi)胞(bao)(bao)

相關(guan)疾病：其他疾病

品系：Landrace

是否(fou)是腫瘤(liu)細胞(bao)：0

物種來源：豬(zhu)

運輸(shu)方式：凍存運輸(shu)

庫存狀態：現貨

復蘇周期：10個工(gong)作日左右

美國ATCC品牌介紹：美國菌(jun)種保藏中(zhong)心，又稱美國模式菌(jun)種收集中(zhong)心(ATCC)，是位于馬里(li)蘭洲洛(luo)克菲勒的(de)(de)(de)一(yi)家(jia)私(si)營的(de)(de)(de)，非贏利(li)性組織。目前它可(ke)以提供(gong)(gong)(gong)各種動植物(wu)細胞(bao)(bao)、標(biao)準品、菌(jun)株達兩萬多(duo)種。ATCC的(de)(de)(de)成立可(ke)追溯到1925年(nian)，一(yi)個科學委(wei)員會認識到科學研究對于微生(sheng)(sheng)物(wu)的(de)(de)(de)大(da)量需求而萌(meng)發了創建一(yi)個微生(sheng)(sheng)物(wu)相關制品供(gong)(gong)(gong)應中(zhong)心的(de)(de)(de)想法。慧(hui)穎生(sheng)(sheng)物(wu)通過自(zi)己的(de)(de)(de)渠道(dao)為國內科研以及生(sheng)(sheng)產用戶提供(gong)(gong)(gong)美國ATCC細胞(bao)(bao)株、菌(jun)株等生(sheng)(sheng)物(wu)標(biao)準品。貨(huo)期短，*，不需要客戶填寫詳細資料，幫客戶辦(ban)理一(yi)切海(hai)關手續，方便快捷(jie)！

3D4/21，ATCC細胞株(zhu)，細胞培(pei)養的過程中，經常見到黑(hei)色的顆粒或小黑(hei)點(dian)，這種情況是怎么(me)引起的呢？該怎么(me)避免(mian)呢？

原因：

黑點，大概有細胞(bao)本身帶(dai)的，環(huan)境有的，還(huan)有人身上(shang)帶(dai)進細胞(bao)間的， 還(huan)有就是(shi)血清和培(pei)養基。

解(jie)決辦法：

1、如果小黑點有(you)增殖趨勢，那么(me)就(jiu)有(you)可能是(shi)污染(ran)了(le)，需要(yao)處(chu)理；

2、如(ru)果小黑點沒有增殖趨勢，且不(bu)影(ying)響(xiang)細胞生長，也不(bu)影(ying)響(xiang)實驗的話，則(ze)可能

a、是「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)」，黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)究竟(jing)是一(yi)(yi)種生(sheng)(sheng)物(wu)還是非生(sheng)(sheng)物(wu)，本(ben)身就(jiu)存在爭議。有(you)人認為(wei)(wei)是從(cong)血(xue)(xue)清中(zhong)(zhong)來(lai)的(de)(de)一(yi)(yi)種原蟲(chong)(chong)，也有(you)人認為(wei)(wei)是細(xi)(xi)菌(jun)，或是真(zhen)菌(jun)，也有(you)人認為(wei)(wei)是血(xue)(xue)清中(zhong)(zhong)的(de)(de)蛋白的(de)(de)結晶。「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)」可(ke)寄生(sheng)(sheng)于動物(wu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，也可(ke)以生(sheng)(sheng)存于培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)，依靠細(xi)(xi)胞(bao)(bao)和培(pei)(pei)養(yang)基(ji)中(zhong)(zhong)的(de)(de)營養(yang)為(wei)(wei)生(sheng)(sheng)，并(bing)(bing)隨細(xi)(xi)胞(bao)(bao)傳(chuan)代而(er)傳(chuan)代。「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)」與細(xi)(xi)胞(bao)(bao)競爭性生(sheng)(sheng)長(chang)，開始時對細(xi)(xi)胞(bao)(bao)并(bing)(bing)沒有(you)什(shen)么影響(xiang)，但當(dang)黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)的(de)(de)數量(liang)(liang)多到一(yi)(yi)定程度(du)的(de)(de)時候， 細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)(sheng)長(chang)就(jiu)會(hui)受到影響(xiang)直(zhi)至死亡(wang)，嚴重影響(xiang)了科研活動的(de)(de)開展和進行。以前（這個至少(shao)是 10 年以前），很多實驗(yan)室在養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)時用國(guo)產血(xue)(xue)清，那(nei)時的(de)(de)血(xue)(xue)清可(ke)能質(zhi)量(liang)(liang)不過(guo)關，有(you)所謂的(de)(de)「黑(hei)膠(jiao)(jiao)蟲(chong)(chong)」，但是也沒有(you)明確(que)的(de)(de)鑒定。但是現(xian)在的(de)(de)血(xue)(xue)清，即使國(guo)產的(de)(de)，如(ru)四季青等稍(shao)大點的(de)(de)廠家(jia)，產品里(li)這種現(xian)象就(jiu)少(shao)見了。

b、是(shi)細胞碎片，或血清(qing)里德沉淀析出，在做布朗運動(dong)。

c、是(shi)核糖(tang)體(ti)，也可能是(shi)雜質

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，傳代(dai)培養

懸(xuan)浮細胞(bao):

1.懸(xuan)浮細胞常規(gui)傳代操作(zuo)為半(ban)量換(huan)液(ye)，分瓶傳代，即(ji)取出一半(ban)細胞懸(xuan)液(ye)轉移到新的培(pei)養皿/瓶中，添加適當的*培(pei)養基，于培(pei)養箱(xiang)中培(pei)養；也可(ke)根據細胞密度(du)分多(duo)瓶傳代。

2.注意培養(yang)基(ji)PH值變化情況，定期換液(ye)，待細胞密度達到70-80%時(shi)重復傳代操作或(huo)者凍存。

半貼壁(bi)半懸浮細胞：

1.若懸(xuan)浮細胞較多且折光率(lv)良好，可離心收(shou)集，繼(ji)續(xu)培養。

2.若(ruo)有少量細胞懸(xuan)浮，也可不用收集，傳代操作按常(chang)規(gui)貼壁細胞操作流程處理。

3.若懸浮(fu)細(xi)胞(bao)較多，離心收集，原瓶中貼壁細(xi)胞(bao)按照常規(gui)規(gui)貼壁細(xi)胞(bao)操作流程進行消化(hua)、終(zhong)止消化(hua)、吹打，并與之前收集的懸浮(fu)細(xi)胞(bao)混懸，分(fen)瓶培(pei)養。

貼壁細胞:

1.吸(xi)出原培養瓶中(zhong)的(de)培養基，PBS緩沖液(ye)潤洗細胞兩次(ci)，加2~3 ml 含0.25% EDTA的(de)胰酶(mei)進行消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）

2.鏡下觀察消化情況，在(zai)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)邊(bian)緣縮小時(shi)去掉胰(yi)酶，加6~8 ml *培養(yang)基(ji)，輕(qing)輕(qing)吹(chui)打細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)，盡量把細(xi)(xi)(xi)胞(bao)層(ceng)吹(chui)落(luo)、吹(chui)散；

3.取(qu)出部分細胞懸液轉移到新的培(pei)養(yang)皿/瓶中，添加(jia)適當的*培(pei)養(yang)基，于培(pei)養(yang)箱中培(pei)養(yang)；

4.注意培養基PH值變化情(qing)況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復傳代操作或者凍存。

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