hFOB 1.19，ATCC細(xi)胞(bao)株簡介：

產品名稱：hFOB 1.19

來源：美(mei)國(guo)ATCC

數量：大量

生長(chang)狀態：貼(tie)壁生長(chang)

器官來源：骨

相(xiang)關疾病(bing)：其他疾病(bing)

是否(fou)是腫(zhong)瘤(liu)細胞(bao)：0

物種來源：人

運(yun)輸方式：凍存運(yun)輸

庫(ku)存狀態：現貨(huo)

復蘇周期(qi)：10個(ge)工作日左(zuo)右(you)

美國(guo)(guo)ATCC品(pin)(pin)牌(pai)介(jie)紹：美國(guo)(guo)菌種(zhong)保(bao)藏中(zhong)心，又稱美國(guo)(guo)模式菌種(zhong)收集中(zhong)心(ATCC)，是(shi)位(wei)于(yu)馬里蘭洲洛(luo)克菲勒的一(yi)(yi)家私營的，非贏利性組織。目(mu)前它(ta)可(ke)以提供各種(zhong)動植物細(xi)胞、標(biao)準品(pin)(pin)、菌株達兩萬(wan)多(duo)種(zhong)。ATCC的成立(li)可(ke)追溯到(dao)1925年，一(yi)(yi)個科學(xue)委員會認識到(dao)科學(xue)研究對于(yu)微(wei)生(sheng)物的大量需求而萌發了(le)創建一(yi)(yi)個微(wei)生(sheng)物相(xiang)關(guan)制品(pin)(pin)供應(ying)中(zhong)心的想法。慧穎生(sheng)物通過(guo)自己的渠道為國(guo)(guo)內科研以及(ji)生(sheng)產用(yong)戶提供美國(guo)(guo)ATCC細(xi)胞株、菌株等(deng)生(sheng)物標(biao)準品(pin)(pin)。貨期短(duan)，*，不需要客戶填寫詳細(xi)資(zi)料，幫客戶辦理一(yi)(yi)切海關(guan)手續，方便快捷！

hFOB 1.19，ATCC細胞株，細胞培養的(de)(de)過程中，經常見到黑色的(de)(de)顆粒(li)或小黑點，這種情況是怎么引起(qi)的(de)(de)呢(ni)？該怎么避免呢(ni)？

原因(yin)：

黑點(dian)，大概有細胞本(ben)身(shen)(shen)帶的，環境(jing)有的，還(huan)有人身(shen)(shen)上帶進細胞間的， 還(huan)有就是血清(qing)和(he)培養基。

解決辦法：

1、如果小黑點有(you)增殖趨(qu)勢，那么就(jiu)有(you)可能是污染了(le)，需(xu)要處理(li)；

2、如果(guo)小黑點沒有(you)增殖趨勢(shi)，且(qie)不影(ying)(ying)響(xiang)細胞生長，也不影(ying)(ying)響(xiang)實驗的話，則(ze)可能(neng)

a、是(shi)(shi)(shi)「黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)」，黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)究竟是(shi)(shi)(shi)一(yi)種(zhong)生物還是(shi)(shi)(shi)非生物，本(ben)身就(jiu)存在(zai)爭(zheng)議。有(you)人認為(wei)是(shi)(shi)(shi)從血(xue)清中(zhong)(zhong)來(lai)的(de)(de)(de)(de)(de)一(yi)種(zhong)原蟲(chong)(chong)，也(ye)有(you)人認為(wei)是(shi)(shi)(shi)細(xi)菌(jun)，或是(shi)(shi)(shi)真菌(jun)，也(ye)有(you)人認為(wei)是(shi)(shi)(shi)血(xue)清中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)蛋白(bai)的(de)(de)(de)(de)(de)結晶(jing)。「黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)」可寄生于動(dong)(dong)物細(xi)胞，也(ye)可以(yi)(yi)(yi)生存于培養(yang)基中(zhong)(zhong)，依靠細(xi)胞和培養(yang)基中(zhong)(zhong)的(de)(de)(de)(de)(de)營(ying)養(yang)為(wei)生，并(bing)(bing)隨(sui)細(xi)胞傳(chuan)代而傳(chuan)代。「黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)」與細(xi)胞競爭(zheng)性(xing)生長(chang)，開(kai)始時(shi)對(dui)細(xi)胞并(bing)(bing)沒(mei)有(you)什么影響(xiang)，但當黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)的(de)(de)(de)(de)(de)數(shu)量(liang)多到一(yi)定(ding)程度的(de)(de)(de)(de)(de)時(shi)候(hou)， 細(xi)胞生長(chang)就(jiu)會(hui)受到影響(xiang)直至死亡，嚴重影響(xiang)了科研活動(dong)(dong)的(de)(de)(de)(de)(de)開(kai)展(zhan)和進行(xing)。以(yi)(yi)(yi)前(qian)（這個至少是(shi)(shi)(shi) 10 年以(yi)(yi)(yi)前(qian)），很(hen)多實驗(yan)室在(zai)養(yang)細(xi)胞時(shi)用(yong)國產(chan)(chan)血(xue)清，那時(shi)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清可能質量(liang)不(bu)過(guo)關，有(you)所謂的(de)(de)(de)(de)(de)「黑(hei)(hei)(hei)膠(jiao)蟲(chong)(chong)」，但是(shi)(shi)(shi)也(ye)沒(mei)有(you)明確的(de)(de)(de)(de)(de)鑒(jian)定(ding)。但是(shi)(shi)(shi)現在(zai)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清，即(ji)使國產(chan)(chan)的(de)(de)(de)(de)(de)，如四(si)季青等稍大(da)點(dian)的(de)(de)(de)(de)(de)廠家，產(chan)(chan)品里(li)這種(zhong)現象就(jiu)少見了。

b、是細胞碎片(pian)，或血(xue)清里德沉淀析出，在(zai)做(zuo)布朗運動。

c、是(shi)(shi)核(he)糖體，也可能是(shi)(shi)雜質

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，傳代培養

懸浮細(xi)胞(bao):

1.懸浮細(xi)胞(bao)常(chang)規(gui)傳代操作為半(ban)量(liang)換液(ye)，分(fen)瓶(ping)傳代，即(ji)取出一半(ban)細(xi)胞(bao)懸液(ye)轉移到新的培(pei)(pei)養(yang)皿/瓶(ping)中(zhong)(zhong)，添加適當的*培(pei)(pei)養(yang)基，于培(pei)(pei)養(yang)箱中(zhong)(zhong)培(pei)(pei)養(yang)；也可根據細(xi)胞(bao)密(mi)度分(fen)多瓶(ping)傳代。

2.注意培養(yang)基(ji)PH值變化情況(kuang)，定期換(huan)液，待(dai)細胞密度(du)達到70-80%時重(zhong)復傳(chuan)代操作或者(zhe)凍存(cun)。

半貼壁半懸浮細(xi)胞：

1.若懸浮細胞較多且折光率良好，可離心收集，繼續(xu)培養。

2.若有(you)少量細胞(bao)懸浮，也可不用收集，傳代操作(zuo)按(an)常規貼壁細胞(bao)操作(zuo)流程(cheng)處理(li)。

3.若懸(xuan)浮細胞(bao)較多，離心(xin)收(shou)集，原瓶中貼(tie)壁細胞(bao)按照常規(gui)規(gui)貼(tie)壁細胞(bao)操作流程進行消化(hua)、終止(zhi)消化(hua)、吹打，并與之前收(shou)集的懸(xuan)浮細胞(bao)混懸(xuan)，分瓶培養。

貼壁細胞:

1.吸出原培養瓶中的(de)培養基，PBS緩(huan)沖液(ye)潤(run)洗細胞兩次，加2~3 ml 含0.25% EDTA的(de)胰酶進行(xing)消(xiao)化（注意把握消(xiao)化時間，通常(chang)控制在1~2min）

2.鏡下觀察消化情況(kuang)，在細胞邊緣縮小(xiao)時去掉胰(yi)酶，加6~8 ml *培養基，輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打細胞層(ceng)，盡(jin)量把細胞層(ceng)吹落、吹散(san)；

3.取出部分細(xi)胞懸液轉移(yi)到新的培(pei)養皿/瓶中(zhong)，添加適當的*培(pei)養基，于培(pei)養箱中(zhong)培(pei)養；

4.注意培養(yang)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%以后重復(fu)傳代(dai)操作或者凍存。

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