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CL-34細胞,CL-34細胞十月*
細胞因子(cytokine,CK)是免(mian)疫原(yuan)、絲裂(lie)原(yuan)或(huo)其他刺激劑(ji)誘導(dao)多種細胞產生的低分子量可溶性(xing)蛋白質(zhi),具有調節固有免(mian)疫 和適應性免(mian)疫 、血細胞(bao)生(sheng)(sheng)成、細胞(bao)生(sheng)(sheng)長以及損(sun)傷組織(zhi)修復等(deng)多(duo)(duo)種(zhong)功(gong)能。細胞(bao)因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)可(ke)被(bei)分(fen)(fen)為白細胞(bao)介素(su)(su)、干擾素(su)(su)、腫瘤壞死(si)因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)超家族、集落(luo)刺激因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)、趨化因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)、生(sheng)(sheng)長因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)等(deng)。眾多(duo)(duo)細胞(bao)因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)在(zai)體內通過旁分(fen)(fen)泌、自分(fen)(fen)泌或內分(fen)(fen)泌等(deng)方式發(fa)揮作(zuo)用,具有多(duo)(duo)效性(xing)、重(zhong)疊性(xing)、拮抗性(xing)、協同性(xing)等(deng)多(duo)(duo)種(zhong)生(sheng)(sheng)理(li)特性(xing),形成了(le)十分(fen)(fen)復雜(za)的(de)細胞(bao)因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)調節網(wang)絡(luo),參與人體多(duo)(duo)種(zhong)重(zhong)要的(de)生(sheng)(sheng)理(li)功(gong)能。細胞(bao)因(yin)(yin)(yin)(yin)子(zi)的(de)作(zuo)用方式
重(zhong)組細(xi)胞(bao)因子要求:
1. 真實性:重組蛋白產品*經過(guo)N末端氨基(ji)酸序(xu)列分(fen)析(xi);必要(yao)時應用(yong)SDS-PAGE, RP-HPLC和質(zhi)譜(MS)檢測其真(zhen)實性(xing)。
2. 純度:應用SDS-PAGE和RP-HPLC方(fang)法(fa)分析(xi)產品純度。
3. 生物活(huo)性(xing):進行相應(ying)的體外(in vitro)或體(ti)內(in vivo)活性檢測。
4. 蛋白含量:通過紫外光(guang)譜分(fen)析,SDS-PAGE電泳檢測;必要時應用HPLC定量標準蛋白溶(rong)液(ye)。
5. 內毒素:kinetic LAL法(fa)檢測內(nei)毒素。
6. 微生物:重組蛋白在裝(zhuang)瓶之前都經(jing)過濾除(chu)菌處(chu)理。
重(zhong)組細胞因(yin)子的狀態:
市場上主流的重(zhong)組蛋(dan)白(bai)產(chan)品,多在不含載(zai)體蛋(dan)白(bai)或其他添加物(wu)(如BSA、HAS、蔗(zhe)糖(tang)等)的條件下,以低(di)鹽的形式做凍干(gan)處理,因此微量(多以微克計量)的細胞因子在(zai)凍干過程中會沉積于(yu)管內,形成很(hen)薄或不可(ke)見的蛋白層,所以(yi)建議(yi)在(zai)收到試劑后(hou),務必于(yu)開蓋前(qian)先離(li)心20-30秒,使可能附于(yu)管(guan)蓋或管(guan)壁的蛋白成分聚集于(yu)凍干館(guan)的底部(此時能(neng)否(fou)見到(dao)白(bai)色沉(chen)淀均屬正常(chang)現象(xiang))。
CL-34細胞,CL-34細胞十月*
(一)根據(ju)產生細胞(bao)因子(zi)的(de)細胞(bao)種(zhong)類不(bu)同分(fen)類
1.淋巴因子(lymphokine) 于命(ming)名,主要由淋巴(ba)細(xi)胞產生,包括T淋巴(ba)細(xi)胞、B淋巴(ba)細胞和NK細胞等。重要的淋巴因子有IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-9、IL-10、IL-12、IL-13、IL-14、IFN-γ、TNF-β、GM-CSF和神經白細(xi)胞素等。2.單(dan)核因子(monokine) 主要由單核細胞(bao)或(huo)巨噬細胞(bao)產生(sheng),如(ru)IL-1、IL-6、IL-8、TNF-α、G-CSF和M-CSF等3.非(fei)淋巴細胞、非(fei)單(dan)核-巨噬細胞產(chan)生的細胞因子 主要由骨髓和胸腺(xian)中的基質細(xi)(xi)胞(bao)、血(xue)管內皮細(xi)(xi)胞(bao)、成(cheng)纖維細(xi)(xi)胞(bao)等細(xi)(xi)胞(bao)產生,如(ru)EPO、IL-7、IL-11、SCF、內皮細胞源(yuan)性IL-8和IFN-β等。
(二)根據細胞因子(zi)主要的功能(neng)不同分類
1.白細胞介素(interleukin, IL) 1979年開(kai)始(shi)命名(ming)。由(you)淋巴細胞(bao)、單(dan)核(he)細胞(bao)或其它非單(dan)個核(he)細胞(bao)產生的(de)細胞(bao)因(yin)子(zi),在細胞(bao)間相互作用、免疫調(diao)節(jie)(jie)、造血以及炎癥過程中起(qi)重要(yao)調(diao)節(jie)(jie)作用,凡(fan)命名(ming)的(de)白細胞(bao)介素的(de)cDNA基因克隆和(he)表達均已成功,已報道有(you)三十余種(IL-1―IL-38)。2.集(ji)落刺激因子(colony stimulating factor, CSF) 根據不(bu)(bu)同(tong)(tong)細胞(bao)因子刺激造(zao)血干細胞(bao)或分化不(bu)(bu)同(tong)(tong)階段的(de)造(zao)血細胞(bao)在半固體培養(yang)基中形成(cheng)不(bu)(bu)同(tong)(tong)的(de)細胞(bao)集落,分別命名為G(粒細胞)-CSF、M(巨噬細胞)-CSF、GM(粒細胞、巨噬細胞)-CSF、Multi(多(duo)重)-CSF(IL-3)、SCF、EPO等。不同CSF不僅(jin)可(ke)刺激不同(tong)發育(yu)階段的(de)造血干細胞(bao)和祖細胞(bao)增(zeng)殖的(de)分化,還可(ke)促進成熟(shu)細胞(bao)的(de)功能(neng)。3.干(gan)擾素(interferon, IFN) 1957年發現(xian)的細胞因(yin)子(zi),zui初發現(xian)某一(yi)種病毒感染的細胞能產(chan)生(sheng)一(yi)種物質可(ke)干擾另一(yi)種病毒的感染和復(fu)制(zhi),因(yin)此而得名。根(gen)據干擾素產(chan)生(sheng)的來源(yuan)和結構不同,可(ke)分為IFN-α、IFN-β和(he)IFN-γ,他們分別由白細胞、成纖維細胞和活化(hua)T細胞所產(chan)生。各種不同的(de)IFN生物(wu)學活性基本相同(tong),具有(you)抗病(bing)毒、抗腫瘤和免疫(yi)調(diao)節等(deng)作用。4.腫(zhong)瘤壞死因子(tumor necrosis factor, TNF) zui初發現這種(zhong)物質能(neng)造成腫瘤組織(zhi)壞死而得名。根據其產生來源和結構不同,可分為TNF-α和(he)TNF-β兩類,前(qian)者由單(dan)核-巨噬細胞產生(sheng),后者由活化T細胞產生,又名淋巴毒素(lymphotoxin, LT)。兩(liang)類TNF基本的生物學活性(xing)相似,除具有(you)(you)殺傷腫瘤細胞外,還有(you)(you)免疫調節、參與(yu)發熱和(he)炎癥的發生。大劑量TNF-α可引(yin)起(qi)惡(e)液質,因而TNF-α又稱惡液(ye)質素(cachectin)。5.轉(zhuan)化生長因子-β家族(transforming growth factor-β family, TGF-β family) 由多(duo)種細(xi)胞產生,主要(yao)包括TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2以及骨(gu)形成蛋(dan)白(BMP)等(deng)。6.生長因(yin)子(growth factor,GF)如表(biao)皮生(sheng)長因(yin)子(EGF)、血小板衍生的(de)生長因子(PDGF)、成(cheng)纖維細胞生長(chang)因子(FGF)、肝細胞生長因子(zi)(HGF)、胰島素樣(yang)生長因子-I(IGF-1)、IGF-Ⅱ、白血病(bing)抑制因子(LIF)、神經生長因(yin)子(NGF)、抑瘤素M(OSM)、血小(xiao)板衍生(sheng)(sheng)的(de)內皮細胞生(sheng)(sheng)長因子(zi)(PDECGF)、轉(zhuan)化生長因子-α(TGF-α)、血管內(nei)皮(pi)細胞生(sheng)長因子(VEGF)等(deng)。7.趨化(hua)因子家(jia)族(chemokinefamily) 包括(kuo)四(si)個亞族:(1)C-X-C/α亞(ya)族,主要趨化中(zhong)性粒細胞,主要的成員有IL-8、黑(hei)素瘤細胞生激活性(GRO/MGSA)、血小板因(yin)子-4(PF-4)、血小板堿性蛋白(bai)(bai)、蛋白(bai)(bai)水解(jie)來源的產(chan)物CTAP-Ⅲ和β-thromboglobulin、炎癥蛋白10(IP-10)、ENA-78;(2)C-C/β亞族(zu),主(zhu)要趨(qu)化單核細(xi)胞(bao),這個亞族(zu)的成員包括巨噬細(xi)胞(bao)炎癥蛋白1α(MIP-1α)、MIP-1β、RANTES、單(dan)核(he)細(xi)胞趨化蛋白-1(MCP-1/MCAF)、MCP-2、MCP-3和I-309。(3)C型亞家(jia)族的(de)代表有淋巴細(xi)胞趨化蛋(dan)白。(4)CX3C亞(ya)家族,Fractalkine是CX3C型趨化(hua)因(yin)子,對單核-巨噬細胞、T細胞(bao)及NK細(xi)胞有趨化作用。
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