GIBCO 30067-334透析型胎牛血清 真正行貨

一旦您在細(xi)胞培(pei)養的過程中發現有黑(hei)(hei)點(dian)生成，首先，要(yao)肉眼觀察培(pei)養基是否混濁，然后，在鏡下觀察培(pei)養細(xi)胞生長的狀態，黑(hei)(hei)點(dian)是否游動。如果細(xi)胞被污(wu)染，微生物則(ze)會大(da)量繁(fan)殖，培(pei)養基就會迅速變(bian)黃、變(bian)混濁。污(wu)染包括細(xi)菌污(wu)染、支原體污(wu)染等。

如果在鏡下觀(guan)察細胞(bao)，生長狀態良好，與黑點出現前相比，沒有任何變化，那(nei)么，黑點的出現可能(neng)與以(yi)下幾種(zhong)情(qing)況有關(guan)：

(1)細胞生長過(guo)老，破碎的細胞殘骸;

(2)血(xue)清質(zhi)量不好，反(fan)復凍融的結果;

(3)配制培養基的(de)pH值偏高(gao)，不宜細(xi)胞生長;

(5)培養原(yuan)代細胞中(zhong)出現小黑點(dian)，可能是原(yuan)代組織中(zhong)的(de)雜質，多次傳代可以(yi)消(xiao)除。

 (4)配(pei)制培養基的水質、容器不合格。可應用(yong)離(li)心、過濾的方法去除這些黑(hei)點;

細胞培養(yang)中如(ru)何(he)防止黑點生(sheng)成

(1) 盡可(ke)能地減少(shao)血清凍(dong)融次數(shu)。

(2) 培養基無需37℃水(shui)浴。

(3) 培養基保持*PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴格控(kong)制配制培養基的(de)水(shui)質，容器(qi)定期(qi)刷(shua)洗。

(5) 掌(zhang)握(wo)細(xi)胞傳代的*時機(ji)，細(xi)胞切(qie)勿生(sheng)長過老。

血清(qing)中包含絮狀沉淀(dian)，它們是什么(me)，怎么(me)處(chu)理?

沉(chen)淀(dian)包含纖維蛋白和脂蛋白。這是正(zheng)常特性，不(bu)會(hui)(hui)影響(xiang)產品性質。要除去沉(chen)淀(dian)，離心(xin)血清(400g，1-2分(fen)鐘)或者簡單的(de)(de)讓其(qi)沉(chen)淀(dian)在(zai)瓶子底部，將(jiang)血清小心(xin)的(de)(de)轉移到另(ling)一(yi)個無菌瓶里(一(yi)般(ban)不(bu)建議采用過濾(lv)的(de)(de)方法(fa)除去沉(chen)淀(dian)，因為沉(chen)淀(dian)會(hui)(hui)堵塞濾(lv)膜(mo)而無法(fa)過濾(lv))。大多情況(kuang)輕輕搖動(dong)沉(chen)淀(dian)并(bing)加熱(re)至37℃就會(hui)(hui)再溶解。所以，使用產品時要搖動(dong)并(bing)加熱(re)血清至37℃，沉(chen)淀(dian)會(hui)(hui)自(zi)然消失。

GIBCO 30067-334透析型胎牛血清 真正行貨通(tong)常(chang)作為補充成(cheng)分(fen)添(tian)加在(zai)基(ji)礎(chu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)內使(shi)用。它(ta)能(neng)夠提供各(ge)種大分(fen)子蛋(dan)白，小(xiao)分(fen)子量營(ying)養(yang)，水溶性成(cheng)分(fen)的(de)轉運蛋(dan)白，和其它(ta)一些細胞(bao)在(zai)體(ti)(ti)外(wai)所(suo)必(bi)需的(de)成(cheng)分(fen)，如激素和附著因子。血清可以(yi)結合或中和一些生長因子中的(de)有毒成(cheng)分(fen)，并提供培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)的(de)緩沖能(neng)力。細胞(bao)培(pei)(pei)(pei)養(yang)時血清的(de)添(tian)加依賴于基(ji)礎(chu)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(ji)的(de)化學組(zu)成(cheng)，培(pei)(pei)(pei)養(yang)細胞(bao)的(de)類型，及所(suo)用的(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)系(xi)統。

我們在提(ti)供細胞培養(yang)基、平(ping)衡鹽溶液、無血清培養(yang)基和試(shi)劑(ji)的(de)(de)(de)同時，還提(ti)供高(gao)品質(zhi)的(de)(de)(de)血清。我們對血清制(zhi)備進(jin)行全過程監管。從血清收集到(dao)zui終產(chan)品檢驗和內部稽核的(de)(de)(de)每一(yi)個步驟，我們都采(cai)用設備和標準操(cao)作(zuo)程序，以確保(bao)整(zheng)個過程中每個環節(jie)的(de)(de)(de)產(chan)品質(zhi)量。對整(zheng)個過程的(de)(de)(de)控制(zhi)可(ke)以保(bao)證產(chan)品的(de)(de)(de)持續(xu)高(gao)品質(zhi)，降低(di)不同批次的(de)(de)(de)差異。

處理(li)：全部血(xue)(xue)清(qing)：收(shou)集的(de)血(xue)(xue)液均在冷(leng)藏(zang)條(tiao)件下處理(li)。血(xue)(xue)清(qing)和血(xue)(xue)分(fen)離后立即(ji)將血(xue)(xue)清(qing)合(he)并并冷(leng)凍。只有符(fu)合(he)我(wo)們的(de)檢測標準的(de)血(xue)(xue)清(qing)才被接受作進一步處理(li)。

熱滅活(huo)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)：熱滅活(huo)是在(zai)56℃水浴中(zhong)嚴格控溫30分(fen)鐘。透析(xi)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)：用10,000截(jie)留分(fen)子量的(de)(de)(de)(de)透析(xi)膜(mo)在(zai)0.15M的(de)(de)(de)(de)NaCl中(zhong)進(jin)(jin)行透析(xi)，直(zhi)到葡萄糖水平(ping)低于(yu)5mg/dl(用鄰甲苯(ben)胺(an)測試法(fa)檢驗)。γ射(she)(she)(she)線照(zhao)射(she)(she)(she)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)：可按客戶(hu)要求對血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)進(jin)(jin)行γ射(she)(she)(she)線照(zhao)射(she)(she)(she)。通(tong)過(guo)(guo)γ射(she)(she)(she)線照(zhao)射(she)(she)(she)以(yi)滅活(huo)各種(zhong)動物(wu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(包括胎牛血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)、新(xin)生牛血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)、豬血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)馬血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing))中(zhong)的(de)(de)(de)(de)病毒和(he)支(zhi)原(yuan)體的(de)(de)(de)(de)方(fang)法(fa)已經得到證實(shi)。研究證實(shi)照(zhao)射(she)(she)(she)劑量在(zai)30-45kGy為宜。血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)在(zai)此(ci)照(zhao)射(she)(she)(she)后(hou)物(wu)理化(hua)學特性(xing)和(he)細胞培養表現沒有(you)變化(hua)。裝(zhuang)瓶(ping)：粗血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須通(tong)過(guo)(guo)一(yi)系(xi)列的(de)(de)(de)(de)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)才成(cheng)為成(cheng)品(pin)。zui后(hou)的(de)(de)(de)(de)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)步(bu)驟包括使用0.2um和(he)0.1um的(de)(de)(de)(de)無菌過(guo)(guo)濾(lv)(lv)。胎牛血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須通(tong)過(guo)(guo)三次0.1um過(guo)(guo)濾(lv)(lv)，其他血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須通(tong)過(guo)(guo)0.2um過(guo)(guo)濾(lv)(lv)。zui終產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)(de)質量控制(zhi)：我們(men)采取(qu)以(yi)下方(fang)法(fa)對每一(yi)批次的(de)(de)(de)(de)產(chan)品(pin)選取(qu)一(yi)定數量的(de)(de)(de)(de)樣品(pin)進(jin)(jin)行質量控制(zhi)分(fen)析(xi)：

化學檢測(ce)(ce)：使用(yong)低溫凝(ning)固點的方法檢測(ce)(ce)滲(shen)透壓，以保(bao)證(zheng)符(fu)合產品規(gui)范。我們(men)每天(tian)使用(yong)國家標(biao)準的技術研究所(suo)標(biao)定的標(biao)準溶液對我們(men)的滲(shen)透壓檢測(ce)(ce)儀(yi)器進行校(xiao)準。同樣每天(tian)使用(yong)國家標(biao)準技術研究所(suo)標(biao)定的標(biao)準溶液對pH計進行校(xiao)準。

使(shi)用(yong)電泳圖(tu)譜鑒定血(xue)清的(de)(de)整(zheng)體性質。樣品被(bei)轉移(yi)到硝酸(suan)纖維素基質中，并在緩沖體系(xi)內遷移(yi)。條帶經染色、清潔、干燥后用(yong)密(mi)度(du)(du)儀進(jin)(jin)行掃描(miao)，以檢(jian)測白(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)和球蛋白(bai)(bai)組(zu)分的(de)(de)相對(dui)(dui)濃(nong)度(du)(du)。為證實是否在適當(dang)的(de)(de)條件下(xia)進(jin)(jin)行采血(xue)和處理，使(shi)用(yong)修飾的(de)(de)Fleming方法對(dui)(dui)血(xue)紅(hong)蛋白(bai)(bai)進(jin)(jin)行分光光度(du)(du)檢(jian)測。

隨著動(dong)物年(nian)齡的增加，血(xue)清總蛋(dan)白(bai)含(han)量也(ye)相應(ying)地提(ti)高。使用自動(dong)化(hua)的Biuret方法進行總血(xue)清蛋(dan)白(bai)的檢測(ce)，以(yi)確認動(dong)物年(nian)齡并(bing)驗證(zheng)符合(he)產品(pin)規范。使用色度計在不(bu)同波(bo)長(chang)下檢測(ce)樣品(pin)和Biuret試劑混合(he)波(bo)的吸光度。自動(dong)計算結(jie)果(guo)后，與(yu)標準曲線(xian)比較，即可(ke)得到蛋(dan)白(bai)值(克/公升)。

穩定(ding)性檢測程(cheng)序：在每一個標記為體外診斷的(de)(de)產(chan)品(pin)上顯示的(de)(de)效(xiao)期表明(ming)了(le)這個產(chan)品(pin)具(ju)有多長(chang)時間的(de)(de)效(xiao)能。我們的(de)(de)穩定(ding)性程(cheng)序確(que)定(ding)和證明(ming)了(le)產(chan)品(pin)效(xiao)期。我們定(ding)期監測批量產(chan)品(pin)，確(que)定(ding)產(chan)品(pin)在推薦(jian)貯存(cun)條件下(xia)具(ju)有可接受效(xiao)果(guo)的(de)(de)時間長(chang)度。

微(wei)生物(wu)學檢(jian)測(ce)(ce)：所(suo)有血清使用Barile&Kern的(de)大體積方法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)(ce)支原體。在(zai)推薦方法(fa)(fa)的(de)檢(jian)測(ce)(ce)范圍(wei)(wei)內檢(jian)測(ce)(ce)結果是準確的(de)。樣品(pin)至少應(ying)該(gai)在(zai)肉湯中(zhong)合并培(pei)養(yang)3個星期(qi)，同時要在(zai)瓊脂平(ping)板上進行(xing)(xing)(xing)不少于4次(ci)傳代培(pei)養(yang)。在(zai)有氧(yang)和厭氧(yang)(95%氮，5%CO2)條件下，平(ping)板在(zai)36±2℃下孵(fu)育。在(zai)檢(jian)測(ce)(ce)過程中(zhong)，每周對瓊脂平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)一次(ci)微(wei)生物(wu)生長情況(kuang)檢(jian)驗。使用Dienes染色(se)法(fa)(fa)對懷(huai)疑被污(wu)染的(de)瓊脂平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)支原體菌落的(de)檢(jian)測(ce)(ce)。然后(hou)，對平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)再(zai)次(ci)鏡檢(jian)。對孵(fu)育肉湯瓶要定期(qi)進行(xing)(xing)(xing)濁度和pH值變動的(de)檢(jian)測(ce)(ce)。在(zai)推薦方法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)(ce)范圍(wei)(wei)內，所(suo)有血清也要使用Hoechst熒光DNA染色(se)法(fa)(fa)進行(xing)(xing)(xing)不可在(zai)肉湯中(zhong)培(pei)養(yang)的(de)支原體(包括(kuo)M.hyorhinis屬)檢(jian)測(ce)(ce)。

病(bing)毒檢測(ce)：已知(zhi)無外來(lai)物(wu)質(zhi)的細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)須經過在包(bao)含15%測(ce)試血(xue)(xue)清(qing)的生(sheng)長培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)中(zhong)進行為(wei)(wei)期(qi)21天(tian)的三次傳代培(pei)(pei)養(yang)。使用對照培(pei)(pei)養(yang)基(ji)(ji)和已知(zhi)對外來(lai)物(wu)質(zhi)為(wei)(wei)陰(yin)性的血(xue)(xue)清(qing)平行地維持陰(yin)性對照培(pei)(pei)養(yang)。整個期(qi)間(jian)，檢測(ce)所(suo)有的培(pei)(pei)養(yang)情況，以便(bian)發現是否存(cun)在病(bing)毒誘(you)發的細(xi)(xi)胞形態改變(bian)或致細(xi)(xi)胞病(bing)變(bian)效(xiao)應(ying)。在14至21天(tian)的培(pei)(pei)養(yang)期(qi)間(jian)，對含有檢測(ce)血(xue)(xue)清(qing)的平行培(pei)(pei)養(yang)瓶按(an)下面(mian)標(biao)準病(bing)毒檢測(ce)方法(fa)進行評估。

將(jiang)其中一(yi)瓶檢(jian)測(ce)細胞(bao)用胰蛋白酶消化，然后(hou)把細胞(bao)分別加(jia)入到總面積為6cm 2 的六(liu)室載玻(bo)片上(shang)。同時(shi)準備陰性(xing)對照(zhao)載玻(bo)片。在(zai)檢(jian)測(ce)培養的單室載玻(bo)片上(shang)加(jia)入牛(niu)病毒(du)性(xing)腹瀉病毒(du)(BVDV)、牛(niu)細小病毒(du)、牛(niu)腺病毒(du)、狂犬病毒(du)和呼(hu)腸病毒(du)的染色劑(ji)，作為單個(ge)的陽性(xing)對照(zhao)。再經過7天培養(總共21天)，利用熒光(guang)抗體(ti)技術檢(jian)測(ce)病毒(du)。

通過對(dui)檢測培養進行蘇木精(jing)伊紅染(ran)色，觀察致細胞突變效應(ying)(CPE)或其他(ta)(ta)病毒誘導(dao)效應(ying)。檢測細胞是(shi)否存在CPE效應(ying)、內含物、多核體(ti)或其他(ta)(ta)異常效應(ying)。

內毒(du)素檢測：我們用阿(a)米巴變形(xing)細胞溶解物(wu)(LAL)凝膠法來檢測胎牛血清的內毒(du)素含量(liang)。

效能檢測(ce)：
對(dui)每一(yi)批次的(de)(de)胎(tai)牛血(xue)(xue)清(qing)，我們都(dou)進(jin)行下(xia)(xia)述培養效能檢(jian)測。選(xuan)擇(ze)血(xue)(xue)清(qing)zui重要的(de)(de)標準是其支持特殊細胞的(de)(de)生(sheng)長能力。因此，除了保(bao)證血(xue)(xue)清(qing)通過嚴(yan)格的(de)(de)品(pin)質控(kong)制，我們也同時在實驗室條件下(xia)(xia)對(dui)血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)三(san)個(ge)重要的(de)(de)培養效能進(jin)行檢(jian)測：克(ke)隆效率、貼(tie)壁效果和(he)二倍體成纖維細胞生(sheng)長促進(jin)。

克隆效率(lv)分析：克隆效率(lv)實驗分析每一(yi)批胎牛血清促進小鼠骨髓(sui)瘤(liu)細胞及其衍生的雜交瘤(liu)細胞的克隆和(he)生長能力。下列產(chan)品(pin)
經驗(yan)證可(ke)用于該實驗(yan)：
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每(mei)一(yi)(yi)批(pi)胎(tai)牛血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)都要分(fen)別在(zai)復制微(wei)(wei)量滴定(ding)平板上加入兩種血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)濃(nong)度(du)(du)和兩種細胞接種量(10%血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)和1cell/孔，4%血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)和5cells/孔)的(de)情況(kuang)下進行分(fen)析。克隆分(fen)析結果除以已確定(ding)的(de)參照血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)值得(de)以歸一(yi)(yi)化。在(zai)許多日常(chang)雜交選擇(ze)程序中具有(you)代表性的(de)是(shi)高濃(nong)度(du)(du)的(de)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)，而低(di)濃(nong)度(du)(du)血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)在(zai)設計血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)批(pi)次細微(wei)(wei)差異放(fang)大檢測(ce)中有(you)更為嚴格的(de)測(ce)試(shi)。嚴格的(de)1cell/孔測(ce)試(shi)是(shi)模擬單一(yi)(yi)雜交選擇(ze)的(de)實(shi)驗室條件。為每(mei)一(yi)(yi)批(pi)次胎(tai)牛血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)提供的(de)分(fen)析證明報告(gao)中的(de)克隆效率(lv)值為兩次測(ce)試(shi)條件下的(de)平均值。

克隆分(fen)析法：克隆分(fen)析法是在復式96孔(kong)板中加入兩(liang)種胎牛(niu)血清(qing)濃度(10%v/v)和(4%v/v)和兩(liang)種接種量(liang)的(de)情況下(xia)進行的(de)。每(mei)一次化驗(yan)中，同時(shi)測(ce)量(liang)前期已驗(yan)證合格的(de)一批胎牛(niu)血清(qing)，并將此測(ce)量(liang)值作為內部參考標準。
克隆分析(xi)按(an)下述方法進行(xing)：

1．Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在(zai)含有10%的胎牛血清的RPM1640中通(tong)常保持(chi)對數生長期。在(zai)顯微鏡下，利用臺盼藍排除法對活細胞進行計(ji)數。

2．用RPM1640培(pei)養(yang)基將(jiang)儲備細胞(bao)懸浮液進(jin)行連續稀釋(shi)，使其達到預期的(de)(de)25cells/ml和5cells/ml接種濃度。準(zhun)備含(han)有參照或測(ce)試胎(tai)牛血清的(de)(de)RPM1640培(pei)養(yang)基。將(jiang)這種密(mi)度的(de)(de)細胞(bao)分(fen)配到各個分(fen)析(xi)生長培(pei)養(yang)基體(ti)(ti)積(ji)為0.2毫升(sheng)的(de)(de)孔中，使其分(fen)別平均(jun)含(han)有5個和1個細胞(bao)。

3．將96孔板放入36±2℃，4-6% CO 2 的潮(chao)濕培養箱孵(fu)育約(yue)10至15天。

4．在孵育期(qi)間，用肉眼觀察平板并(bing)對用于克(ke)隆(long)的孔進行計數。克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)按(an)下列方法計算：克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)=(陽(yang)性孔平均數/孵育孔總數)×100%

5．每一批(pi)次胎牛(niu)血(xue)清(qing)維持(chi)指示劑骨(gu)髓瘤細(xi)胞(bao)克(ke)隆效率(lv)的(de)定(ding)量按(an)照(zhao)以(yi)下方法測(ce)(ce)得的(de)相對克(ke)隆效率(lv)(RCE)進(jin)行歸一化：RCE=檢(jian)測(ce)(ce)血(xue)清(qing)的(de)克(ke)隆效率(lv)/對照(zhao)血(xue)清(qing)的(de)克(ke)隆效率(lv)貼壁(bi)(bi)效率(lv)分(fen)(fen)析：貼壁(bi)(bi)效率(lv)分(fen)(fen)析是(shi)(shi)利用已轉型的(de)人類細(xi)胞(bao)系(xi)來檢(jian)測(ce)(ce)每一批(pi)血(xue)清(qing)促使(shi)持(chi)續貼附細(xi)胞(bao)系(xi)的(de)生長(chang)能力(li)。選(xuan)擇(ze)已被驗證可以(yi)檢(jian)測(ce)(ce)貼壁(bi)(bi)效率(lv)的(de)細(xi)胞(bao)系(xi)A549(人肺腫瘤細(xi)胞(bao)，ATCC#CCL,185)，是(shi)(shi)因(yin)為它可以(yi)區分(fen)(fen)一批(pi)血(xue)清(qing)維持(chi)細(xi)胞(bao)貼壁(bi)(bi)和(he)繁殖能力(li)的(de)細(xi)微差(cha)異(yi)。

每一(yi)(yi)批次(ci)(ci)胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)都要在兩種血(xue)(xue)清(qing)(qing)濃度和(he)兩種細胞(bao)接(jie)種濃度下(10%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)100cells/孔(kong)，4%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)200cells/孔(kong))測試(shi)三次(ci)(ci)。在36±2℃，4-6% CO 2 的(de)潮(chao)濕培養箱孵(fu)育(yu)約(yue)10至14天，對(dui)被染(ran)色的(de)細胞(bao)菌落進行計數(shu)即可(ke)(ke)得(de)(de)到其貼(tie)壁效(xiao)率。將(jiang)結果除(chu)以(yi)參考(kao)的(de)對(dui)照(zhao)血(xue)(xue)清(qing)(qing)得(de)(de)以(yi)歸一(yi)(yi)化。通過兩種血(xue)(xue)清(qing)(qing)濃度的(de)測試(shi)，可(ke)(ke)以(yi)驗(yan)證該批次(ci)(ci)血(xue)(xue)清(qing)(qing)在減(jian)量和(he)標(biao)準水(shui)平(ping)下維持生長的(de)能力。為每一(yi)(yi)批次(ci)(ci)胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)提供的(de)分析證明報(bao)告中的(de)貼(tie)壁效(xiao)率值為兩次(ci)(ci)測試(shi)條件下的(de)平(ping)均值。

貼壁分析法：使用貼附分析檢測(ce)(ce)上述每(mei)一(yi)(yi)批測(ce)(ce)試(shi)血(xue)清(qing)。這種分析法針對(dui)每(mei)一(yi)(yi)個血(xue)清(qing)樣(yang)品使用一(yi)(yi)個6孔板(ban)(每(mei)室9.6cm 2 )，并可以(yi)對(dui)三個孔的數據進行平均處理。每(mei)一(yi)(yi)次化驗(yan)中，同(tong)時測(ce)(ce)量前期(qi)已驗(yan)證合(he)格的一(yi)(yi)批胎牛血(xue)清(qing)，并將此測(ce)(ce)量值作為內部參考標準。

貼附分析按下述方法進(jin)行：

1．A549細(xi)胞系用含(han)有10%胎牛血清的DMEM培(pei)(pei)養基，在36±2℃，以亞融合密度下進行(xing)培(pei)(pei)養。

2．含10%(v/v)和4%(v/v)血清(qing)的(de)DMEM由分(fen)別(bie)在22.5毫(hao)升(sheng)和24毫(hao)升(sheng)DMEM中(zhong)加(jia)入(ru)2.5毫(hao)升(sheng)和1毫(hao)升(sheng)胎(tai)牛(niu)血清(qing)配制而成(cheng)，zui終有效(xiao)體積為(wei)25毫(hao)升(sheng)。將5毫(hao)升(sheng)含血清(qing)培養基分(fen)別(bie)加(jia)入(ru)6孔(kong)板的(de)每一個(ge)孔(kong)中(zhong)。

3．A549培養細胞(bao)先經過胰(yi)蛋白(bai)酶消化(hua)，測定活(huo)細胞(bao)數(shu)，然后稀釋細胞(bao)懸(xuan)浮液至2,000cells/ml。

4．將0.1毫(hao)升細胞(bao)懸浮(fu)(fu)液加入200cells/孔(kong)室(shi)中，0.05毫(hao)升懸浮(fu)(fu)液加入100cells/孔(kong)室(shi)中。平(ping)板(ban)混合后放入36±2℃，5%CO 2 的潮濕培養箱孵育(yu)約10至14天。

5．孵(fu)育后，取出平板，去(qu)除生長培養基(ji)，用(yong)亞甲基(ji)蘭-甲醇溶液對菌落進行染色。

6．計(ji)算菌落形成(cheng)，然后按下述方法計(ji)算貼壁效率(lv)：%貼壁效率(lv)=每(mei)(mei)孔菌落平均數/每(mei)(mei)孔孵育(yu)活細胞平均數×100

7．為方便比較，將測得(de)的(de)貼(tie)(tie)壁效(xiao)率(lv)數值除以每(mei)批檢(jian)測血清的(de)相(xiang)對貼(tie)(tie)壁效(xiao)率(lv)(RPE)得(de)以歸一化：RCE=檢(jian)測血清的(de)貼(tie)(tie)壁效(xiao)率(lv)/參照血清的(de)貼(tie)(tie)壁效(xiao)率(lv)二(er)倍體(ti)(ti)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞生長：促(cu)進(jin)生長分析用(yong)于檢(jian)測每(mei)一批胎牛(niu)血清維(wei)持難培養的(de)人二(er)倍體(ti)(ti)成(cheng)纖維(wei)細(xi)胞長期生長的(de)能力。

下列細胞系(xi)經(jing)認(ren)證可用于該實(shi)驗：

WI-38(人二倍體肺成纖(xian)維細胞(bao)，ATCC#CCL 75)

WI-38細胞(bao)在含(han)5%胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)(de)低(di)密度(2X10 5 /瓶(ping))復式(shi)25-cm 2瓶(ping)中孵(fu)育，并進(jin)行為(wei)期(qi)三個(ge)連續(xu)7天的(de)(de)傳(chuan)代(dai)培(pei)養。在每一(yi)個(ge)培(pei)養期(qi)，細胞(bao)都從初始孵(fu)育密度開始傳(chuan)代(dai)培(pei)養。壓力分層率、成倍繁殖數量(liang)和減量(liang)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)濃(nong)度是每批(pi)次(ci)促進(jin)難培(pei)養二倍體(ti)(ti)細胞(bao)的(de)(de)生長血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)(de)嚴格測(ce)試指標。通過連續(xu)三代(dai)培(pei)養以減少(shao)前一(yi)次(ci)生長培(pei)養基(ji)的(de)(de)殘(can)留影響，從而保證(zheng)得到(dao)檢(jian)測(ce)批(pi)促進(jin)生長能力的(de)(de)真實結(jie)果。為(wei)每一(yi)批(pi)次(ci)胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)提供的(de)(de)分析(xi)證(zheng)明報(bao)告為(wei)第三次(ci)傳(chuan)代(dai)培(pei)養每復式(shi)培(pei)養瓶(ping)細胞(bao)數的(de)(de)平均值(zhi)。將(jiang)檢(jian)測(ce)值(zhi)除(chu)以參考對照(zhao)值(zhi)得以歸一(yi)化。

二倍體成纖維細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)分析法：培養數代WI-38人(ren)類二倍體肺成纖維細(xi)胞(bao)，計算每一代的(de)細(xi)胞(bao)總數。此項檢(jian)測(ce)所(suo)挑選出的(de)胎牛血(xue)清批號能(neng)維持(chi)難(nan)以生(sheng)長(chang)細(xi)胞(bao)、貼壁性細(xi)胞(bao)、正常的(de)細(xi)胞(bao)株生(sheng)長(chang)及存(cun)活(huo)。

1．準備含(han)5%檢測血(xue)(xue)清(qing)(qing)或已驗證(zheng)合格的參(can)照血(xue)(xue)清(qing)(qing)生(sheng)長培(pei)養(yang)基，基礎生(sheng)長培(pei)養(yang)基為含(han)L-谷氨(an)酰胺的HBME：EBME(1：1)。按要(yao)求，在(zai)每一次流(liu)量變化和分析過程中進行傳(chuan)代培(pei)養(yang)時需配制含(han)5%血(xue)(xue)清(qing)(qing)生(sheng)長的培(pei)養(yang)基。

2．在(zai)(zai)低代(dai)培(pei)(pei)養水平時(shi)，將2X10 5 WI-38細(xi)胞加入各個含9.5毫升生長培(pei)(pei)養基(ji)的(de)復式25-cm 2 培(pei)(pei)養基(ji)中(zhong)。在(zai)(zai)不擰緊(jin)瓶蓋(gai)的(de)情況(kuang)下，將培(pei)(pei)養瓶放(fang)(fang)入4-6%CO 2， 36℃±2℃環境中(zhong)，保(bao)持(chi)24小時(shi)。然后(hou)擰緊(jin)瓶蓋(gai)，將培(pei)(pei)養瓶放(fang)(fang)在(zai)(zai)36℃±2℃下孵(fu)育7天，在(zai)(zai)第2天或第3天全部更換培(pei)(pei)養基(ji)。

3．在(zai)第7天，用胰蛋白(bai)酶(mei)對每一個含參照或檢(jian)測(ce)血清(qing)的(de)復(fu)(fu)式瓶(ping)中(zhong)的(de)細(xi)胞(bao)進行消化(hua)得到一定數量細(xi)胞(bao)，然后合并(bing)并(bing)計數。將2x10 5 WI-38細(xi)胞(bao)加入(ru)含有新鮮生長培養(yang)基(ji)(已(yi)加入(ru)了與上一代(dai)同(tong)一批次的(de)參照或檢(jian)測(ce)胎牛血清(qing))的(de)新的(de)復(fu)(fu)式25-cm 2 瓶(ping)中(zhong)，進行細(xi)胞(bao)傳代(dai)培養(yang)。按第2步所述，將培養(yang)瓶(ping)進行平(ping)衡(heng)并(bing)孵育(yu)。

4．如上(shang)所述(shu)經過(guo)三代連續分析，在(zai)每(mei)一(yi)代結束時計(ji)算每(mei)一(yi)批(pi)參照或檢測血清的(de)每(mei)瓶細胞平均(jun)數(shu)。zui后一(yi)代培養(yang)的(de)各批(pi)檢測血清實驗中的(de)相對生長(chang)率(lv)(RGR)作為(wei)參照血清實驗中獲(huo)得的(de)細胞生長(chang)率(lv)分子：

%RGR=檢測血(xue)清實驗中每(mei)瓶平(ping)均(jun)細胞(bao)數/參照血(xue)清實驗中每(mei)瓶平(ping)均(jun)細胞(bao)數X100S f9細胞(bao)生長(chang)促進分(fen)(fen)(fen)析(xi)。通過昆蟲分(fen)(fen)(fen)析(xi)可以保證您購買的(de)胎牛血(xue)清批次可以維持S f9細胞(bao)的(de)生長(chang)。收到產品后(hou)，您需(xu)要(yao)做的(de)就(jiu)是(shi)混勻血(xue)清，在(zai)56℃下熱滅活(huo)30分(fen)(fen)(fen)鐘。這種(zhong)分(fen)(fen)(fen)析(xi)法也可以用(yong)(yong)于乳白蛋白水(shui)解產品、酵母和其它生長(chang)輔料作為原料的(de)生物效(xiao)能分(fen)(fen)(fen)析(xi)。該(gai)分(fen)(fen)(fen)析(xi)法的(de)準確性取決于是(shi)否(fou)用(yong)(yong)常規的(de)細胞(bao)培養方(fang)案進行培養。用(yong)(yong)臺盼藍染色排除法測得的(de)細胞(bao)活(huo)性至少不低于80%。

細胞生(sheng)長分析法。

1．使用含(han)10%檢測或參照(zhao)熱(re)滅(mie)活胎(tai)牛血(xue)清的(de)已驗證(zheng)的(de)Grace昆(kun)明培(pei)養(yang)基配制*檢測培(pei)養(yang)基。

2．將(jiang)儲備(bei)Sf9細(xi)胞加(jia)入50毫(hao)升離(li)(li)心管(guan)中，在50Xg下離(li)(li)心5分鐘。然后(hou)將(jiang)每支試(shi)管(guan)的沉淀物重新用含10%的檢(jian)測(ce)或(huo)參照熱滅活胎(tai)牛(niu)血清*培養(yang)基配制成懸浮液。

3．反試管顛倒幾次，然后每支(zhi)試管倒出1毫升樣品。用(yong)臺盼藍染色排除(chu)進行活(huo)細胞計數。

4．如(ru)果(guo)活性(xing)≥80%，把試(shi)管再顛(dian)倒幾次并取出(chu)0.25毫升樣品。然后用(yong)Coulter計(ji)數器(qi)進行細胞計(ji)數。

5．將細(xi)胞(bao)加入(ru)Erlenmeyer瓶(ping)中，使其(qi)zui終細(xi)胞(bao)濃度為2.75X10 5 cells/ml。孵育后(hou)，再一(yi)次進行細(xi)胞(bao)計數，以保證細(xi)胞(bao)密度為2.5X10 5 至(zhi)3.0X10 5 cells/ml。

6．將培養瓶放到搖床(chuang)上，在27℃±1℃、80-90rpm條件下(xia)孵育96小時。

7．從每一(yi)培養瓶中(zhong)分別取(qu)出0.25毫(hao)升樣品(pin)，用(yong)Coulter計數器進行計數。同(tong)時取(qu)出一(yi)定量的樣品(pin)進行細(xi)胞活性(xing)檢測。

8．將檢測細胞密度(du)與參照細胞密度(du)相比即可得到相對細胞密度(du)(RCN)。

噬(shi)菌體(ti)檢測:我們利用溶菌斑分(fen)析法(fa)來檢測是(shi)否存在噬(shi)菌體(ti)。從每一批血(xue)清中取具代(dai)表性(xing)的樣品加(jia)入胰(yi)蛋白(bai)酶(mei)磷酸瓊(qiong)脂中，并在其(qi)加(jia)入含有噬(shi)菌體(ti)敏感的大腸桿菌懸浮液(C-3000或(huo)K-12)。然后，混(hun)合物會在胰(yi)蛋白(bai)酶(mei)磷酸瓊(qiong)脂平(ping)板上(shang)分(fen)層(ceng)，在36±2℃環境下孵(fu)育(yu)約24小時后，觀察平(ping)板上(shang)溶菌斑的形態。

生(sheng)化特(te)征檢測。

血紅蛋(dan)(dan)白(bai)檢測：所有批次的(de)胎牛血清我(wo)們都進行了血紅蛋(dan)(dan)白(bai)的(de)檢測，血紅蛋(dan)(dan)白(bai)含量(liang)低于(yu)《中國生物(wu)制品主要原(yuan)輔材料指(zhi)(zhi)控指(zhi)(zhi)標》(2000年(nian)版)公布(bu)的(de)指(zhi)(zhi)標。

效能檢(jian)測(ce)：其它血清

新生(sheng)(sheng)牛血清。檢測新生(sheng)(sheng)牛血清維持超(chao)過(guo)三代(dai)VERO細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)(sheng)長的(de)能力(li)。在每一個培(pei)養期(qi)，細(xi)(xi)胞(bao)(bao)都從初始(shi)孵(fu)育密(mi)度(du)開始(shi)傳代(dai)培(pei)養。可將所(suo)得結果與使(shi)用含有已知(zhi)特征的(de)參照血清對(dui)照生(sheng)(sheng)長培(pei)養基獲得的(de)平行結果進行比(bi)較。

馬血清。每一批(pi)馬血清被(bei)檢測維持在含(han)有檢測批(pi)血清的(de)(de)對照培養基上Sp2/0-Ag14(小鼠骨(gu)髓瘤(liu))細胞生長的(de)(de)能力(li)。可(ke)將所(suo)得結果與使(shi)用含(han)有已知特征的(de)(de)參照血清對照生長培養基獲得的(de)(de)平行(xing)結果進行(xing)比較。

血清的(de)使(shi)用(yong)與儲存(cun)：正確的(de)使(shi)用(yong)及保存(cun)血清，才(cai)能使(shi)血清發揮應有(you)的(de)作用(yong)。

1. 儲(chu)存條件：血(xue)清一般儲(chu)存于(yu)－20℃，同時應(ying)(ying)避免反復凍融(rong)。購買大(da)包裝(zhuang)的血(xue)清后(hou)，首先(xian)要滅(mie)活(huo)處(chu)理，然后(hou)分裝(zhuang)成小包裝(zhuang)，儲(chu)存于(yu)－20℃，使(shi)用前融(rong)化。融(rong)化時先(xian)置于(yu)4℃。融(rong)化后(hou)的血(xue)清在(zai)4℃不宜(yi)長時間(jian)存放，應(ying)(ying)盡快使(shi)用。

2. 使(shi)用濃度(du)：自(zi)從有了合成(cheng)培(pei)養基(ji)，血清就是(shi)(shi)作(zuo)為一(yi)(yi)種添加成(cheng)分與合成(cheng)培(pei)養基(ji)混合使(shi)用，使(shi)用濃度(du)一(yi)(yi)般為5－20％，zui常用是(shi)(shi)10％。過多血清容(rong)(rong)易使(shi)培(pei)養中(zhong)的(de)(de)細(xi)胞(bao)發(fa)生變(bian)化，特別是(shi)(shi)一(yi)(yi)些(xie)二倍體的(de)(de)無限(xian)細(xi)胞(bao)系，迅速生長之后容(rong)(rong)易發(fa)生惡性轉化。

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特級胎牛血(xue)清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

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特(te)級胎牛(niu)血清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

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特級胎牛血清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特(te)級胎牛血(xue)清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特級胎牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

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標準胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

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胎(tai)牛血清FBS A15-101 EU 500ML PAA

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關于使用中的常(chang)見問(wen)題

1.保存血清(qing)的辦(ban)法？
我們建議血清應(ying)保存在-5℃至-20℃。若你一(yi)次無(wu)法(fa)用完一(yi)瓶(ping)，建議您無(wu)菌(jun)分裝(zhuang)血清至恰當的滅菌(jun)容器內(nei)，再放回冷(leng)凍。

2.如(ru)何(he)解凍血(xue)清(qing)才不會使(shi)產品質量受(shou)損(sun)？
我們建議您將血清(qing)從冷凍箱(xiang)中(zhong)(zhong)取出后(hou)，先置于2-8℃冰箱(xiang)中(zhong)(zhong)使(shi)(shi)之(zhi)溶(rong)解(jie)，然后(hou)在室溫下使(shi)(shi)之(zhi)全(quan)溶(rong)。但必須(xu)注意的是，溶(rong)解(jie)過程中(zhong)(zhong)必須(xu)規則(ze)地搖晃均勻。

3.血(xue)清解(jie)凍(dong)后發(fa)現有(you)絮(xu)狀沉(chen)淀(dian)物出(chu)現，該(gai)如(ru)何(he)處理？
血(xue)清(qing)(qing)中沉淀物的出現有許多(duo)原因(yin)，但(dan)zui普遍(bian)的原因(yin)是由于(yu)血(xue)清(qing)(qing)中脂(zhi)蛋白的變(bian)性造成(cheng)(cheng)的；而血(xue)纖維(wei)蛋白(形成(cheng)(cheng)凝血(xue)的蛋白之一)在血(xue)清(qing)(qing)解凍后，也(ye)會存在于(yu)血(xue)清(qing)(qing)中，亦是造成(cheng)(cheng)血(xue)清(qing)(qing)沉淀物的主要原因(yin)之一。但(dan)這些絮狀沉淀物，并不影響血(xue)清(qing)(qing)本身(shen)的質(zhi)量。
若您欲去除這些絮(xu)狀沉淀物(wu)，可以(yi)將血清(qing)分裝至無菌離心管中(zhong)，以(yi)400g稍(shao)微離心，上清(qing)液(ye)即(ji)可接著加(jia)入(ru)培養(yang)基內一起過濾(lv)。我們不建議您以(yi)過濾(lv)的(de)(de)方(fang)法去除這些絮(xu)狀沉淀物(wu)，因為它可能會(hui)阻塞您的(de)(de)過濾(lv)膜(mo)。

4.何謂(wei)熱(re)滅(mie)活(huo)？有必要做(zuo)熱(re)滅(mie)活(huo)嗎？
一般(ban)以56℃，30分鐘水浴(yu)來處(chu)理已解凍的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)，因為此加熱步驟，可以使補(bu)體(ti)去活(huo)性，而補(bu)體(ti)所參與的(de)(de)(de)(de)(de)反應有(you)：溶(rong)細(xi)(xi)胞(bao)活(huo)性，平滑肌的(de)(de)(de)(de)(de)收縮，肥(fei)大細(xi)(xi)胞(bao)和(he)血(xue)小板組胺(an)的(de)(de)(de)(de)(de)釋放，增強(qiang)吞(tun)噬作用，淋(lin)巴細(xi)(xi)胞(bao)、巨噬細(xi)(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)趨化和(he)激(ji)活(huo)。實(shi)驗顯示，經(jing)過(guo)正確處(chu)理的(de)(de)(de)(de)(de)熱滅活(huo)血(xue)清(qing)，對大多數(shu)的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)而言是不需要的(de)(de)(de)(de)(de)。經(jing)過(guo)處(chu)理的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)對細(xi)(xi)胞(bao)生長(chang)只(zhi)有(you)微小的(de)(de)(de)(de)(de)促(cu)進，或*沒有(you)任(ren)何(he)作用，甚至通常因為高(gao)溫處(chu)理影響(xiang)了血(xue)清(qing)的(de)(de)(de)(de)(de)質量，而造成細(xi)(xi)胞(bao)生長(chang)速率的(de)(de)(de)(de)(de)降低。
而(er)經過熱處理的(de)血清(qing)，沉淀(dian)物(wu)(wu)的(de)形成會顯(xian)著的(de)增多，這些沉淀(dian)物(wu)(wu)在(zai)倒置顯(xian)微鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究(jiu)者誤(wu)以為是血清(qing)遭(zao)受(shou)污(wu)染，而(er)把血清(qing)放(fang)在(zai)37℃環(huan)境中，又會使此(ci)沉淀(dian)物(wu)(wu)更增多，使研究(jiu)者認為是微生物(wu)(wu)的(de)分裂(lie)擴增。因此(ci)我們(men)建議(yi)您(nin)，若非必須，您(nin)可以不(bu)需要做熱滅活(huo)這一步。如此(ci)以來，不(bu)但節(jie)省您(nin)寶貴的(de)時(shi)間，更確(que)保您(nin)血清(qing)的(de)質量(liang)！

5.如何避免沉淀物(wu)的(de)出現？
我們建議(yi)您在(zai)使用(yong)血清(qing)(qing)的時候(hou)，注意正(zheng)確的血清(qing)(qing)解凍步驟，并盡量避免滅(mie)活血清(qing)(qing)及(ji)長時間(jian)的將血清(qing)(qing)置于高溫環境中。

胎牛血清，小牛血清和新生牛血清三種之間的區(qu)別(bie)：

這三種血(xue)清的(de)成份，總體沒有(you)什么(me)明顯(xian)差(cha)別，只是有(you)一(yi)些成分與(yu)(yu)其生存環境有(you)關，如上述有(you)人說的(de)抗體等很少(shao)。此外，因生長發(fa)育(yu)的(de)需要，有(you)些成分在小牛(niu)出(chu)生后會(hui)發(fa)生一(yi)些變化。不(bu)過還沒有(you)搞清楚它(ta)與(yu)(yu)其它(ta)的(de)血(xue)清之間的(de)差(cha)別。有(you)一(yi)點可以肯定，胎牛(niu)血(xue)清中的(de)部分功能蛋(dan)白與(yu)(yu)小牛(niu)血(xue)清中的(de)含量有(you)差(cha)別。

胎牛本身生(sheng)活(huo)在一個潔凈環境當中，其血(xue)清與外界隔絕，只要生(sheng)產工藝科學規范，其質量肯(ken)定(ding)要新生(sheng)牛和小牛要好。

血(xue)(xue)清(qing)(qing)是血(xue)(xue)漿去(qu)除(chu)纖維蛋白(bai)而(er)形成(cheng)的一種很(hen)復雜的混合物(wu)(wu)，其組(zu)成(cheng)成(cheng)份雖(sui)大部分(fen)已知，但還有(you)一部分(fen)尚(shang)不(bu)(bu)清(qing)(qing)楚，且(qie)血(xue)(xue)清(qing)(qing)組(zu)成(cheng)及含量常隨供血(xue)(xue)動物(wu)(wu)的性(xing)別(bie)、年(nian)齡、生(sheng)理(li)條(tiao)件和(he)營養條(tiao)件不(bu)(bu)同而(er)異(yi)。血(xue)(xue)清(qing)(qing)中含有(you)各種血(xue)(xue)漿蛋白(bai)、多肽(tai)、脂肪、碳水(shui)化合物(wu)(wu)、生(sheng)長(chang)因子、激素、無機物(wu)(wu)等，這些物(wu)(wu)質對促進細(xi)胞生(sheng)長(chang)或抑制生(sheng)長(chang)活性(xing)是達到(dao)生(sheng)理(li)平衡(heng)的。對血(xue)(xue)清(qing)(qing)的成(cheng)分(fen)和(he)作用的研究雖(sui)有(you)很(hen)大進展，但仍存在一些問(wen)題。

胎牛血清(qing)是品質zui高的，因為(wei)胎牛還未接觸外界，血清(qing)中所含的抗體、補體等對細胞有害的成分zui少(shao)。

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另(ling)外慧穎生(sheng)物熱銷產品還(huan)有：

貨號(hao) 品(pin)牌 名稱 規(gui)格(ge) 血源產地 產(chan)品適(shi)用范(fan)圍 價(jia)格

S-EXO-US-50 SUER 無外(wai)秘(mi)體(ti)血(xue)清 50ml/250/500ml 北美(mei) 用于exo的(de)細胞研究 詢價(jia)

貨號 貨號 名(ming)稱 規格 血源產地 產品說明 價格

EXO-FBS-50A-1 SBI 無外秘體血清 50ml 北美 用于exo的細(xi)胞研究 詢價(jia)

貨號 品牌 名稱 規(gui)格 產地 產品適(shi)用范圍 價格(ge)

11269-016 gibco 羊水(shui)培養(yang)基 100ml 美(mei)國 用于體外羊水細(xi)胞與絨毛膜細(xi)胞培養 詢(xun)價

10828-028 gibco 無血清培養基 500ml 美國 用于細胞的(de)以(yi)制備單克隆抗體，病毒抗原和重組(zu)蛋(dan)白等 詢價

12558011 gibco AmnioMAX™ C-100 Complete Medium 1 set 美國 羊水 詢(xun)價

10902088 gibco Sf-900™ II SFM 1000ML 美國(guo) 昆蟲 sf9,sf21 詢價

12338018 gibco FreeStyle™ 293 Expression Medium 1000ML 美國(guo) FreeStyle 293-F cells 詢(xun)價

A2503101 gibco EfficientFeed™ C+ AGT™ Supplement 100L 美國 Feed 詢價

A1327501 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 100L 美國 詢價

A1327505 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 100L 美(mei)國 詢價(jia)

A1327504 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 1L 美國(guo) 詢價

A1024001 gibco CHO CD EfficientFeed™ B Liquid Nutrient Supplement 1000ML 美國 詢價

A1023401 gibco CHO CD EfficientFeed™ A Nutrient Supplement 1000ML 美國(guo) 詢價

A2617502 gibco  Dynamis™ AGT™ Medium 100L 美國(guo) Dynamls 詢價(jia)

A1148301 gibco CD FortiCHO™ Medium 1000ML 美(mei)國 CD FortiCHO 詢價(jia)

A1122201 gibco  CD OptiCHO™ AGT™ 1000ML 美國 CD OptiCHO DG44,DXB11,or other CH 詢價

12681011 gibco CD OptiCHO™ Medium (1X), Liquid 1000ML 美(mei)國(guo) 詢(xun)價(jia)

12490001 gibco CD CHO AGT™ 100L 美國 CD CHO 詢價

12490025 gibco CD CHO AGT™ 10L 美國 詢價

10743029 gibco  CD CHO Medium (1X), Liquid 1000ML 美國 詢價(jia)

A29129 gibco ExpiFectamine™ CHO Transfection Kit For 1 L of culture 美國 Expi 詢價

A2910001 gibco  ExpiCHO™ Expression Medium 1000ML 美國 詢價(jia)

C11885500BT gibco DMEM 低糖(tang)培(pei)養(yang)基(ji) 500ml 國產(chan) 含1000mg/L D-葡萄糖、L-谷氨(an)酰胺、110mg/L丙酮酸鈉(na)和酚紅，不含HEPES緩沖(chong)液 詢(xun)價(jia)

C11960500BT gibco DMEM 高糖(tang)培(pei)養基 500ml 國產 含(han)4500mg/L D-葡萄(tao)糖和(he)酚(fen)紅，不含(han)L-谷氨酰胺、丙酮(tong)酸鈉(na)和(he)HEPES緩沖(chong)液(ye) 詢價

C11965500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺和(he)酚(fen)紅(hong)，不含丙酮酸鈉和(he)HEPES緩沖(chong)液(ye) 詢(xun)價(jia)

C11995500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡(pu)萄糖 L-谷氨酰胺 110mg/L丙酮酸鈉和酚紅，不含HEPES緩沖(chong)液 詢(xun)價

C12430500BT gibco 500ml 國產 含(han)(han)4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺、25mM HEPES緩沖液和(he)酚紅，不含(han)(han)丙酮(tong)酸(suan)鈉 詢(xun)價

C11875500BT gibco RPMI 1640培養基(ji) 500ml 國產(chan) 含L-谷氨酰胺和酚紅(hong),不含HEPES緩(huan)沖液(ye) 詢價

C22400500BT gibco 500ml 國產 含25mM HEPES緩沖液、L-谷氨酰(xian)胺和酚(fen)紅 詢價

C11095500BT gibco MEM EARLES培(pei)養(yang)基 500ml 國產 含(han)Earle's平衡(heng)鹽(yan)、L-谷氨酰胺(an)和酚紅，不含(han)HEPES緩沖液 詢價

C11330500BT gibco DMEM /F12 500ml 國(guo)產 1:1，含(han)15mM HEPES緩沖(chong)液、L-谷氨(an)酰胺和酚(fen)紅 詢價

C12571500BT gibco MEM ALPHA 500ml 國產 含L-谷氨酰(xian)胺、核苷、脫氧核苷和酚紅 詢價

C14190500BT gibco DPBS 500ml 國產 1X,不(bu)含(han)氯化(hua)鈣、氯化(hua)鎂和(he)酚紅 詢價

C10010500BT gibco PBS 7.4 (1X) 500ml 國產 1X,不(bu)含氯化(hua)鈣、氯化(hua)鎂和酚(fen)紅(hong)，細胞培養級 詢價

C20012500BT gibco PBS 7.2 (1X) 500ml 國產 1X,不含氯化鈣、氯化鎂和酚(fen)紅，細胞培養級 詢(xun)價

SH30022.01 Hyclone DMEM高糖培養基 500ML 國產 含(han)4.0 mM L-谷氨酰(xian)胺，不含(han)丙酮(tong)酸鈉。

SH30809.01 Hyclone 1640培養(yang)基 500ML 國產(chan)

SH30022.01 DMEM高糖液體培養(yang)基 DMEM HyClone 500ml

SH30809.01 1640液體培養基 1640 HyClone 500ml

SH30021.01 DMEM低(di)糖(tang)液體(ti)培(pei)養基 DMEM HyClone 500ml

SH30023.01 DMEM/F12(1:1)液體培養(yang)基 DMEM/F12(1:1) HyClone 500ml

SH30024.01 MEM液體(ti)培養基(ji) MEM HyClone 500ml

SH30026.01 MEM液(ye)體(ti)培養基(ji) F12 HyClone 500ml

SH30228.01 IMDM液(ye)體培養基 IMDM HyClone 500ml

SH30243.01 DMEM高糖[含丙酮酸鈉] DMEM HyClone 500ml

SH30253.01 M199液體培養基 M199 HyClone 500ml

SH30256.01 PBS緩沖液 PBS HyClone 500ml

SH30265.01 α-MEM液(ye)體培養(yang)基(ji) α-MEM HyClone 500ml

SH30238.01 非必須氨基酸 **** HyClone 100ml

SH30042.01 胰蛋白酶溶液 **** HyClone 100ml

SV30010 青霉素(su)鏈霉素(su)溶液   ;雙抗 **** HyClone 100ml