Gibco馬血清 16050-114/16050-122/16050-130

Horse Serum, New Zealand Origin

Gibco™ sera offers excellent value for basic cell culture, specialty research, and specific assays, earning the trust of researchers with consistent quality and award-winning support that helps meet your research needs and budget requirements

Sera Category: Specialty

Origin: New Zealand.

EIA tested (negative) serum from a donor herd.

This reagent is classified as a medical device in several countries. If it is not regulated as a medical device in specific region, it should be used for laboratory use only.

儲存溫(wen)度(du)：-20°C

有(you)效期：五年

一旦您在細胞培(pei)(pei)養(yang)的(de)過程中發現有黑(hei)點生(sheng)成，首先(xian)，要肉眼觀(guan)察培(pei)(pei)養(yang)基(ji)是否混濁，然后(hou)，在鏡下觀(guan)察培(pei)(pei)養(yang)細胞生(sheng)長的(de)狀(zhuang)態，黑(hei)點是否游動(dong)。如果細胞被污(wu)染，微生(sheng)物(wu)則會(hui)大量(liang)繁殖，培(pei)(pei)養(yang)基(ji)就會(hui)迅(xun)速變黃、變混濁。污(wu)染包(bao)括細菌污(wu)染、支原體污(wu)染等。

如果在鏡下(xia)觀(guan)察細胞，生長(chang)狀態良好(hao)，與(yu)黑點出現前(qian)相比(bi)，沒有任(ren)何變化，那么，黑點的出現可能與(yu)以(yi)下(xia)幾種情(qing)況有關：

(1)細(xi)胞(bao)生長(chang)過(guo)老，破碎的(de)細(xi)胞(bao)殘骸;

(2)血清質量不好，反復凍融的(de)結果;

(3)配(pei)制培(pei)養基(ji)的pH值偏高，不宜細胞(bao)生長;

(5)培養原(yuan)代細胞中出現小黑點，可能是原(yuan)代組織中的雜質，多次傳(chuan)代可以消除。

 (4)配制培養基的水質、容器不合格(ge)。可應用離心、過濾的方法去除這些黑點;

細胞培養中如何防(fang)止黑點生成

(1) 盡可能地減少(shao)血清凍融次數(shu)。

(2) 培養基無需37℃水浴。

(3) 培養基保持*PH值(zhi)7.0- 7.2。

(4) 嚴格(ge)控(kong)制(zhi)配制(zhi)培養基的水質，容器定期刷洗(xi)。

(5) 掌握細胞(bao)傳代的(de)*時機，細胞(bao)切勿(wu)生(sheng)長過老。

血(xue)清中包含絮(xu)狀沉淀，它們是什么(me)(me)，怎么(me)(me)處理(li)?

沉淀包(bao)含(han)纖維蛋(dan)白(bai)和脂蛋(dan)白(bai)。這是正常特性(xing)，不會(hui)影響產品(pin)性(xing)質。要除(chu)去(qu)沉淀，離心(xin)血(xue)清(qing)(400g，1-2分鐘)或者簡單的讓其沉淀在瓶(ping)子底部，將血(xue)清(qing)小(xiao)心(xin)的轉(zhuan)移(yi)到(dao)另一個無菌瓶(ping)里(li)(一般(ban)不建(jian)議(yi)采用過(guo)濾的方法(fa)除(chu)去(qu)沉淀，因為沉淀會(hui)堵塞濾膜而(er)無法(fa)過(guo)濾)。大多(duo)情況輕輕搖(yao)動沉淀并加熱至37℃就會(hui)再溶解(jie)。所以，使用產品(pin)時要搖(yao)動并加熱血(xue)清(qing)至37℃，沉淀會(hui)自然消失(shi)。

Gibco馬血清 16050-114/16050-122/16050-130 通常作為補(bu)充成分(fen)添加(jia)在(zai)(zai)基礎(chu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基內(nei)使用。它能(neng)夠提供各種大分(fen)子(zi)(zi)蛋(dan)白，小(xiao)分(fen)子(zi)(zi)量營養(yang)(yang)，水(shui)溶性成分(fen)的轉運(yun)蛋(dan)白，和(he)其它一些(xie)細(xi)(xi)胞在(zai)(zai)體(ti)外所(suo)必需的成分(fen)，如激素(su)和(he)附著因(yin)子(zi)(zi)。血清可(ke)以結合或中和(he)一些(xie)生(sheng)長因(yin)子(zi)(zi)中的有毒成分(fen)，并提供培(pei)(pei)養(yang)(yang)基的緩沖能(neng)力。細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)(yang)時血清的添加(jia)依賴于基礎(chu)培(pei)(pei)養(yang)(yang)基的化(hua)學組成，培(pei)(pei)養(yang)(yang)細(xi)(xi)胞的類(lei)型，及所(suo)用的培(pei)(pei)養(yang)(yang)系(xi)統。

我(wo)們在提(ti)供(gong)(gong)細(xi)胞培養(yang)基、平衡鹽溶液、無血清(qing)(qing)培養(yang)基和(he)試(shi)劑(ji)的(de)(de)(de)(de)同(tong)時，還提(ti)供(gong)(gong)高品(pin)質的(de)(de)(de)(de)血清(qing)(qing)。我(wo)們對(dui)血清(qing)(qing)制備進行全過(guo)程(cheng)監管。從(cong)血清(qing)(qing)收集到zui終產(chan)品(pin)檢驗和(he)內部(bu)稽(ji)核的(de)(de)(de)(de)每(mei)(mei)一(yi)個步驟(zou)，我(wo)們都采用設備和(he)標(biao)準操作程(cheng)序，以確保(bao)整個過(guo)程(cheng)中每(mei)(mei)個環節的(de)(de)(de)(de)產(chan)品(pin)質量。對(dui)整個過(guo)程(cheng)的(de)(de)(de)(de)控制可以保(bao)證產(chan)品(pin)的(de)(de)(de)(de)持續高品(pin)質，降低(di)不同(tong)批次(ci)的(de)(de)(de)(de)差異。

處(chu)(chu)理：全部血(xue)清(qing)(qing)：收(shou)集的血(xue)液均在(zai)冷藏條件下處(chu)(chu)理。血(xue)清(qing)(qing)和血(xue)分離后(hou)立即將血(xue)清(qing)(qing)合并(bing)并(bing)冷凍。只有符合我們的檢(jian)測標(biao)準的血(xue)清(qing)(qing)才被接受作進一步處(chu)(chu)理。

熱(re)滅(mie)活(huo)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)：熱(re)滅(mie)活(huo)是在56℃水浴(yu)中(zhong)(zhong)嚴格控溫(wen)30分(fen)(fen)鐘。透析(xi)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)：用10,000截留分(fen)(fen)子量(liang)的(de)(de)透析(xi)膜在0.15M的(de)(de)NaCl中(zhong)(zhong)進(jin)行透析(xi)，直到葡萄糖水平低(di)于5mg/dl(用鄰甲(jia)苯胺測試(shi)法檢驗)。γ射(she)(she)(she)線照射(she)(she)(she)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)：可按客戶要求對(dui)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)進(jin)行γ射(she)(she)(she)線照射(she)(she)(she)。通(tong)過(guo)γ射(she)(she)(she)線照射(she)(she)(she)以滅(mie)活(huo)各種動物(wu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)(包括胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)、新生牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)、豬血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)和馬血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing))中(zhong)(zhong)的(de)(de)病(bing)毒和支原體(ti)的(de)(de)方(fang)法已(yi)經得到證實。研究證實照射(she)(she)(she)劑量(liang)在30-45kGy為宜。血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)在此(ci)照射(she)(she)(she)后(hou)物(wu)理化學特性和細(xi)胞培養表現沒(mei)有變(bian)化。裝瓶：粗血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)須(xu)(xu)通(tong)過(guo)一系列的(de)(de)過(guo)濾(lv)(lv)才成(cheng)為成(cheng)品。zui后(hou)的(de)(de)過(guo)濾(lv)(lv)步驟(zou)包括使用0.2um和0.1um的(de)(de)無菌過(guo)濾(lv)(lv)。胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)須(xu)(xu)通(tong)過(guo)三次0.1um過(guo)濾(lv)(lv)，其他血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)須(xu)(xu)通(tong)過(guo)0.2um過(guo)濾(lv)(lv)。zui終產(chan)品的(de)(de)質量(liang)控制：我們采取(qu)以下方(fang)法對(dui)每一批次的(de)(de)產(chan)品選(xuan)取(qu)一定數量(liang)的(de)(de)樣品進(jin)行質量(liang)控制分(fen)(fen)析(xi)：

化(hua)學檢(jian)測(ce)：使用(yong)低溫凝(ning)固(gu)點(dian)的(de)方法檢(jian)測(ce)滲透(tou)壓，以保證符(fu)合產品(pin)規范(fan)。我們每天使用(yong)國家標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)的(de)技(ji)術研究所(suo)標(biao)(biao)定的(de)標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)溶液對(dui)我們的(de)滲透(tou)壓檢(jian)測(ce)儀(yi)器進(jin)行校準(zhun)(zhun)。同樣(yang)每天使用(yong)國家標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)技(ji)術研究所(suo)標(biao)(biao)定的(de)標(biao)(biao)準(zhun)(zhun)溶液對(dui)pH計進(jin)行校準(zhun)(zhun)。

使用(yong)電泳圖譜鑒定血清(qing)的整體(ti)(ti)性質。樣品被(bei)轉(zhuan)移到硝酸纖維(wei)素基質中，并在(zai)緩沖體(ti)(ti)系內遷(qian)移。條帶經(jing)染色、清(qing)潔、干燥(zao)后用(yong)密度儀進行(xing)掃描，以檢測(ce)(ce)白蛋白和球蛋白組(zu)分的相對(dui)(dui)濃度。為(wei)證實(shi)是否在(zai)適(shi)當的條件(jian)下進行(xing)采(cai)血和處(chu)理，使用(yong)修(xiu)飾(shi)的Fleming方法對(dui)(dui)血紅蛋白進行(xing)分光(guang)光(guang)度檢測(ce)(ce)。

隨著動物年(nian)齡(ling)的增加，血清總蛋白含量也相應地提高(gao)。使(shi)用(yong)自動化(hua)的Biuret方法進(jin)行總血清蛋白的檢(jian)測，以(yi)確(que)認動物年(nian)齡(ling)并驗證符(fu)合產品(pin)規范。使(shi)用(yong)色度(du)計(ji)在(zai)不(bu)同波長下(xia)檢(jian)測樣品(pin)和Biuret試(shi)劑混(hun)合波的吸(xi)光度(du)。自動計(ji)算結果后，與標準(zhun)曲線(xian)比(bi)較，即(ji)可得到蛋白值(克(ke)/公升)。

穩定(ding)(ding)(ding)(ding)性檢測程序：在每一個(ge)標(biao)記為(wei)體外診斷的產品(pin)上顯示的效(xiao)期表明了這個(ge)產品(pin)具有多長時(shi)間的效(xiao)能。我(wo)們的穩定(ding)(ding)(ding)(ding)性程序確定(ding)(ding)(ding)(ding)和證明了產品(pin)效(xiao)期。我(wo)們定(ding)(ding)(ding)(ding)期監測批(pi)量產品(pin)，確定(ding)(ding)(ding)(ding)產品(pin)在推薦貯存條件下具有可接受效(xiao)果的時(shi)間長度。

微生物(wu)學(xue)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)：所有(you)血清使(shi)用(yong)Barile&Kern的(de)大體(ti)積方(fang)法(fa)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)支(zhi)原(yuan)體(ti)。在(zai)(zai)推薦方(fang)法(fa)的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)范圍內檢(jian)(jian)(jian)測(ce)結果是準確(que)的(de)。樣品(pin)至少應該在(zai)(zai)肉湯(tang)中合并培(pei)養3個星期(qi)，同時要在(zai)(zai)瓊(qiong)脂平(ping)板上進行(xing)(xing)(xing)不少于4次(ci)傳(chuan)代培(pei)養。在(zai)(zai)有(you)氧和厭氧(95%氮(dan)，5%CO2)條件下，平(ping)板在(zai)(zai)36±2℃下孵育(yu)。在(zai)(zai)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)過程中，每周對(dui)(dui)瓊(qiong)脂平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)一次(ci)微生物(wu)生長情況檢(jian)(jian)(jian)驗。使(shi)用(yong)Dienes染(ran)色法(fa)對(dui)(dui)懷疑被污染(ran)的(de)瓊(qiong)脂平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)支(zhi)原(yuan)體(ti)菌落的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)。然后，對(dui)(dui)平(ping)板進行(xing)(xing)(xing)再次(ci)鏡檢(jian)(jian)(jian)。對(dui)(dui)孵育(yu)肉湯(tang)瓶要定期(qi)進行(xing)(xing)(xing)濁度和pH值變動的(de)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)。在(zai)(zai)推薦方(fang)法(fa)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)范圍內，所有(you)血清也要使(shi)用(yong)Hoechst熒光DNA染(ran)色法(fa)進行(xing)(xing)(xing)不可在(zai)(zai)肉湯(tang)中培(pei)養的(de)支(zhi)原(yuan)體(ti)(包(bao)括M.hyorhinis屬)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)。

病(bing)(bing)毒檢測：已(yi)知(zhi)無外來物質(zhi)的(de)(de)細(xi)(xi)胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)須經過在(zai)包含(han)15%測試血(xue)清的(de)(de)生長培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)中進(jin)行(xing)為期(qi)21天的(de)(de)三次(ci)傳代培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)。使用(yong)對照培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)基(ji)和(he)已(yi)知(zhi)對外來物質(zhi)為陰性的(de)(de)血(xue)清平(ping)行(xing)地(di)維持陰性對照培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)。整個(ge)期(qi)間(jian)，檢測所有的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)情況，以便發(fa)現是否存在(zai)病(bing)(bing)毒誘發(fa)的(de)(de)細(xi)(xi)胞形態(tai)改變或(huo)致細(xi)(xi)胞病(bing)(bing)變效應。在(zai)14至21天的(de)(de)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)期(qi)間(jian)，對含(han)有檢測血(xue)清的(de)(de)平(ping)行(xing)培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)瓶按下面標準病(bing)(bing)毒檢測方法進(jin)行(xing)評估。

將其中一瓶檢(jian)測細胞用胰蛋白酶(mei)消化，然后把(ba)細胞分(fen)別加入到總(zong)面積為(wei)6cm 2 的(de)(de)六室載(zai)玻片(pian)(pian)上。同時準備陰性對(dui)照(zhao)載(zai)玻片(pian)(pian)。在檢(jian)測培養的(de)(de)單室載(zai)玻片(pian)(pian)上加入牛(niu)病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)性腹瀉病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)(BVDV)、牛(niu)細小病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)、牛(niu)腺病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)、狂犬病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)和呼腸(chang)病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)的(de)(de)染色(se)劑(ji)，作(zuo)為(wei)單個的(de)(de)陽(yang)性對(dui)照(zhao)。再經過7天培養(總(zong)共21天)，利用熒光抗體技術(shu)檢(jian)測病(bing)(bing)(bing)毒(du)(du)。

通過對檢(jian)測培養(yang)進行蘇木精伊(yi)紅染(ran)色，觀(guan)察致細(xi)(xi)胞突變效(xiao)應(ying)(CPE)或其他(ta)病(bing)毒誘導效(xiao)應(ying)。檢(jian)測細(xi)(xi)胞是否存在CPE效(xiao)應(ying)、內含物(wu)、多核體(ti)或其他(ta)異常效(xiao)應(ying)。

內毒素(su)檢(jian)測：我們用阿(a)米巴(ba)變形細胞溶解物(LAL)凝膠法來檢(jian)測胎牛(niu)血清(qing)的(de)內毒素(su)含(han)量。

效能檢測(ce)：
對每一批次(ci)的(de)胎牛血清，我們都(dou)進(jin)行下述培(pei)養(yang)效(xiao)能檢測(ce)。選擇血清zui重要的(de)標準是其支持特殊細胞的(de)生長(chang)能力。因此，除了(le)保證血清通(tong)過(guo)嚴格的(de)品質控制(zhi)，我們也同時在實驗室(shi)條件下對血清的(de)三個重要的(de)培(pei)養(yang)效(xiao)能進(jin)行檢測(ce)：克隆(long)效(xiao)率、貼壁效(xiao)果和二(er)倍(bei)體(ti)成(cheng)纖維細胞生長(chang)促進(jin)。

克(ke)隆效(xiao)率分(fen)析(xi)：克(ke)隆效(xiao)率實(shi)驗(yan)分(fen)析(xi)每一(yi)批胎(tai)牛血清促進小鼠骨髓瘤(liu)細胞及(ji)其衍生的雜交(jiao)瘤(liu)細胞的克(ke)隆和(he)生長(chang)能力。下列(lie)產(chan)品
經驗(yan)證(zheng)可用于該實驗(yan)：
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一(yi)(yi)批胎(tai)牛血(xue)清(qing)(qing)都要分(fen)別在(zai)復(fu)制微量滴(di)定平(ping)板上加入兩種血(xue)清(qing)(qing)濃(nong)度(du)(du)和兩種細(xi)胞接種量(10%血(xue)清(qing)(qing)和1cell/孔(kong)，4%血(xue)清(qing)(qing)和5cells/孔(kong))的(de)(de)情況下進行分(fen)析。克(ke)隆(long)分(fen)析結果除以已(yi)確(que)定的(de)(de)參照血(xue)清(qing)(qing)值得以歸一(yi)(yi)化。在(zai)許多日常雜(za)交選(xuan)擇(ze)程序(xu)中具(ju)有代表(biao)性(xing)的(de)(de)是高濃(nong)度(du)(du)的(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)，而低(di)濃(nong)度(du)(du)血(xue)清(qing)(qing)在(zai)設計血(xue)清(qing)(qing)批次(ci)細(xi)微差異放大檢測中有更為嚴格(ge)的(de)(de)測試。嚴格(ge)的(de)(de)1cell/孔(kong)測試是模(mo)擬單一(yi)(yi)雜(za)交選(xuan)擇(ze)的(de)(de)實(shi)驗室(shi)條(tiao)件。為每一(yi)(yi)批次(ci)胎(tai)牛血(xue)清(qing)(qing)提供的(de)(de)分(fen)析證明報告中的(de)(de)克(ke)隆(long)效率值為兩次(ci)測試條(tiao)件下的(de)(de)平(ping)均值。

克(ke)隆分析(xi)法(fa)(fa)：克(ke)隆分析(xi)法(fa)(fa)是在復式96孔板中加(jia)入(ru)兩種胎(tai)牛(niu)(niu)血清濃度(10%v/v)和(he)(4%v/v)和(he)兩種接種量(liang)的情況(kuang)下進行的。每一次化(hua)驗(yan)中，同時(shi)測量(liang)前期(qi)已驗(yan)證(zheng)合(he)格的一批胎(tai)牛(niu)(niu)血清，并將此(ci)測量(liang)值(zhi)作為內部參考標(biao)準。
克隆分析按下述方法進行：

1．Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在含(han)有10%的胎牛血清的RPM1640中通常保持對(dui)數(shu)生長期。在顯(xian)微鏡下，利用臺盼藍排除法對(dui)活細胞進行計(ji)數(shu)。

2．用RPM1640培養(yang)(yang)基(ji)將儲備細(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)浮液(ye)進行連續稀釋(shi)，使其達到(dao)預期的(de)(de)25cells/ml和5cells/ml接種濃度。準備含有參照或測試胎牛血清的(de)(de)RPM1640培養(yang)(yang)基(ji)。將這種密度的(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)分(fen)配(pei)到(dao)各個分(fen)析生長(chang)培養(yang)(yang)基(ji)體積為0.2毫升的(de)(de)孔中，使其分(fen)別平均含有5個和1個細(xi)(xi)胞(bao)。

3．將96孔板放入36±2℃，4-6% CO 2 的潮濕培養箱孵育約10至15天。

4．在孵(fu)育期間，用肉眼觀察(cha)平板并(bing)對用于克(ke)隆(long)(long)的孔(kong)進(jin)行計數(shu)。克(ke)隆(long)(long)效率按(an)下列(lie)方法計算(suan)：克(ke)隆(long)(long)效率=(陽性孔(kong)平均數(shu)/孵(fu)育孔(kong)總數(shu))×100%

5．每(mei)一(yi)批(pi)次胎(tai)牛血(xue)(xue)清(qing)維(wei)持(chi)指示劑骨髓(sui)瘤細(xi)胞(bao)克隆效(xiao)率的(de)(de)(de)(de)定(ding)量按照以下(xia)方法測(ce)得的(de)(de)(de)(de)相對克隆效(xiao)率(RCE)進(jin)行歸一(yi)化：RCE=檢(jian)測(ce)血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)(de)(de)克隆效(xiao)率/對照血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)(de)(de)克隆效(xiao)率貼(tie)壁(bi)效(xiao)率分(fen)析(xi)：貼(tie)壁(bi)效(xiao)率分(fen)析(xi)是(shi)利用已(yi)轉型的(de)(de)(de)(de)人(ren)類細(xi)胞(bao)系來檢(jian)測(ce)每(mei)一(yi)批(pi)血(xue)(xue)清(qing)促使持(chi)續貼(tie)附(fu)細(xi)胞(bao)系的(de)(de)(de)(de)生長能力。選擇已(yi)被驗(yan)證可以檢(jian)測(ce)貼(tie)壁(bi)效(xiao)率的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)系A549(人(ren)肺腫瘤細(xi)胞(bao)，ATCC#CCL,185)，是(shi)因為它(ta)可以區分(fen)一(yi)批(pi)血(xue)(xue)清(qing)維(wei)持(chi)細(xi)胞(bao)貼(tie)壁(bi)和繁殖能力的(de)(de)(de)(de)細(xi)微差異。

每(mei)一批(pi)次胎牛血清(qing)都要在(zai)兩(liang)(liang)種血清(qing)濃(nong)度和兩(liang)(liang)種細胞接種濃(nong)度下(xia)(xia)(10%血清(qing)和100cells/孔(kong)，4%血清(qing)和200cells/孔(kong))測試(shi)三次。在(zai)36±2℃，4-6% CO 2 的(de)(de)潮濕培養箱孵育約10至14天，對被染(ran)色(se)的(de)(de)細胞菌落進(jin)行計數即(ji)可得到其(qi)貼壁效率。將結果除以參考(kao)的(de)(de)對照血清(qing)得以歸(gui)一化(hua)。通過(guo)兩(liang)(liang)種血清(qing)濃(nong)度的(de)(de)測試(shi)，可以驗證該批(pi)次血清(qing)在(zai)減(jian)量和標準水平下(xia)(xia)維持生長的(de)(de)能力。為每(mei)一批(pi)次胎牛血清(qing)提供的(de)(de)分(fen)析證明(ming)報告中(zhong)的(de)(de)貼壁效率值為兩(liang)(liang)次測試(shi)條件下(xia)(xia)的(de)(de)平均值。

貼(tie)壁分析(xi)法(fa)：使用貼(tie)附(fu)分析(xi)檢測(ce)上(shang)述(shu)每(mei)一批測(ce)試血清(qing)(qing)(qing)。這種分析(xi)法(fa)針對(dui)每(mei)一個(ge)血清(qing)(qing)(qing)樣品使用一個(ge)6孔板(每(mei)室(shi)9.6cm 2 )，并(bing)可以對(dui)三個(ge)孔的數據進行平均處(chu)理。每(mei)一次(ci)化驗中，同時測(ce)量(liang)前(qian)期已驗證合(he)格(ge)的一批胎牛血清(qing)(qing)(qing)，并(bing)將(jiang)此測(ce)量(liang)值(zhi)作為內部參考標準(zhun)。

貼附分析按下(xia)述方法進行：

1．A549細胞系用含有10%胎牛血(xue)清的DMEM培(pei)養(yang)基，在36±2℃，以亞融(rong)合密度下進行培(pei)養(yang)。

2．含10%(v/v)和(he)4%(v/v)血清的DMEM由分(fen)別在22.5毫(hao)升和(he)24毫(hao)升DMEM中加入(ru)2.5毫(hao)升和(he)1毫(hao)升胎牛血清配(pei)制而(er)成，zui終(zhong)有(you)效體積(ji)為25毫(hao)升。將5毫(hao)升含血清培養基(ji)分(fen)別加入(ru)6孔板的每一個孔中。

3．A549培(pei)養細胞先經過胰蛋(dan)白(bai)酶消化，測定(ding)活細胞數，然后稀釋(shi)細胞懸浮液至2,000cells/ml。

4．將0.1毫升細胞(bao)懸浮液加(jia)入200cells/孔室中(zhong)(zhong)，0.05毫升懸浮液加(jia)入100cells/孔室中(zhong)(zhong)。平板(ban)混(hun)合后(hou)放入36±2℃，5%CO 2 的潮濕培養箱孵育約10至14天(tian)。

5．孵育后，取出(chu)平板，去除(chu)生(sheng)長培養基，用亞甲(jia)基蘭(lan)-甲(jia)醇溶液對菌落進行(xing)染色。

6．計(ji)(ji)算菌落形成(cheng)，然后按下述方法計(ji)(ji)算貼壁(bi)(bi)效率(lv)：%貼壁(bi)(bi)效率(lv)=每(mei)孔菌落平均數/每(mei)孔孵育(yu)活細胞平均數×100

7．為方便比較(jiao)，將測(ce)(ce)得(de)的貼(tie)壁(bi)效(xiao)率數(shu)值除(chu)以每批(pi)檢(jian)測(ce)(ce)血(xue)清(qing)(qing)的相對貼(tie)壁(bi)效(xiao)率(RPE)得(de)以歸一(yi)化：RCE=檢(jian)測(ce)(ce)血(xue)清(qing)(qing)的貼(tie)壁(bi)效(xiao)率/參照(zhao)血(xue)清(qing)(qing)的貼(tie)壁(bi)效(xiao)率二倍體(ti)(ti)成纖維(wei)細胞生(sheng)長(chang)(chang)(chang)：促進生(sheng)長(chang)(chang)(chang)分(fen)析用于檢(jian)測(ce)(ce)每一(yi)批(pi)胎牛血(xue)清(qing)(qing)維(wei)持難培養(yang)的人二倍體(ti)(ti)成纖維(wei)細胞長(chang)(chang)(chang)期生(sheng)長(chang)(chang)(chang)的能(neng)力。

下列(lie)細(xi)胞系(xi)經認證可用于(yu)該實驗：

WI-38(人(ren)二倍體肺(fei)成(cheng)纖維細(xi)胞，ATCC#CCL 75)

WI-38細(xi)胞(bao)(bao)在含5%胎牛(niu)血(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)低密(mi)度(du)(2X10 5 /瓶(ping))復式25-cm 2瓶(ping)中孵育，并進(jin)行(xing)為(wei)期(qi)三個連續(xu)(xu)7天的(de)傳(chuan)代培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)。在每(mei)一個培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)期(qi)，細(xi)胞(bao)(bao)都從初始孵育密(mi)度(du)開始傳(chuan)代培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)。壓(ya)力分層(ceng)率(lv)、成(cheng)倍繁(fan)殖數(shu)量(liang)和減(jian)(jian)量(liang)血(xue)清(qing)(qing)(qing)濃度(du)是每(mei)批(pi)次(ci)促(cu)進(jin)難(nan)培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)二(er)倍體細(xi)胞(bao)(bao)的(de)生(sheng)長血(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)嚴格(ge)測試指標。通過(guo)連續(xu)(xu)三代培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)以(yi)減(jian)(jian)少(shao)前一次(ci)生(sheng)長培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)基的(de)殘留(liu)影響，從而保證(zheng)得到檢測批(pi)促(cu)進(jin)生(sheng)長能力的(de)真實結果。為(wei)每(mei)一批(pi)次(ci)胎牛(niu)血(xue)清(qing)(qing)(qing)提供的(de)分析證(zheng)明(ming)報(bao)告為(wei)第(di)三次(ci)傳(chuan)代培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)每(mei)復式培(pei)(pei)(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)細(xi)胞(bao)(bao)數(shu)的(de)平均值。將(jiang)檢測值除以(yi)參考對照(zhao)值得以(yi)歸一化。

二倍(bei)體(ti)成纖(xian)維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)生長分析法：培養數(shu)代WI-38人類二倍(bei)體(ti)肺成纖(xian)維細(xi)(xi)胞(bao)(bao)，計算每一代的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)總數(shu)。此項檢(jian)測所挑(tiao)選出的胎牛血(xue)清(qing)批號(hao)能維持難以生長細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、貼壁性細(xi)(xi)胞(bao)(bao)、正常的細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株生長及存(cun)活。

1．準備含(han)5%檢測血清或(huo)已(yi)驗證(zheng)合格的參照血清生(sheng)長(chang)(chang)培養(yang)基(ji)(ji)，基(ji)(ji)礎生(sheng)長(chang)(chang)培養(yang)基(ji)(ji)為含(han)L-谷氨酰胺的HBME：EBME(1：1)。按要求，在(zai)每一次流量變化和分(fen)析過(guo)程中(zhong)進(jin)行傳代培養(yang)時需配制含(han)5%血清生(sheng)長(chang)(chang)的培養(yang)基(ji)(ji)。

2．在(zai)(zai)低(di)代培養(yang)水(shui)平時(shi)，將(jiang)2X10 5 WI-38細(xi)胞(bao)加入各個含9.5毫升生長培養(yang)基(ji)的復式25-cm 2 培養(yang)基(ji)中(zhong)。在(zai)(zai)不(bu)擰(ning)緊(jin)瓶(ping)(ping)蓋的情(qing)況下，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)(ping)放入4-6%CO 2， 36℃±2℃環境(jing)中(zhong)，保持24小時(shi)。然后擰(ning)緊(jin)瓶(ping)(ping)蓋，將(jiang)培養(yang)瓶(ping)(ping)放在(zai)(zai)36℃±2℃下孵育7天(tian)，在(zai)(zai)第(di)2天(tian)或(huo)第(di)3天(tian)全部更換培養(yang)基(ji)。

3．在(zai)第(di)7天，用胰蛋(dan)白酶對每一(yi)(yi)個(ge)含(han)參照(zhao)(zhao)或(huo)檢測(ce)血清(qing)的(de)(de)(de)復式瓶中的(de)(de)(de)細(xi)胞進(jin)行(xing)消化得(de)到一(yi)(yi)定數(shu)量細(xi)胞，然后合并(bing)(bing)并(bing)(bing)計(ji)數(shu)。將2x10 5 WI-38細(xi)胞加入(ru)含(han)有新鮮生長(chang)培(pei)(pei)(pei)養(yang)基(已加入(ru)了與上(shang)一(yi)(yi)代(dai)同(tong)一(yi)(yi)批次的(de)(de)(de)參照(zhao)(zhao)或(huo)檢測(ce)胎牛血清(qing))的(de)(de)(de)新的(de)(de)(de)復式25-cm 2 瓶中，進(jin)行(xing)細(xi)胞傳代(dai)培(pei)(pei)(pei)養(yang)。按第(di)2步(bu)所述，將培(pei)(pei)(pei)養(yang)瓶進(jin)行(xing)平衡并(bing)(bing)孵育。

4．如(ru)上所述(shu)經過三代連(lian)續(xu)分析(xi)，在每一(yi)代結束(shu)時計(ji)算(suan)每一(yi)批參照或(huo)檢測血(xue)清(qing)(qing)的(de)每瓶細胞平均數。zui后一(yi)代培養的(de)各批檢測血(xue)清(qing)(qing)實驗中(zhong)的(de)相對(dui)生長率(RGR)作為(wei)參照血(xue)清(qing)(qing)實驗中(zhong)獲(huo)得(de)的(de)細胞生長率分子：

%RGR=檢測血清(qing)實驗中每瓶平均細(xi)胞(bao)(bao)數/參照血清(qing)實驗中每瓶平均細(xi)胞(bao)(bao)數X100S f9細(xi)胞(bao)(bao)生長促(cu)進(jin)分析。通(tong)過(guo)昆蟲(chong)分析可以(yi)保證您購買(mai)的(de)(de)胎牛(niu)血清(qing)批次可以(yi)維持S f9細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)生長。收到(dao)產品后，您需要做的(de)(de)就是(shi)混勻血清(qing)，在(zai)56℃下熱滅(mie)活30分鐘。這(zhe)種分析法也可以(yi)用于乳白(bai)蛋白(bai)水解產品、酵母(mu)和其它生長輔料作為原(yuan)料的(de)(de)生物效能分析。該(gai)分析法的(de)(de)準確性(xing)取決于是(shi)否用常規的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)培養(yang)(yang)方(fang)案進(jin)行(xing)培養(yang)(yang)。用臺盼藍染色排除法測得的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)活性(xing)至少不低于80%。

細(xi)胞生長分析法。

1．使用含10%檢測(ce)或參照(zhao)熱滅活胎牛血清的(de)已驗證(zheng)的(de)Grace昆明(ming)培養基配制*檢測(ce)培養基。

2．將儲備(bei)Sf9細胞加入50毫升離心管中，在50Xg下離心5分鐘。然后將每支試管的(de)沉淀物重新用含10%的(de)檢測或參(can)照熱滅活胎(tai)牛血清(qing)*培(pei)養基(ji)配(pei)制(zhi)成懸浮(fu)液(ye)。

3．反試管顛倒幾(ji)次，然后每支試管倒出1毫升(sheng)樣品(pin)。用臺盼藍染色排除進行活細胞計數。

4．如果活性≥80%，把(ba)試(shi)管再顛倒幾次并(bing)取出0.25毫升樣品。然后用Coulter計數(shu)器進行細(xi)胞計數(shu)。

5．將細(xi)(xi)胞(bao)加入(ru)Erlenmeyer瓶中(zhong)，使其(qi)zui終(zhong)細(xi)(xi)胞(bao)濃度(du)為2.75X10 5 cells/ml。孵育后，再一次進(jin)行細(xi)(xi)胞(bao)計數，以保證細(xi)(xi)胞(bao)密度(du)為2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

6．將培養瓶放(fang)到搖床上，在27℃±1℃、80-90rpm條件下孵育96小時。

7．從每(mei)一(yi)培養瓶中分別取(qu)出0.25毫升樣(yang)品，用Coulter計數器(qi)進行計數。同時取(qu)出一(yi)定量的樣(yang)品進行細胞活性檢測。

8．將檢測細胞(bao)(bao)密(mi)度與(yu)參照細胞(bao)(bao)密(mi)度相比即(ji)可(ke)得到相對細胞(bao)(bao)密(mi)度(RCN)。

噬菌體(ti)檢(jian)測(ce):我們(men)利用溶(rong)菌斑分(fen)析法(fa)來檢(jian)測(ce)是否(fou)存在(zai)噬菌體(ti)。從每一批血清中(zhong)取具代表性的(de)樣品加(jia)(jia)入胰蛋白(bai)酶磷酸瓊脂中(zhong)，并在(zai)其加(jia)(jia)入含有噬菌體(ti)敏感的(de)大腸桿菌懸浮液(C-3000或K-12)。然后，混合物會在(zai)胰蛋白(bai)酶磷酸瓊脂平(ping)板上(shang)分(fen)層，在(zai)36±2℃環境下孵育約24小時(shi)后，觀察平(ping)板上(shang)溶(rong)菌斑的(de)形態。

生化特征檢測。

血紅(hong)蛋白檢(jian)(jian)測：所有批(pi)次的(de)胎牛血清我們(men)都進行(xing)了血紅(hong)蛋白的(de)檢(jian)(jian)測，血紅(hong)蛋白含量低于《中(zhong)國生物制品主要原輔材料指控指標》(2000年版(ban))公布的(de)指標。

效能(neng)檢測：其它血清

新(xin)生牛(niu)血(xue)(xue)清。檢(jian)測新(xin)生牛(niu)血(xue)(xue)清維持超(chao)過三(san)代VERO細胞生長的能力。在每一個培(pei)養期，細胞都(dou)從初(chu)始孵育(yu)密度開始傳代培(pei)養。可將所得(de)(de)結(jie)果與使用含有(you)已知(zhi)特征的參照血(xue)(xue)清對照生長培(pei)養基獲得(de)(de)的平行結(jie)果進(jin)行比較(jiao)。

馬血(xue)清(qing)。每一(yi)批馬血(xue)清(qing)被檢測(ce)維(wei)持在含有檢測(ce)批血(xue)清(qing)的(de)(de)對(dui)照培(pei)養基上Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤)細胞生長的(de)(de)能力。可將所得結果(guo)與使用含有已知(zhi)特征的(de)(de)參(can)照血(xue)清(qing)對(dui)照生長培(pei)養基獲(huo)得的(de)(de)平(ping)行(xing)結果(guo)進行(xing)比較。

血(xue)清(qing)(qing)的(de)使(shi)用與儲(chu)存(cun)：正確的(de)使(shi)用及保(bao)存(cun)血(xue)清(qing)(qing)，才能(neng)使(shi)血(xue)清(qing)(qing)發揮應(ying)有的(de)作用。

1. 儲(chu)存(cun)條件：血清一般儲(chu)存(cun)于(yu)－20℃，同時應避免反復凍融(rong)。購(gou)買大包裝的(de)血清后，首先要滅(mie)活處理，然(ran)后分裝成小(xiao)包裝，儲(chu)存(cun)于(yu)－20℃，使(shi)用前融(rong)化(hua)。融(rong)化(hua)時先置(zhi)于(yu)4℃。融(rong)化(hua)后的(de)血清在4℃不宜長時間存(cun)放，應盡快(kuai)使(shi)用。

2. 使用(yong)(yong)濃(nong)度：自從有了(le)合(he)成(cheng)培養(yang)基，血清就是作為一(yi)種添加成(cheng)分與合(he)成(cheng)培養(yang)基混合(he)使用(yong)(yong)，使用(yong)(yong)濃(nong)度一(yi)般為5－20％，zui常用(yong)(yong)是10％。過多血清容(rong)易(yi)使培養(yang)中的(de)細胞發生(sheng)變化，特別是一(yi)些二倍體的(de)無(wu)限細胞系，迅(xun)速生(sheng)長之(zhi)后容(rong)易(yi)發生(sheng)惡(e)性轉(zhuan)化。

慧穎(ying)生物新到GIBCO澳(ao)洲胎牛(niu)血(xue)清，GIBCO北美特級胎牛(niu)血(xue)清，Hyclone澳洲胎(tai)牛血清，BOVOGEN澳洲(zhou)胎(tai)(tai)(tai)(tai)牛(niu)血(xue)(xue)清，SERANA胎(tai)(tai)(tai)(tai)牛(niu)血(xue)(xue)清，SIGMA特級胎(tai)(tai)(tai)(tai)牛(niu)血(xue)(xue)清，Gemini胎(tai)(tai)(tai)(tai)牛(niu)血(xue)(xue)清，SIGMA人AB胎(tai)(tai)(tai)(tai)牛(niu)血(xue)(xue)清，GIBCO 二代新型(xing)羊水培養基 ，美國SBI無外(wai)泌體(ti)血(xue)(xue)清大量到(dao)貨 價(jia)*，更多禮品相送(song)！

胎(tai)牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100

胎牛(niu)血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500

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超低(di)IgG胎牛(niu)血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200

透析胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800

活性炭/葡聚糖處理(li)胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800

胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML 2600

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新生牛血清New born calf serum SNCS New Zealand 500ML 1300

胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清(qing)FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清(qing)FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML 2600

優等胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優等胎牛血(xue)清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優等胎(tai)牛血(xue)清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優(you)等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

優等胎牛(niu)血(xue)清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

優等胎牛(niu)血清(qing)FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

特(te)級(ji)胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特級胎(tai)牛(niu)血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特(te)級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

優等(deng)胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600

優等胎(tai)牛(niu)血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600

熱(re)滅活胎牛(niu)血(xue)清FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML 5600

熱(re)滅活胎牛血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

熱滅活胎牛(niu)血清(qing)FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

超低IgG胎牛血清(qing)Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML 6000

透析胎牛血清Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML 6800

活(huo)性炭/葡聚(ju)糖處(chu)理胎(tai)牛(niu)血清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml 6800

新生牛血(xue)清New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML 1035

馬血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML 909

熱滅(mie)活馬血(xue)清(qing)Heat-Inactivated Horse Serum  26050-088 New Zealand 500Ml 1069

胎牛血清FBS Sv30087.01 SOUTH AMERICA 100ML 800

胎牛血清(qing)FBS Sv30087.02 SOUTH AMERICA 500ML 1800

優等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

優等胎(tai)牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

優等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

特級胎牛血(xue)清(qing)FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特級胎(tai)牛血(xue)清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特級胎牛血清(qing)FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特級胎牛血(xue)清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特(te)級(ji)胎牛(niu)血清(qing)FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

特級胎牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

標準胎牛(niu)血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

標(biao)準胎(tai)牛血(xue)清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

活性(xing)炭/葡聚糖處理(li)胎(tai)牛血清Charcoal Stripped FBS SH30068.03 USA 500ML 6000

活(huo)性(xing)炭/葡聚(ju)糖處理胎牛血清，熱滅活(huo)，Charcoal Stripped FBS SH30068.03HI USA 500ML 6000

新(xin)生牛血(xue)清New born calf serum SH30406.01 New Zealand 500ML 1300

馬(ma)血清Horse Serum SH30074.03 USA 500ML 980

胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML PAA

胎牛血清FBS A15-151 EU 500ML PAA

胎(tai)牛血清FBS  04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML BI

胎牛血清FBS  F2442 USA 500ML SIGMA

胎牛血(xue)清(qing)FBS 100-908 SOUTH AMERICA 500ML Gemini

胎牛血清FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML Gemini

胎牛血清FBS 100-500 USA 500ML Gemini

關于 使用中的常見問題

1.保存(cun)血(xue)清(qing)的辦法？
我們建議(yi)血清應保存在-5℃至(zhi)-20℃。若你一次(ci)無法用完一瓶，建議(yi)您(nin)無菌(jun)分裝血清至(zhi)恰當的滅菌(jun)容器(qi)內，再放回(hui)冷凍。

2.如何解凍血清才不會(hui)使(shi)產品(pin)質(zhi)量受損？
我(wo)們(men)建議(yi)您將血(xue)清從冷凍箱中(zhong)取出后，先(xian)置于2-8℃冰(bing)箱中(zhong)使(shi)之溶解(jie)，然后在室溫下使(shi)之全溶。但(dan)必須注意(yi)的是，溶解(jie)過程中(zhong)必須規則地搖(yao)晃(huang)均勻。

3.血(xue)清解凍后發(fa)現有(you)絮狀沉淀物出現，該如何處理？
血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)沉淀物的(de)(de)(de)出(chu)現有許多原(yuan)因(yin)(yin)，但(dan)zui普遍的(de)(de)(de)原(yuan)因(yin)(yin)是由于血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)脂蛋白的(de)(de)(de)變性造成的(de)(de)(de)；而血(xue)(xue)(xue)纖維蛋白(形成凝(ning)血(xue)(xue)(xue)的(de)(de)(de)蛋白之(zhi)(zhi)一)在血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)解凍后，也會(hui)存在于血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)中(zhong)，亦(yi)是造成血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)沉淀物的(de)(de)(de)主要原(yuan)因(yin)(yin)之(zhi)(zhi)一。但(dan)這些絮狀(zhuang)沉淀物，并(bing)不影(ying)響血(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)本(ben)身的(de)(de)(de)質量。
若您欲去除這些(xie)絮狀(zhuang)(zhuang)沉(chen)淀物(wu)，可以(yi)(yi)將(jiang)血清分裝至(zhi)無菌(jun)離心(xin)管中，以(yi)(yi)400g稍微(wei)離心(xin)，上清液即可接著(zhu)加入培養基內一起(qi)過(guo)濾。我們(men)不(bu)建議(yi)您以(yi)(yi)過(guo)濾的(de)方法去除這些(xie)絮狀(zhuang)(zhuang)沉(chen)淀物(wu)，因(yin)為它可能(neng)會阻塞(sai)您的(de)過(guo)濾膜。

4.何謂熱(re)滅(mie)活？有必要(yao)做熱(re)滅(mie)活嗎？
一般以56℃，30分鐘水浴來處理(li)已解凍的(de)血(xue)(xue)清，因為此加熱(re)步(bu)驟，可以使補體去活性，而(er)補體所參與的(de)反應(ying)有：溶(rong)細(xi)胞(bao)(bao)活性，平滑(hua)肌的(de)收縮，肥大細(xi)胞(bao)(bao)和血(xue)(xue)小板(ban)組胺的(de)釋放，增強吞噬作(zuo)用(yong)，淋巴(ba)細(xi)胞(bao)(bao)、巨噬細(xi)胞(bao)(bao)的(de)趨化(hua)和激活。實驗顯示(shi)，經(jing)過正(zheng)確處理(li)的(de)熱(re)滅活血(xue)(xue)清，對大多數的(de)細(xi)胞(bao)(bao)而(er)言是不需要的(de)。經(jing)過處理(li)的(de)血(xue)(xue)清對細(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)長只有微小的(de)促(cu)進，或*沒有任何作(zuo)用(yong)，甚至通常因為高溫處理(li)影響了血(xue)(xue)清的(de)質(zhi)量，而(er)造成細(xi)胞(bao)(bao)生(sheng)長速率的(de)降低。
而經過熱處理的(de)血清(qing)，沉(chen)淀物的(de)形成會顯(xian)著的(de)增多，這些沉(chen)淀物在倒置顯(xian)微(wei)鏡下觀察，像是“小黑點”，常常會讓研究者誤以(yi)(yi)為是血清(qing)遭受污染，而把血清(qing)放(fang)在37℃環境(jing)中，又(you)會使此沉(chen)淀物更增多，使研究者認為是微(wei)生物的(de)分裂擴增。因此我們建(jian)議您(nin)，若(ruo)非必須，您(nin)可以(yi)(yi)不需要做熱滅活這一步。如(ru)此以(yi)(yi)來，不但節省您(nin)寶(bao)貴的(de)時(shi)間，更確保您(nin)血清(qing)的(de)質量！

5.如何(he)避免(mian)沉淀(dian)物的出現？
我(wo)們建議您在使用血清的時候，注意正確的血清解(jie)凍步驟(zou)，并盡量(liang)避免滅活血清及長時間的將血清置于高溫環境中(zhong)。

胎牛(niu)血清(qing)(qing)，小牛(niu)血清(qing)(qing)和新生牛(niu)血清(qing)(qing)三種之間的(de)區別(bie)：

這(zhe)三種血(xue)清(qing)的(de)成(cheng)份(fen)，總體(ti)沒有(you)(you)(you)什么(me)明顯差(cha)別(bie)，只(zhi)是有(you)(you)(you)一(yi)些(xie)成(cheng)分與其生(sheng)(sheng)存環境有(you)(you)(you)關，如上述有(you)(you)(you)人說(shuo)的(de)抗體(ti)等很少。此外，因生(sheng)(sheng)長發育的(de)需要，有(you)(you)(you)些(xie)成(cheng)分在小牛出生(sheng)(sheng)后(hou)會發生(sheng)(sheng)一(yi)些(xie)變化。不過還沒有(you)(you)(you)搞清(qing)楚它與其它的(de)血(xue)清(qing)之間的(de)差(cha)別(bie)。有(you)(you)(you)一(yi)點可以肯定，胎牛血(xue)清(qing)中的(de)部(bu)分功能(neng)蛋白與小牛血(xue)清(qing)中的(de)含(han)量有(you)(you)(you)差(cha)別(bie)。

胎牛本(ben)身生(sheng)活在(zai)一個潔凈環(huan)境當中，其血(xue)清與(yu)外界隔絕，只要生(sheng)產工藝(yi)科學規范，其質量肯定要新生(sheng)牛和小牛要好。

血(xue)清(qing)是(shi)血(xue)漿(jiang)去(qu)除纖維蛋白(bai)而形(xing)成(cheng)(cheng)的(de)(de)一(yi)種很(hen)復(fu)雜的(de)(de)混合物(wu)(wu)，其組(zu)成(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)份雖大(da)(da)部分(fen)已知，但還有一(yi)部分(fen)尚(shang)不清(qing)楚，且血(xue)清(qing)組(zu)成(cheng)(cheng)及含量常隨供血(xue)動物(wu)(wu)的(de)(de)性別、年(nian)齡、生(sheng)(sheng)理條件和(he)營養條件不同而異。血(xue)清(qing)中含有各種血(xue)漿(jiang)蛋白(bai)、多肽、脂肪、碳水化合物(wu)(wu)、生(sheng)(sheng)長因子、激素、無機(ji)物(wu)(wu)等，這些(xie)物(wu)(wu)質對(dui)(dui)促進(jin)細胞生(sheng)(sheng)長或抑(yi)制生(sheng)(sheng)長活(huo)性是(shi)達到生(sheng)(sheng)理平衡的(de)(de)。對(dui)(dui)血(xue)清(qing)的(de)(de)成(cheng)(cheng)分(fen)和(he)作用(yong)的(de)(de)研究雖有很(hen)大(da)(da)進(jin)展，但仍存在一(yi)些(xie)問題。

胎牛血清是(shi)品質zui高的，因為胎牛還(huan)未接觸外界，血清中所含的抗體、補(bu)體等對細(xi)胞有害的成分zui少。

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貨號 品牌 名稱(cheng) 規格 血(xue)源產地 產品(pin)適(shi)用范(fan)圍 價格

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EXO-FBS-50A-1 SBI 無外秘體(ti)血清 50ml 北美 用于(yu)exo的(de)細胞研(yan)究 詢價

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12681011 gibco CD OptiCHO™ Medium (1X), Liquid 1000ML 美國(guo) 詢價

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C11885500BT gibco DMEM 低糖(tang)培(pei)養基(ji) 500ml 國產 含1000mg/L D-葡萄(tao)糖、L-谷氨酰胺、110mg/L丙酮酸鈉和酚紅，不含HEPES緩沖液 詢價

C11960500BT gibco DMEM 高(gao)糖培養基 500ml 國產(chan) 含4500mg/L D-葡萄糖和(he)酚(fen)紅，不含L-谷氨(an)酰胺(an)、丙酮酸鈉和(he)HEPES緩沖液 詢價(jia)

C11965500BT gibco 500ml 國(guo)產 含(han)(han)4500mg/L D-葡萄糖、L-谷(gu)氨酰胺和酚紅，不含(han)(han)丙酮酸(suan)鈉和HEPES緩沖液 詢價

C11995500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄(tao)糖 L-谷氨酰胺(an) 110mg/L丙(bing)酮酸(suan)鈉和酚紅，不含HEPES緩沖液 詢價

C12430500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺、25mM HEPES緩沖液和(he)酚紅(hong)，不含丙酮酸鈉 詢價

C11875500BT gibco RPMI 1640培養基 500ml 國產(chan) 含L-谷氨酰胺和酚(fen)紅,不含HEPES緩沖液 詢價(jia)

C22400500BT gibco 500ml 國產(chan) 含(han)25mM HEPES緩沖液、L-谷氨酰胺和(he)酚紅 詢價(jia)

C11095500BT gibco MEM EARLES培(pei)養(yang)基 500ml 國(guo)產 含Earle's平衡鹽(yan)、L-谷(gu)氨酰胺和酚紅，不含HEPES緩(huan)沖液 詢價

C11330500BT gibco DMEM /F12 500ml 國(guo)產 1:1，含(han)15mM HEPES緩沖(chong)液(ye)、L-谷氨酰胺和酚紅 詢價(jia)

C12571500BT gibco MEM ALPHA 500ml 國產 含L-谷氨酰胺、核苷、脫氧核苷和酚紅 詢價

C14190500BT gibco DPBS 500ml 國(guo)產 1X,不含氯化(hua)鈣(gai)、氯化(hua)鎂和酚紅 詢價

C10010500BT gibco PBS 7.4 (1X) 500ml 國(guo)產 1X,不含氯(lv)化(hua)鈣、氯(lv)化(hua)鎂(mei)和酚紅(hong)，細胞(bao)培養級 詢價

C20012500BT gibco PBS 7.2 (1X) 500ml 國產 1X,不含氯化鈣、氯化鎂(mei)和(he)酚紅，細胞培養級 詢價

SH30022.01 Hyclone DMEM高糖培養基 500ML 國產(chan) 含(han)4.0 mM L-谷(gu)氨(an)酰胺，不(bu)含(han)丙酮酸鈉。

SH30809.01 Hyclone 1640培養基 500ML 國產

SH30022.01 DMEM高糖液體(ti)培養基(ji) DMEM HyClone 500ml

SH30809.01 1640液體(ti)培養基 1640 HyClone 500ml

SH30021.01 DMEM低糖液體培(pei)養基 DMEM HyClone 500ml

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SH30024.01 MEM液(ye)體培養基 MEM HyClone 500ml

SH30026.01 MEM液體(ti)培(pei)養基(ji) F12 HyClone 500ml

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SH30253.01 M199液體培養(yang)基 M199 HyClone 500ml

SH30256.01 PBS緩沖液 PBS HyClone 500ml

SH30265.01 α-MEM液體培養基(ji) α-MEM HyClone 500ml

SH30238.01 非必須氨基酸 **** HyClone 100ml

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SV30010 青霉(mei)(mei)素鏈(lian)霉(mei)(mei)素溶液   雙(shuang)抗(kang) **** HyClone 100ml