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Gibco馬血清 26050-088,熱滅活
貨號:26050-088 |
規格(ge):500ml |
品(pin)牌(pai):信(xin)息蘭源 |
Gibco™ sera offers excellent value for basic cell culture, specialty research, and specific assays, earning the trust of researchers with consistent quality and award-winning support that helps meet your research needs and budget requirements
Sera Category: Specialty
Origin: New Zealand.
EIA tested (negative) serum from a donor herd.
This reagent is classified as a medical device in several countries. If it is not regulated as a medical device in specific region, it should be used for laboratory use only.
Country of Origin: | New Zealand |
Product Line: | Gibco?? |
Product Size: | 500 mL |
Serum Treatment: | Heat-Inactivated |
Species: | Horse竅(qiao)Еquine |
Shipping Condition: | Dry Ice |
儲(chu)存溫(wen)度:-20°C
有效(xiao)期:五年
一旦您在細(xi)(xi)胞培養(yang)的過程中發現(xian)有黑(hei)點(dian)生成,首(shou)先,要肉眼觀(guan)察(cha)培養(yang)基是否混濁,然(ran)后,在鏡下觀(guan)察(cha)培養(yang)細(xi)(xi)胞生長的狀態,黑(hei)點(dian)是否游動。如(ru)果細(xi)(xi)胞被污染(ran),微生物則會大量繁殖,培養(yang)基就會迅速變(bian)黃(huang)、變(bian)混濁。污染(ran)包括(kuo)細(xi)(xi)菌污染(ran)、支原體污染(ran)等。
如果在鏡下觀(guan)察(cha)細(xi)胞,生長狀態良(liang)好(hao),與黑點出現前相比(bi),沒有(you)任何變化(hua),那么,黑點的出現可(ke)能與以下幾種情況有(you)關(guan):
(1)細胞生長(chang)過老,破(po)碎(sui)的細胞殘骸;
(2)血清質量(liang)不好,反復凍融的結(jie)果;
(3)配制培養基的pH值(zhi)偏(pian)高,不(bu)宜細(xi)胞(bao)生(sheng)長;
(5)培養(yang)原(yuan)(yuan)代(dai)細胞(bao)中出現小(xiao)黑點,可能是(shi)原(yuan)(yuan)代(dai)組織中的(de)雜(za)質,多次傳代(dai)可以消除。
(4)配制培養基的(de)水質、容器不合格。可應(ying)用(yong)離(li)心(xin)、過濾的(de)方法(fa)去除這些黑點;
細(xi)胞(bao)培養中如何防止黑點生成
(1) 盡可能地(di)減少血(xue)清凍融次(ci)數。
(2) 培(pei)養(yang)基無(wu)需(xu)37℃水浴。
(3) 培(pei)養(yang)基保持*PH值7.0- 7.2。
(4) 嚴格控制配制培養基的(de)水質(zhi),容器定期刷洗(xi)。
(5) 掌握細胞傳(chuan)代的*時機(ji),細胞切勿(wu)生長過老(lao)。
血清中包含(han)絮狀沉淀,它們是什么(me),怎么(me)處理?
沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)包含纖(xian)維蛋白和脂蛋白。這是正常(chang)特性,不會(hui)(hui)影響產(chan)(chan)品(pin)性質(zhi)。要除去(qu)沉(chen)(chen)淀(dian)(dian),離心血(xue)清(qing)(400g,1-2分(fen)鐘(zhong))或者簡單的讓其(qi)沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)在瓶子底部,將血(xue)清(qing)小(xiao)心的轉(zhuan)移(yi)到(dao)另一(yi)個無(wu)菌(jun)瓶里(一(yi)般不建議(yi)采用過濾的方(fang)法除去(qu)沉(chen)(chen)淀(dian)(dian),因(yin)為沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)會(hui)(hui)堵塞濾膜而(er)無(wu)法過濾)。大多情況輕(qing)輕(qing)搖動沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)并加(jia)熱至(zhi)37℃就會(hui)(hui)再(zai)溶解(jie)。所以,使用產(chan)(chan)品(pin)時要搖動并加(jia)熱血(xue)清(qing)至(zhi)37℃,沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)會(hui)(hui)自(zi)然消失(shi)。
Gibco馬血清 26050-088,熱滅活 通常作(zuo)為補充成(cheng)分添加在(zai)基礎培養(yang)基內使用(yong)。它能(neng)夠提供各(ge)種大分子(zi)蛋白,小分子(zi)量營養(yang),水溶性成(cheng)分的(de)(de)(de)轉運蛋白,和(he)其它一些(xie)細(xi)胞(bao)在(zai)體外所(suo)必需的(de)(de)(de)成(cheng)分,如激素和(he)附(fu)著因(yin)子(zi)。血(xue)(xue)清(qing)可以結合或中(zhong)和(he)一些(xie)生長因(yin)子(zi)中(zhong)的(de)(de)(de)有毒成(cheng)分,并提供培養(yang)基的(de)(de)(de)緩沖能(neng)力(li)。細(xi)胞(bao)培養(yang)時血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)(de)添加依賴(lai)于(yu)基礎培養(yang)基的(de)(de)(de)化學組成(cheng),培養(yang)細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)類型,及所(suo)用(yong)的(de)(de)(de)培養(yang)系統(tong)。
我(wo)(wo)(wo)們(men)在提供細胞培(pei)養(yang)基、平衡鹽(yan)溶(rong)液(ye)、無血清(qing)培(pei)養(yang)基和(he)試劑的(de)(de)(de)同(tong)時,還提供高品(pin)質(zhi)(zhi)的(de)(de)(de)血清(qing)。我(wo)(wo)(wo)們(men)對(dui)血清(qing)制備進行(xing)全過(guo)程(cheng)監管。從血清(qing)收集(ji)到zui終產品(pin)檢驗(yan)和(he)內部稽核的(de)(de)(de)每一個(ge)步驟,我(wo)(wo)(wo)們(men)都采(cai)用設備和(he)標準操作程(cheng)序(xu),以確(que)保整個(ge)過(guo)程(cheng)中每個(ge)環節的(de)(de)(de)產品(pin)質(zhi)(zhi)量。對(dui)整個(ge)過(guo)程(cheng)的(de)(de)(de)控制可以保證產品(pin)的(de)(de)(de)持續高品(pin)質(zhi)(zhi),降低不同(tong)批(pi)次(ci)的(de)(de)(de)差異(yi)。
處(chu)理(li):全部血(xue)(xue)清(qing):收集的血(xue)(xue)液(ye)均在冷藏(zang)條件(jian)下處(chu)理(li)。血(xue)(xue)清(qing)和血(xue)(xue)分離(li)后立即將血(xue)(xue)清(qing)合并并冷凍。只(zhi)有(you)符合我們的檢測標準(zhun)的血(xue)(xue)清(qing)才被接(jie)受作進一步處(chu)理(li)。
熱(re)滅活血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing):熱(re)滅活是在(zai)56℃水浴中嚴格控(kong)溫30分(fen)鐘(zhong)。透析血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing):用(yong)10,000截留分(fen)子量(liang)(liang)的(de)透析膜在(zai)0.15M的(de)NaCl中進行(xing)透析,直到葡萄糖水平(ping)低于(yu)5mg/dl(用(yong)鄰(lin)甲苯胺(an)測試法(fa)檢驗(yan))。γ射(she)(she)(she)線(xian)(xian)(xian)照(zhao)射(she)(she)(she)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing):可按客戶(hu)要求對血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)進行(xing)γ射(she)(she)(she)線(xian)(xian)(xian)照(zhao)射(she)(she)(she)。通過(guo)(guo)γ射(she)(she)(she)線(xian)(xian)(xian)照(zhao)射(she)(she)(she)以滅活各種動物血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)(包括胎牛(niu)(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)、新生牛(niu)(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)、豬血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)馬血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing))中的(de)病毒和(he)支原體(ti)(ti)的(de)方(fang)法(fa)已經(jing)得到證(zheng)實。研究證(zheng)實照(zhao)射(she)(she)(she)劑量(liang)(liang)在(zai)30-45kGy為(wei)(wei)宜。血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)在(zai)此照(zhao)射(she)(she)(she)后(hou)物理化學特(te)性和(he)細胞培養表現沒(mei)有變化。裝瓶:粗血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須(xu)通過(guo)(guo)一(yi)系列的(de)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)才成(cheng)為(wei)(wei)成(cheng)品(pin)。zui后(hou)的(de)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)步驟包括使用(yong)0.2um和(he)0.1um的(de)無菌(jun)過(guo)(guo)濾(lv)(lv)。胎牛(niu)(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須(xu)通過(guo)(guo)三次0.1um過(guo)(guo)濾(lv)(lv),其他(ta)血(xue)(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(qing)須(xu)通過(guo)(guo)0.2um過(guo)(guo)濾(lv)(lv)。zui終產品(pin)的(de)質(zhi)量(liang)(liang)控(kong)制(zhi)(zhi):我(wo)們采(cai)取以下方(fang)法(fa)對每一(yi)批次的(de)產品(pin)選取一(yi)定數量(liang)(liang)的(de)樣(yang)品(pin)進行(xing)質(zhi)量(liang)(liang)控(kong)制(zhi)(zhi)分(fen)析:
化(hua)學檢(jian)測(ce)(ce):使用低溫凝固點的(de)(de)方法檢(jian)測(ce)(ce)滲(shen)透(tou)壓,以保(bao)證符合產品(pin)規范(fan)。我們每天使用國家標(biao)(biao)準(zhun)的(de)(de)技(ji)術研(yan)究(jiu)所標(biao)(biao)定(ding)的(de)(de)標(biao)(biao)準(zhun)溶(rong)液對我們的(de)(de)滲(shen)透(tou)壓檢(jian)測(ce)(ce)儀(yi)器進(jin)行(xing)校(xiao)準(zhun)。同樣每天使用國家標(biao)(biao)準(zhun)技(ji)術研(yan)究(jiu)所標(biao)(biao)定(ding)的(de)(de)標(biao)(biao)準(zhun)溶(rong)液對pH計進(jin)行(xing)校(xiao)準(zhun)。
使用(yong)電泳(yong)圖(tu)譜鑒定血清的(de)整體(ti)性質。樣品被轉移(yi)到硝(xiao)酸纖維素(su)基質中,并在緩沖體(ti)系(xi)內(nei)遷移(yi)。條(tiao)帶經染色、清潔、干燥后用(yong)密度儀進(jin)行掃描,以檢測白(bai)蛋白(bai)和球蛋白(bai)組分的(de)相對(dui)濃度。為證(zheng)實是否(fou)在適當的(de)條(tiao)件(jian)下進(jin)行采血和處理(li),使用(yong)修飾(shi)的(de)Fleming方法對(dui)血紅(hong)蛋白(bai)進(jin)行分光(guang)光(guang)度檢測。
隨著動(dong)物年(nian)齡的增加,血清(qing)總蛋白含量也相應地提高。使(shi)用(yong)自動(dong)化的Biuret方法進行總血清(qing)蛋白的檢測(ce),以確認動(dong)物年(nian)齡并驗證符合產品(pin)規范。使(shi)用(yong)色(se)度(du)計在(zai)不同(tong)波長(chang)下檢測(ce)樣品(pin)和(he)Biuret試劑混合波的吸光度(du)。自動(dong)計算結果后,與標(biao)準曲線比較,即可得到蛋白值(克/公升)。
穩定(ding)(ding)性(xing)檢(jian)測(ce)程(cheng)序(xu):在每(mei)一個(ge)標記為體外(wai)診斷的(de)產(chan)品(pin)(pin)上(shang)顯示的(de)效(xiao)期表(biao)明(ming)了(le)這個(ge)產(chan)品(pin)(pin)具(ju)有多長時間(jian)的(de)效(xiao)能。我(wo)們的(de)穩定(ding)(ding)性(xing)程(cheng)序(xu)確定(ding)(ding)和證明(ming)了(le)產(chan)品(pin)(pin)效(xiao)期。我(wo)們定(ding)(ding)期監(jian)測(ce)批(pi)量產(chan)品(pin)(pin),確定(ding)(ding)產(chan)品(pin)(pin)在推薦貯存條件(jian)下具(ju)有可(ke)接受效(xiao)果的(de)時間(jian)長度。
微生(sheng)物(wu)學檢(jian)(jian)測(ce):所有血清使用Barile&Kern的(de)(de)大體(ti)(ti)積方法(fa)檢(jian)(jian)測(ce)支(zhi)原體(ti)(ti)。在(zai)(zai)(zai)推(tui)薦方法(fa)的(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)范圍內檢(jian)(jian)測(ce)結果是(shi)準確的(de)(de)。樣品至少應(ying)該在(zai)(zai)(zai)肉(rou)湯中合(he)并培(pei)養(yang)3個星期,同(tong)時(shi)要在(zai)(zai)(zai)瓊脂平(ping)板上進行不(bu)(bu)少于4次傳代培(pei)養(yang)。在(zai)(zai)(zai)有氧和厭氧(95%氮,5%CO2)條件下(xia),平(ping)板在(zai)(zai)(zai)36±2℃下(xia)孵育。在(zai)(zai)(zai)檢(jian)(jian)測(ce)過程中,每周對(dui)瓊脂平(ping)板進行一次微生(sheng)物(wu)生(sheng)長情況檢(jian)(jian)驗。使用Dienes染色法(fa)對(dui)懷疑(yi)被污染的(de)(de)瓊脂平(ping)板進行支(zhi)原體(ti)(ti)菌落的(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)。然后(hou),對(dui)平(ping)板進行再次鏡檢(jian)(jian)。對(dui)孵育肉(rou)湯瓶要定期進行濁度(du)和pH值變動(dong)的(de)(de)檢(jian)(jian)測(ce)。在(zai)(zai)(zai)推(tui)薦方法(fa)檢(jian)(jian)測(ce)范圍內,所有血清也要使用Hoechst熒(ying)光DNA染色法(fa)進行不(bu)(bu)可(ke)在(zai)(zai)(zai)肉(rou)湯中培(pei)養(yang)的(de)(de)支(zhi)原體(ti)(ti)(包(bao)括M.hyorhinis屬)檢(jian)(jian)測(ce)。
病(bing)毒檢測(ce)(ce):已知(zhi)無外來(lai)物質的(de)(de)(de)細胞培(pei)(pei)養(yang)基須(xu)經(jing)過在(zai)包含15%測(ce)(ce)試血清(qing)的(de)(de)(de)生長培(pei)(pei)養(yang)基中進行(xing)為(wei)期(qi)(qi)21天(tian)的(de)(de)(de)三次傳(chuan)代(dai)培(pei)(pei)養(yang)。使用對(dui)(dui)照培(pei)(pei)養(yang)基和已知(zhi)對(dui)(dui)外來(lai)物質為(wei)陰性(xing)的(de)(de)(de)血清(qing)平(ping)(ping)行(xing)地維持(chi)陰性(xing)對(dui)(dui)照培(pei)(pei)養(yang)。整個期(qi)(qi)間,檢測(ce)(ce)所有的(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)情(qing)況,以便發現是(shi)否存(cun)在(zai)病(bing)毒誘發的(de)(de)(de)細胞形態(tai)改變或(huo)致細胞病(bing)變效應。在(zai)14至21天(tian)的(de)(de)(de)培(pei)(pei)養(yang)期(qi)(qi)間,對(dui)(dui)含有檢測(ce)(ce)血清(qing)的(de)(de)(de)平(ping)(ping)行(xing)培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)按下面標準(zhun)病(bing)毒檢測(ce)(ce)方(fang)法進行(xing)評估(gu)。
將其中一瓶檢測(ce)細(xi)胞(bao)用胰蛋白酶消化,然后把(ba)細(xi)胞(bao)分別加(jia)(jia)入到(dao)總(zong)面(mian)積為6cm 2 的六室載(zai)玻(bo)片(pian)上。同時(shi)準備(bei)陰性對照(zhao)(zhao)載(zai)玻(bo)片(pian)。在檢測(ce)培養(yang)(yang)的單(dan)室載(zai)玻(bo)片(pian)上加(jia)(jia)入牛(niu)病毒(du)(du)(du)性腹(fu)瀉病毒(du)(du)(du)(BVDV)、牛(niu)細(xi)小病毒(du)(du)(du)、牛(niu)腺病毒(du)(du)(du)、狂犬病毒(du)(du)(du)和呼腸病毒(du)(du)(du)的染色劑,作為單(dan)個的陽性對照(zhao)(zhao)。再經(jing)過(guo)7天(tian)培養(yang)(yang)(總(zong)共21天(tian)),利用熒光抗體技術檢測(ce)病毒(du)(du)(du)。
通過對檢測培養進行蘇木精伊紅(hong)染色(se),觀察致(zhi)細胞突變(bian)效應(CPE)或其他病毒誘(you)導效應。檢測細胞是否存在CPE效應、內含物、多核體或其他異常效應。
內毒素(su)檢(jian)測(ce):我(wo)們用阿米巴(ba)變形細胞溶解物(LAL)凝膠法來(lai)檢(jian)測(ce)胎牛血(xue)清的(de)內毒素(su)含量。
效能檢測:
對(dui)每一批次(ci)的(de)胎牛血(xue)清(qing)(qing)(qing),我們(men)(men)都進(jin)(jin)行下述培(pei)養效能檢(jian)測。選擇血(xue)清(qing)(qing)(qing)zui重(zhong)(zhong)要的(de)標準是其(qi)支持(chi)特殊細(xi)胞(bao)的(de)生長(chang)能力。因此,除了(le)保證血(xue)清(qing)(qing)(qing)通過嚴格的(de)品質控制,我們(men)(men)也(ye)同時在實驗(yan)室(shi)條(tiao)件下對(dui)血(xue)清(qing)(qing)(qing)的(de)三個(ge)重(zhong)(zhong)要的(de)培(pei)養效能進(jin)(jin)行檢(jian)測:克隆效率、貼壁效果和二倍(bei)體成纖維細(xi)胞(bao)生長(chang)促進(jin)(jin)。
克(ke)隆效率分(fen)析:克(ke)隆效率實驗分(fen)析每一(yi)批胎牛(niu)血(xue)清促進小鼠(shu)骨髓瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)及其(qi)衍生的(de)(de)雜(za)交瘤(liu)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)克(ke)隆和生長能(neng)力(li)。下列產(chan)品
經驗證可用于該實驗:
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)
每(mei)一(yi)批胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)都要分別在復制微量(liang)滴定平(ping)板上加入兩種(zhong)血(xue)(xue)清(qing)(qing)濃(nong)度和(he)(he)兩種(zhong)細胞接(jie)種(zhong)量(liang)(10%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)(he)1cell/孔,4%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)(he)5cells/孔)的(de)(de)情況(kuang)下進(jin)行分析(xi)。克隆分析(xi)結果除以已(yi)確定的(de)(de)參照(zhao)血(xue)(xue)清(qing)(qing)值得以歸一(yi)化。在許多日常雜交(jiao)選擇程序(xu)中具有代表性的(de)(de)是高濃(nong)度的(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing),而低(di)濃(nong)度血(xue)(xue)清(qing)(qing)在設計(ji)血(xue)(xue)清(qing)(qing)批次(ci)(ci)細微差異(yi)放大檢(jian)測(ce)(ce)中有更為(wei)嚴格的(de)(de)測(ce)(ce)試。嚴格的(de)(de)1cell/孔測(ce)(ce)試是模擬單一(yi)雜交(jiao)選擇的(de)(de)實驗室條件。為(wei)每(mei)一(yi)批次(ci)(ci)胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)提供的(de)(de)分析(xi)證明報告中的(de)(de)克隆效率值為(wei)兩次(ci)(ci)測(ce)(ce)試條件下的(de)(de)平(ping)均值。
克隆(long)分析法:克隆(long)分析法是(shi)在復式96孔板中加(jia)入兩種胎(tai)牛血清(qing)濃度(10%v/v)和(he)(4%v/v)和(he)兩種接種量(liang)的情況下進(jin)行(xing)的。每一次化驗(yan)(yan)中,同時測(ce)量(liang)前(qian)期已驗(yan)(yan)證合格的一批胎(tai)牛血清(qing),并(bing)將此測(ce)量(liang)值作(zuo)為內部(bu)參考標準。
克隆分析(xi)按(an)下述方(fang)法進行:
1.Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在含有10%的(de)胎牛血清的(de)RPM1640中通常保持對(dui)數生長期。在顯(xian)微鏡下,利(li)用(yong)臺盼藍排除法對(dui)活細(xi)胞進行(xing)計(ji)數。
2.用RPM1640培養基(ji)將(jiang)儲備細(xi)胞(bao)懸浮液進行連續稀釋,使(shi)其達到預期的(de)25cells/ml和5cells/ml接種濃度(du)。準備含(han)有參照或(huo)測試胎牛(niu)血清的(de)RPM1640培養基(ji)。將(jiang)這種密度(du)的(de)細(xi)胞(bao)分配(pei)到各個(ge)(ge)分析生長培養基(ji)體積為0.2毫升(sheng)的(de)孔中,使(shi)其分別平均含(han)有5個(ge)(ge)和1個(ge)(ge)細(xi)胞(bao)。
3.將96孔板放入(ru)36±2℃,4-6% CO 2 的潮濕培養箱孵(fu)育(yu)約10至(zhi)15天(tian)。
4.在孵(fu)育(yu)期(qi)間,用肉(rou)眼觀察平(ping)板并對(dui)用于克隆的孔進行計(ji)(ji)數(shu)。克隆效(xiao)(xiao)率按(an)下(xia)列方(fang)法(fa)計(ji)(ji)算:克隆效(xiao)(xiao)率=(陽性孔平(ping)均(jun)數(shu)/孵(fu)育(yu)孔總數(shu))×100%
5.每(mei)一(yi)批次胎牛(niu)血(xue)(xue)清維(wei)持(chi)指示劑骨髓瘤(liu)細(xi)胞克(ke)(ke)(ke)隆(long)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)的定量按照(zhao)以(yi)下方法(fa)測得的相(xiang)對克(ke)(ke)(ke)隆(long)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)(RCE)進行歸一(yi)化:RCE=檢測血(xue)(xue)清的克(ke)(ke)(ke)隆(long)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)/對照(zhao)血(xue)(xue)清的克(ke)(ke)(ke)隆(long)效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)貼(tie)壁效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)分(fen)(fen)(fen)析(xi):貼(tie)壁效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)分(fen)(fen)(fen)析(xi)是利用已轉型(xing)的人類細(xi)胞系(xi)來檢測每(mei)一(yi)批血(xue)(xue)清促使(shi)持(chi)續(xu)貼(tie)附細(xi)胞系(xi)的生長(chang)能力。選(xuan)擇已被驗證可(ke)以(yi)檢測貼(tie)壁效(xiao)(xiao)(xiao)率(lv)(lv)的細(xi)胞系(xi)A549(人肺腫(zhong)瘤(liu)細(xi)胞,ATCC#CCL,185),是因為(wei)它(ta)可(ke)以(yi)區分(fen)(fen)(fen)一(yi)批血(xue)(xue)清維(wei)持(chi)細(xi)胞貼(tie)壁和繁殖能力的細(xi)微差異(yi)。
每一(yi)批(pi)次胎牛(niu)(niu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)都要(yao)在兩(liang)種血(xue)(xue)(xue)清(qing)濃(nong)度(du)(du)和兩(liang)種細胞接種濃(nong)度(du)(du)下(10%血(xue)(xue)(xue)清(qing)和100cells/孔,4%血(xue)(xue)(xue)清(qing)和200cells/孔)測(ce)試三(san)次。在36±2℃,4-6% CO 2 的(de)潮濕(shi)培養箱孵(fu)育約(yue)10至14天,對(dui)被染色(se)的(de)細胞菌落(luo)進行計(ji)數即可得到其(qi)貼壁(bi)(bi)效率。將結果除以(yi)參考的(de)對(dui)照血(xue)(xue)(xue)清(qing)得以(yi)歸一(yi)化(hua)。通過兩(liang)種血(xue)(xue)(xue)清(qing)濃(nong)度(du)(du)的(de)測(ce)試,可以(yi)驗證該批(pi)次血(xue)(xue)(xue)清(qing)在減量和標(biao)準(zhun)水(shui)平(ping)下維持生長的(de)能力(li)。為(wei)每一(yi)批(pi)次胎牛(niu)(niu)血(xue)(xue)(xue)清(qing)提供的(de)分析(xi)證明報告中的(de)貼壁(bi)(bi)效率值為(wei)兩(liang)次測(ce)試條(tiao)件下的(de)平(ping)均值。
貼(tie)壁(bi)分析(xi)法(fa)(fa):使(shi)用(yong)貼(tie)附分析(xi)檢測(ce)(ce)上述每一批測(ce)(ce)試血清(qing)。這種分析(xi)法(fa)(fa)針對每一個(ge)血清(qing)樣品使(shi)用(yong)一個(ge)6孔(kong)板(每室9.6cm 2 ),并(bing)可以對三(san)個(ge)孔(kong)的(de)數據進行平均(jun)處理。每一次化(hua)驗(yan)中,同時測(ce)(ce)量前期已(yi)驗(yan)證合格的(de)一批胎牛(niu)血清(qing),并(bing)將此測(ce)(ce)量值作(zuo)為內(nei)部參考標準。
貼附分析按下(xia)述方法進行:
1.A549細胞系用含有(you)10%胎牛(niu)血(xue)清的DMEM培(pei)(pei)養基,在36±2℃,以亞融合密(mi)度下進行培(pei)(pei)養。
2.含(han)10%(v/v)和(he)4%(v/v)血清的(de)DMEM由(you)分別(bie)在22.5毫升(sheng)和(he)24毫升(sheng)DMEM中(zhong)加(jia)入2.5毫升(sheng)和(he)1毫升(sheng)胎牛血清配制而成,zui終(zhong)有效體積為25毫升(sheng)。將5毫升(sheng)含(han)血清培養基(ji)分別(bie)加(jia)入6孔(kong)板的(de)每一個(ge)孔(kong)中(zhong)。
3.A549培養細(xi)胞(bao)(bao)先經過胰蛋白(bai)酶消化,測定活細(xi)胞(bao)(bao)數,然后稀釋細(xi)胞(bao)(bao)懸浮液至2,000cells/ml。
4.將0.1毫升細胞(bao)懸(xuan)浮(fu)液(ye)加(jia)入(ru)200cells/孔室中(zhong),0.05毫升懸(xuan)浮(fu)液(ye)加(jia)入(ru)100cells/孔室中(zhong)。平板(ban)混合后放入(ru)36±2℃,5%CO 2 的潮濕培養箱孵育約10至14天。
5.孵育后,取出平(ping)板,去(qu)除生長培養基,用亞甲(jia)(jia)基蘭-甲(jia)(jia)醇溶液對菌(jun)落進(jin)行染色。
6.計算菌落形成,然后按下述方法計算貼壁(bi)效率:%貼壁(bi)效率=每孔菌落平(ping)均數(shu)(shu)/每孔孵(fu)育活細胞平(ping)均數(shu)(shu)×100
7.為(wei)方便比(bi)較,將測(ce)得(de)的(de)(de)(de)貼(tie)壁(bi)(bi)效(xiao)率數值除以(yi)每(mei)批檢(jian)測(ce)血清(qing)的(de)(de)(de)相對(dui)貼(tie)壁(bi)(bi)效(xiao)率(RPE)得(de)以(yi)歸一化:RCE=檢(jian)測(ce)血清(qing)的(de)(de)(de)貼(tie)壁(bi)(bi)效(xiao)率/參照血清(qing)的(de)(de)(de)貼(tie)壁(bi)(bi)效(xiao)率二倍體(ti)成纖(xian)維細(xi)胞生長:促進生長分析用于檢(jian)測(ce)每(mei)一批胎牛血清(qing)維持難培養的(de)(de)(de)人二倍體(ti)成纖(xian)維細(xi)胞長期生長的(de)(de)(de)能力。
下列細胞系經(jing)認證(zheng)可(ke)用于該(gai)實驗:
WI-38(人二倍體肺成纖維細(xi)胞(bao),ATCC#CCL 75)
WI-38細(xi)(xi)胞(bao)在含5%胎牛血(xue)清的(de)低密(mi)度(du)(du)(2X10 5 /瓶(ping))復式25-cm 2瓶(ping)中孵育(yu),并進行為(wei)期三個連(lian)續7天(tian)的(de)傳代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)。在每(mei)一(yi)個培(pei)(pei)養(yang)期,細(xi)(xi)胞(bao)都從初(chu)始(shi)孵育(yu)密(mi)度(du)(du)開始(shi)傳代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)。壓力分層率、成倍(bei)繁殖數量(liang)和(he)減量(liang)血(xue)清濃度(du)(du)是每(mei)批(pi)次(ci)促進難培(pei)(pei)養(yang)二倍(bei)體(ti)細(xi)(xi)胞(bao)的(de)生長(chang)(chang)血(xue)清的(de)嚴格測(ce)(ce)試指(zhi)標。通過連(lian)續三代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)以(yi)減少前(qian)一(yi)次(ci)生長(chang)(chang)培(pei)(pei)養(yang)基(ji)的(de)殘(can)留影響,從而保證得到檢測(ce)(ce)批(pi)促進生長(chang)(chang)能力的(de)真實(shi)結果。為(wei)每(mei)一(yi)批(pi)次(ci)胎牛血(xue)清提供的(de)分析證明報告為(wei)第三次(ci)傳代(dai)(dai)(dai)培(pei)(pei)養(yang)每(mei)復式培(pei)(pei)養(yang)瓶(ping)細(xi)(xi)胞(bao)數的(de)平均值。將檢測(ce)(ce)值除(chu)以(yi)參考對照值得以(yi)歸一(yi)化。
二倍(bei)體(ti)成(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)胞生(sheng)長分析法:培養數代WI-38人(ren)類二倍(bei)體(ti)肺成(cheng)纖(xian)維細(xi)(xi)胞,計算每一代的(de)細(xi)(xi)胞總數。此項檢測所(suo)挑選(xuan)出的(de)胎(tai)牛血清批(pi)號能維持(chi)難(nan)以生(sheng)長細(xi)(xi)胞、貼壁性細(xi)(xi)胞、正常的(de)細(xi)(xi)胞株生(sheng)長及(ji)存活。
1.準備含(han)5%檢(jian)測血(xue)(xue)清或(huo)已驗證合格(ge)的(de)參照血(xue)(xue)清生(sheng)長培(pei)養(yang)(yang)基(ji),基(ji)礎生(sheng)長培(pei)養(yang)(yang)基(ji)為含(han)L-谷(gu)氨酰胺的(de)HBME:EBME(1:1)。按要求,在(zai)每(mei)一次(ci)流量(liang)變(bian)化和分(fen)析過程(cheng)中進行傳代培(pei)養(yang)(yang)時需(xu)配制含(han)5%血(xue)(xue)清生(sheng)長的(de)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)。
2.在低代培(pei)養(yang)(yang)水平時,將2X10 5 WI-38細胞加入(ru)各個含9.5毫升生長培(pei)養(yang)(yang)基的(de)復(fu)式(shi)25-cm 2 培(pei)養(yang)(yang)基中。在不擰緊(jin)瓶蓋(gai)的(de)情況下,將培(pei)養(yang)(yang)瓶放入(ru)4-6%CO 2, 36℃±2℃環境中,保持24小時。然(ran)后(hou)擰緊(jin)瓶蓋(gai),將培(pei)養(yang)(yang)瓶放在36℃±2℃下孵育(yu)7天,在第2天或第3天全(quan)部(bu)更換培(pei)養(yang)(yang)基。
3.在第(di)7天(tian),用(yong)胰蛋(dan)白(bai)酶對每一(yi)個含(han)參(can)照或檢(jian)(jian)測(ce)血清的(de)(de)復式(shi)瓶(ping)中的(de)(de)細胞(bao)進(jin)行(xing)消化得到一(yi)定數(shu)量(liang)細胞(bao),然后合并(bing)并(bing)計數(shu)。將2x10 5 WI-38細胞(bao)加(jia)入含(han)有(you)新(xin)鮮生長培(pei)養(yang)(yang)基(已加(jia)入了(le)與上一(yi)代(dai)(dai)同一(yi)批次的(de)(de)參(can)照或檢(jian)(jian)測(ce)胎牛血清)的(de)(de)新(xin)的(de)(de)復式(shi)25-cm 2 瓶(ping)中,進(jin)行(xing)細胞(bao)傳代(dai)(dai)培(pei)養(yang)(yang)。按第(di)2步所述,將培(pei)養(yang)(yang)瓶(ping)進(jin)行(xing)平衡(heng)并(bing)孵育。
4.如上(shang)所述經過三代連(lian)續分析,在每一代結(jie)束時計(ji)算每一批參照(zhao)或檢(jian)測血(xue)清(qing)(qing)的每瓶細(xi)胞平均數。zui后一代培養的各批檢(jian)測血(xue)清(qing)(qing)實(shi)(shi)驗中的相對(dui)生(sheng)長(chang)(chang)率(RGR)作為參照(zhao)血(xue)清(qing)(qing)實(shi)(shi)驗中獲得(de)的細(xi)胞生(sheng)長(chang)(chang)率分子:
%RGR=檢測血(xue)清實(shi)驗中(zhong)每(mei)瓶平均細胞(bao)數/參照血(xue)清實(shi)驗中(zhong)每(mei)瓶平均細胞(bao)數X100S f9細胞(bao)生長(chang)促進分(fen)(fen)析(xi)(xi)。通過昆(kun)蟲分(fen)(fen)析(xi)(xi)可以保(bao)證您購買(mai)的胎(tai)牛血(xue)清批次可以維持S f9細胞(bao)的生長(chang)。收(shou)到產品(pin)后,您需要(yao)做的就是混勻血(xue)清,在56℃下熱滅活30分(fen)(fen)鐘(zhong)。這(zhe)種分(fen)(fen)析(xi)(xi)法(fa)(fa)也可以用(yong)于乳白蛋白水解產品(pin)、酵母和其(qi)它生長(chang)輔料作(zuo)為原(yuan)料的生物效能分(fen)(fen)析(xi)(xi)。該(gai)分(fen)(fen)析(xi)(xi)法(fa)(fa)的準確性取決于是否用(yong)常(chang)規的細胞(bao)培養方案(an)進行培養。用(yong)臺盼藍(lan)染色(se)排除(chu)法(fa)(fa)測得的細胞(bao)活性至少(shao)不低(di)于80%。
細(xi)胞生長分析法。
1.使用(yong)含10%檢(jian)測(ce)或(huo)參(can)照(zhao)熱(re)滅(mie)活胎牛血清(qing)的(de)已(yi)驗證的(de)Grace昆(kun)明培(pei)養基配制*檢(jian)測(ce)培(pei)養基。
2.將儲備Sf9細胞加入(ru)50毫升(sheng)離心(xin)管中(zhong),在50Xg下離心(xin)5分鐘(zhong)。然后將每支試管的沉淀(dian)物重新用含10%的檢測或(huo)參照(zhao)熱(re)滅活胎牛血清(qing)*培養基配制(zhi)成懸(xuan)浮液。
3.反(fan)試管(guan)(guan)顛倒(dao)幾次,然后每支試管(guan)(guan)倒(dao)出1毫升樣品(pin)。用(yong)臺盼藍染色(se)排除進(jin)行活(huo)細胞計(ji)數。
4.如果活(huo)性≥80%,把(ba)試(shi)管再顛倒幾次并取出0.25毫升樣品。然(ran)后(hou)用Coulter計數(shu)器進行細(xi)胞計數(shu)。
5.將細(xi)胞(bao)加(jia)入Erlenmeyer瓶中,使其zui終細(xi)胞(bao)濃度(du)為(wei)2.75X10 5 cells/ml。孵育后,再一次(ci)進(jin)行細(xi)胞(bao)計數,以保證(zheng)細(xi)胞(bao)密度(du)為(wei)2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。
6.將(jiang)培養瓶放到搖(yao)床上,在27℃±1℃、80-90rpm條件下孵育96小時。
7.從每一培養瓶中(zhong)分別(bie)取出0.25毫升樣品,用Coulter計數器進(jin)行(xing)計數。同時取出一定量的樣品進(jin)行(xing)細胞(bao)活性檢測。
8.將檢測細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)與參(can)照(zhao)細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)相比即可得到(dao)相對細(xi)胞(bao)密(mi)度(du)(RCN)。
噬菌體(ti)檢(jian)測(ce):我們利用溶菌斑(ban)分析(xi)法來(lai)檢(jian)測(ce)是否存在(zai)噬菌體(ti)。從每一批(pi)血(xue)清中取具代表性的樣品加(jia)入胰(yi)蛋白酶(mei)磷(lin)酸瓊(qiong)脂中,并在(zai)其加(jia)入含有噬菌體(ti)敏感的大腸桿菌懸浮液(C-3000或(huo)K-12)。然(ran)后,混(hun)合物會在(zai)胰(yi)蛋白酶(mei)磷(lin)酸瓊(qiong)脂平板上分層,在(zai)36±2℃環境下孵育(yu)約24小(xiao)時(shi)后,觀察平板上溶菌斑(ban)的形態。
生化特征檢(jian)測。
堿性磷酸(suan)酸(suan)酶 | 葡萄糖 |
重(zhong)碳(tan)酸(suan)鹽 | 高密度脂蛋白(HDL) |
膽紅素(su)(總) | 乳酸(suan)脫氫酶(mei)(LDH) |
血脲氮(dan)(BUN) | 低密度(du)脂蛋(dan)白(bai)(LDL) |
BUN/肌氨(an)酸酐比鉀 | 磷(無機) |
血清(qing)谷草(cao)轉氨酶 | 鈣 |
氯(lv)化物 | 鈉 |
膽固醇 | 總鐵結合力 |
肌氨酸酐 | 轉(zhuan)鐵蛋白(bai) |
γ-谷氨(an)酰基轉(zhuan)移酶 | 甘油三酸酯(TG) |
尿(niao)酸(suan) |
|
血(xue)紅(hong)(hong)(hong)蛋(dan)(dan)白檢(jian)測:所有(you)批次(ci)的(de)胎(tai)牛血(xue)清我們都進(jin)行(xing)了血(xue)紅(hong)(hong)(hong)蛋(dan)(dan)白的(de)檢(jian)測,血(xue)紅(hong)(hong)(hong)蛋(dan)(dan)白含量低于《中國生物(wu)制品(pin)主要原輔材料(liao)指控指標(biao)(biao)》(2000年(nian)版)公布的(de)指標(biao)(biao)。
效能檢測:其它血清
新生(sheng)牛(niu)血清(qing)。檢測(ce)新生(sheng)牛(niu)血清(qing)維持超過(guo)三(san)代(dai)VERO細胞生(sheng)長的(de)能力。在每一個培(pei)養期,細胞都從初始孵育密度開始傳代(dai)培(pei)養。可(ke)將所得結果與使用含有已知特(te)征(zheng)的(de)參照血清(qing)對(dui)照生(sheng)長培(pei)養基獲得的(de)平行(xing)結果進行(xing)比(bi)較。
馬血(xue)清。每(mei)一批馬血(xue)清被檢(jian)測維持在含有檢(jian)測批血(xue)清的(de)(de)對(dui)照培養基上Sp2/0-Ag14(小(xiao)鼠骨髓瘤)細胞(bao)生長的(de)(de)能力。可將(jiang)所得結果(guo)與(yu)使(shi)用含有已(yi)知特征的(de)(de)參照血(xue)清對(dui)照生長培養基獲得的(de)(de)平(ping)行結果(guo)進行比較。
血清(qing)的使用與儲存:正確的使用及保存血清(qing),才能(neng)使血清(qing)發揮應有的作用。
1. 儲(chu)存條件(jian):血(xue)(xue)清(qing)一(yi)般儲(chu)存于-20℃,同時(shi)(shi)應(ying)避免反(fan)復凍融(rong)(rong)(rong)。購(gou)買大包裝的血(xue)(xue)清(qing)后(hou)(hou),首先要(yao)滅(mie)活(huo)處理,然后(hou)(hou)分裝成小包裝,儲(chu)存于-20℃,使用前融(rong)(rong)(rong)化(hua)(hua)。融(rong)(rong)(rong)化(hua)(hua)時(shi)(shi)先置于4℃。融(rong)(rong)(rong)化(hua)(hua)后(hou)(hou)的血(xue)(xue)清(qing)在4℃不宜長時(shi)(shi)間存放(fang),應(ying)盡(jin)快使用。
2. 使(shi)用(yong)濃度(du):自從有了合成(cheng)培(pei)養(yang)基(ji),血清(qing)就是(shi)作為一種添加成(cheng)分與(yu)合成(cheng)培(pei)養(yang)基(ji)混合使(shi)用(yong),使(shi)用(yong)濃度(du)一般為5-20%,zui常用(yong)是(shi)10%。過多血清(qing)容(rong)易使(shi)培(pei)養(yang)中的細(xi)胞發生變(bian)化(hua),特別是(shi)一些二倍體的無限細(xi)胞系,迅速生長之后(hou)容(rong)易發生惡性轉化(hua)。
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標準胎牛血清(qing)FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800
標(biao)準(zhun)胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800
活性炭/葡聚糖處理胎(tai)牛血清Charcoal Stripped FBS SH30068.03 USA 500ML 6000
活(huo)性炭(tan)/葡聚(ju)糖(tang)處理(li)胎牛血清(qing),熱滅活(huo),Charcoal Stripped FBS SH30068.03HI USA 500ML 6000
新(xin)生牛血清(qing)New born calf serum SH30406.01 New Zealand 500ML 1300
馬血清Horse Serum SH30074.03 USA 500ML 980
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胎牛血(xue)清(qing)FBS 100-908 SOUTH AMERICA 500ML Gemini
胎(tai)牛血(xue)清FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML Gemini
胎牛血清FBS 100-500 USA 500ML Gemini
關于使用中的常見問題
1.保存血清的辦法?
我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。若你一(yi)次無法用完一(yi)瓶,建議您無菌分裝(zhuang)血清至恰當的滅菌容器內,再放回冷(leng)凍(dong)。
2.如(ru)何解凍血清才(cai)不會使產品質量受損?
我們建議您(nin)將血清從冷凍箱中取出后(hou),先(xian)置于2-8℃冰箱中使之溶(rong)解,然后(hou)在室溫下使之全溶(rong)。但必須(xu)注意的是,溶(rong)解過程中必須(xu)規則地(di)搖晃均勻。
3.血清(qing)解凍(dong)后(hou)發現有絮狀沉(chen)淀物出(chu)現,該如(ru)何處理?
血(xue)(xue)清(qing)中沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)物的(de)(de)(de)出現有許多(duo)原(yuan)因(yin),但(dan)zui普遍的(de)(de)(de)原(yuan)因(yin)是(shi)由于(yu)血(xue)(xue)清(qing)中脂蛋(dan)白的(de)(de)(de)變性造成(cheng)的(de)(de)(de);而血(xue)(xue)纖(xian)維(wei)蛋(dan)白(形成(cheng)凝血(xue)(xue)的(de)(de)(de)蛋(dan)白之(zhi)一)在(zai)血(xue)(xue)清(qing)解凍(dong)后,也會存在(zai)于(yu)血(xue)(xue)清(qing)中,亦是(shi)造成(cheng)血(xue)(xue)清(qing)沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)物的(de)(de)(de)主要(yao)原(yuan)因(yin)之(zhi)一。但(dan)這(zhe)些絮狀沉(chen)(chen)淀(dian)(dian)物,并不(bu)影響血(xue)(xue)清(qing)本(ben)身的(de)(de)(de)質量。
若您(nin)欲去(qu)除這(zhe)些絮狀(zhuang)沉淀物,可以將血清分(fen)裝至無菌離心管中,以400g稍微離心,上清液即(ji)可接著加(jia)入培養基(ji)內(nei)一起過(guo)濾。我們不建(jian)議您(nin)以過(guo)濾的方法去(qu)除這(zhe)些絮狀(zhuang)沉淀物,因為它(ta)可能會(hui)阻塞您(nin)的過(guo)濾膜(mo)。
4.何謂熱滅活?有必要做(zuo)熱滅活嗎?
一般以56℃,30分鐘水(shui)浴(yu)來處理(li)已解凍的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)(xue)清,因為此加熱步驟,可以使補體(ti)去活(huo)性(xing),而(er)(er)補體(ti)所參(can)與的(de)(de)(de)(de)反應有(you):溶(rong)細(xi)胞(bao)(bao)活(huo)性(xing),平滑肌的(de)(de)(de)(de)收縮,肥大細(xi)胞(bao)(bao)和血(xue)(xue)(xue)小板組胺的(de)(de)(de)(de)釋放,增強(qiang)吞(tun)噬(shi)作用,淋(lin)巴(ba)細(xi)胞(bao)(bao)、巨噬(shi)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)(de)(de)(de)趨化和激活(huo)。實驗(yan)顯示,經過正確處理(li)的(de)(de)(de)(de)熱滅(mie)活(huo)血(xue)(xue)(xue)清,對(dui)大多數(shu)的(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)而(er)(er)言(yan)是不需要的(de)(de)(de)(de)。經過處理(li)的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)(xue)清對(dui)細(xi)胞(bao)(bao)生長只有(you)微小的(de)(de)(de)(de)促進(jin),或*沒有(you)任何作用,甚至通常因為高(gao)溫處理(li)影響了血(xue)(xue)(xue)清的(de)(de)(de)(de)質量,而(er)(er)造(zao)成細(xi)胞(bao)(bao)生長速率的(de)(de)(de)(de)降低。
而(er)經過(guo)熱處理的(de)(de)血(xue)清,沉淀物(wu)的(de)(de)形成(cheng)會(hui)(hui)顯(xian)(xian)著(zhu)的(de)(de)增多(duo)(duo),這些沉淀物(wu)在倒置顯(xian)(xian)微鏡下觀察(cha),像是“小黑點”,常常會(hui)(hui)讓研究(jiu)者誤以(yi)為是血(xue)清遭受(shou)污(wu)染,而(er)把血(xue)清放在37℃環境中,又會(hui)(hui)使此沉淀物(wu)更增多(duo)(duo),使研究(jiu)者認(ren)為是微生物(wu)的(de)(de)分裂擴增。因此我們建(jian)議您(nin)(nin),若非必(bi)須,您(nin)(nin)可以(yi)不(bu)(bu)需要(yao)做(zuo)熱滅活這一步。如此以(yi)來(lai),不(bu)(bu)但(dan)節省(sheng)您(nin)(nin)寶貴的(de)(de)時間,更確保您(nin)(nin)血(xue)清的(de)(de)質量(liang)!
5.如何避免沉淀物的(de)出現?
我們(men)建議您在(zai)使(shi)用血(xue)清的(de)時(shi)候,注意正確的(de)血(xue)清解凍步驟,并盡量避免(mian)滅活血(xue)清及長時(shi)間的(de)將血(xue)清置(zhi)于高溫環境中。
胎牛血(xue)(xue)清,小牛血(xue)(xue)清和新(xin)生牛血(xue)(xue)清三(san)種之間的區別:
這三種血清(qing)(qing)的(de)成(cheng)份,總(zong)體沒有什么明顯差(cha)別(bie),只是(shi)有一些(xie)成(cheng)分(fen)(fen)與(yu)其生存(cun)環境有關,如上述有人說的(de)抗(kang)體等很少。此外(wai),因(yin)生長發育的(de)需要,有些(xie)成(cheng)分(fen)(fen)在小牛出(chu)生后(hou)會發生一些(xie)變(bian)化。不(bu)過還沒有搞清(qing)(qing)楚它與(yu)其它的(de)血清(qing)(qing)之間的(de)差(cha)別(bie)。有一點(dian)可以(yi)肯定,胎牛血清(qing)(qing)中的(de)部分(fen)(fen)功能(neng)蛋白(bai)與(yu)小牛血清(qing)(qing)中的(de)含量有差(cha)別(bie)。
胎(tai)牛(niu)本身生(sheng)(sheng)活在(zai)一個潔凈環境(jing)當(dang)中,其血清與外界隔(ge)絕,只要生(sheng)(sheng)產工藝(yi)科學規(gui)范,其質量(liang)肯定要新生(sheng)(sheng)牛(niu)和小(xiao)牛(niu)要好。
血(xue)清(qing)(qing)是血(xue)漿去(qu)除纖(xian)維蛋(dan)白而(er)形成(cheng)(cheng)的(de)一種很(hen)復(fu)雜的(de)混合(he)物(wu),其組成(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)份(fen)雖大部分(fen)已知,但還有(you)一部分(fen)尚不清(qing)(qing)楚,且(qie)血(xue)清(qing)(qing)組成(cheng)(cheng)及(ji)含(han)量(liang)常(chang)隨供(gong)血(xue)動物(wu)的(de)性別、年齡、生理條件(jian)和(he)(he)營養條件(jian)不同而(er)異。血(xue)清(qing)(qing)中含(han)有(you)各種血(xue)漿蛋(dan)白、多肽、脂肪、碳水(shui)化合(he)物(wu)、生長因(yin)子、激素、無機物(wu)等,這些(xie)(xie)物(wu)質對促(cu)進細胞生長或抑制生長活性是達(da)到生理平衡的(de)。對血(xue)清(qing)(qing)的(de)成(cheng)(cheng)分(fen)和(he)(he)作用的(de)研究雖有(you)很(hen)大進展,但仍存在一些(xie)(xie)問題。
胎(tai)牛(niu)血(xue)清是品質zui高的,因(yin)為胎(tai)牛(niu)還未(wei)接(jie)觸外界(jie),血(xue)清中所含(han)的抗(kang)體(ti)(ti)、補體(ti)(ti)等(deng)對細胞有害的成(cheng)分(fen)zui少。
產(chan)品訂購(gou)說明(ming):
1、絕大部分產品備有現(xian)貨,一般情(qing)況下都能訂貨當(dang)日發貨。
2、部分非常用產(chan)品,需(xu)(xu)提前(qian)1-2日預(yu)(yu)訂(ding),海外期貨則需(xu)(xu)要提前(qian)3-6周(zhou)預(yu)(yu)訂(ding)。
3、部分產品(pin)價格會(hui)因貨期、批(pi)次等因素(su)發生變化(hua),若有變動以訂貨當日價格為(wei)準。
4、每日(ri)訂單(dan)截止(zhi)時間為16點整,部(bu)分(fen)城市可到17點整,因超過截止(zhi)時間造(zao)成當日(ri)不能發(fa)貨的將于(yu)次日(ri)安排發(fa)貨。
5、請辦理完貨款后,將收(shou)據、底單等連同收(shou)貨人的(de)地址、姓名、等以傳真、、短信、等形式通知(zhi)我們。
另外慧穎生(sheng)物熱銷(xiao)產(chan)品還有:
貨號(hao) 品(pin)牌 名稱 規格 血源產地(di) 產(chan)品(pin)適用范圍 價格(ge)
S-EXO-US-50 SUER 無外秘體(ti)血清 50ml/250/500ml 北美(mei) 用于exo的細(xi)胞研(yan)究 詢(xun)價
貨號 貨號 名稱(cheng) 規格 血源產地 產品說(shuo)明 價格
EXO-FBS-50A-1 SBI 無外秘體血清 50ml 北美 用于exo的(de)細胞(bao)研究 詢價
貨(huo)號 品牌 名(ming)稱 規格 產地 產(chan)品適用范圍 價格
11269-016 gibco 羊(yang)水培養(yang)基(ji) 100ml 美國 用于體外(wai)羊(yang)水細(xi)胞(bao)(bao)與絨毛膜細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養 詢價
10828-028 gibco 無血清培養基(ji) 500ml 美國 用于細胞的(de)以制(zhi)備(bei)單克隆抗(kang)體,病毒抗(kang)原和重組蛋白等 詢價(jia)
12558011 gibco AmnioMAX™ C-100 Complete Medium 1 set 美國 羊水 詢價
10902088 gibco Sf-900™ II SFM 1000ML 美國 昆蟲(chong) sf9,sf21 詢價
12338018 gibco FreeStyle™ 293 Expression Medium 1000ML 美國 FreeStyle 293-F cells 詢價
A2503101 gibco EfficientFeed™ C+ AGT™ Supplement 100L 美(mei)國 Feed 詢(xun)價
A1327501 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 100L 美國(guo) 詢價
A1327505 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 100L 美國 詢價
A1327504 gibco CD EfficientFeed™ C AGT™ Nutrient Supplement 1L 美(mei)國 詢(xun)價(jia)
A1024001 gibco CHO CD EfficientFeed™ B Liquid Nutrient Supplement 1000ML 美國(guo) 詢價
A1023401 gibco CHO CD EfficientFeed™ A Nutrient Supplement 1000ML 美國 詢(xun)價
A2617502 gibco Dynamis™ AGT™ Medium 100L 美國 Dynamls 詢價
A1148301 gibco CD FortiCHO™ Medium 1000ML 美(mei)國 CD FortiCHO 詢價
A1122201 gibco CD OptiCHO™ AGT™ 1000ML 美國 CD OptiCHO DG44,DXB11,or other CH 詢(xun)價
12681011 gibco CD OptiCHO™ Medium (1X), Liquid 1000ML 美國 詢(xun)價
12490001 gibco CD CHO AGT™ 100L 美國 CD CHO 詢價(jia)
12490025 gibco CD CHO AGT™ 10L 美(mei)國 詢(xun)價(jia)
10743029 gibco CD CHO Medium (1X), Liquid 1000ML 美國 詢價
A29129 gibco ExpiFectamine™ CHO Transfection Kit For 1 L of culture 美(mei)國 Expi 詢價
A2910001 gibco ExpiCHO™ Expression Medium 1000ML 美國(guo) 詢(xun)價
C11885500BT gibco DMEM 低(di)糖培養基(ji) 500ml 國產(chan) 含1000mg/L D-葡萄糖(tang)、L-谷氨酰胺、110mg/L丙酮酸鈉和(he)酚(fen)紅,不含HEPES緩沖(chong)液 詢價
C11960500BT gibco DMEM 高(gao)糖培(pei)養(yang)基 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄糖和酚紅,不含L-谷氨酰胺、丙(bing)酮酸鈉(na)和HEPES緩沖液 詢(xun)價
C11965500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺和酚紅,不(bu)含丙酮酸鈉和HEPES緩(huan)沖液 詢價
C11995500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄(tao)糖 L-谷氨酰胺 110mg/L丙酮酸鈉(na)和酚紅(hong),不含HEPES緩沖(chong)液 詢價(jia)
C12430500BT gibco 500ml 國產 含(han)4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰(xian)胺(an)、25mM HEPES緩沖(chong)液和酚紅(hong),不含(han)丙(bing)酮酸(suan)鈉 詢價
C11875500BT gibco RPMI 1640培養基 500ml 國產(chan) 含L-谷氨酰(xian)胺和酚紅,不含HEPES緩沖液 詢(xun)價(jia)
C22400500BT gibco 500ml 國產 含(han)25mM HEPES緩沖液、L-谷氨酰胺和酚(fen)紅(hong) 詢(xun)價
C11095500BT gibco MEM EARLES培(pei)養基(ji) 500ml 國產 含Earle's平衡鹽、L-谷氨(an)酰胺(an)和酚(fen)紅,不含HEPES緩(huan)沖液 詢(xun)價
C11330500BT gibco DMEM /F12 500ml 國產(chan) 1:1,含(han)15mM HEPES緩沖(chong)液、L-谷氨酰胺和酚(fen)紅 詢價
C12571500BT gibco MEM ALPHA 500ml 國產(chan) 含L-谷氨(an)酰胺、核苷、脫(tuo)氧核苷和酚紅(hong) 詢(xun)價
C14190500BT gibco DPBS 500ml 國(guo)產 1X,不含氯化鈣(gai)、氯化鎂(mei)和酚紅 詢價
C10010500BT gibco PBS 7.4 (1X) 500ml 國(guo)產 1X,不含氯化鈣、氯化鎂和酚紅,細胞培(pei)養(yang)級 詢價(jia)
C20012500BT gibco PBS 7.2 (1X) 500ml 國產(chan) 1X,不含氯化鈣、氯化鎂和(he)酚(fen)紅,細胞培(pei)養級 詢價
SH30022.01 Hyclone DMEM高糖培養基 500ML 國(guo)產 含(han)(han)4.0 mM L-谷(gu)氨酰胺(an),不含(han)(han)丙酮酸鈉。
SH30809.01 Hyclone 1640培養基 500ML 國產
SH30022.01 DMEM高糖液體培養(yang)基(ji) DMEM HyClone 500ml
SH30809.01 1640液(ye)體培(pei)養基 1640 HyClone 500ml
SH30021.01 DMEM低糖液體培養(yang)基 DMEM HyClone 500ml
SH30023.01 DMEM/F12(1:1)液體(ti)培養基 DMEM/F12(1:1) HyClone 500ml
SH30024.01 MEM液(ye)體(ti)培(pei)養基 MEM HyClone 500ml
SH30026.01 MEM液體(ti)培養基(ji) F12 HyClone 500ml
SH30228.01 IMDM液體(ti)培養基 IMDM HyClone 500ml
SH30243.01 DMEM高(gao)糖(tang)[含丙酮酸鈉] DMEM HyClone 500ml
SH30253.01 M199液(ye)體培(pei)養基 M199 HyClone 500ml
SH30256.01 PBS緩沖液 PBS HyClone 500ml
SH30265.01 α-MEM液體培養基 α-MEM HyClone 500ml
SH30238.01 非必須氨基(ji)酸(suan) **** HyClone 100ml
SH30042.01 胰蛋白酶溶液 **** HyClone 100ml
SV30010 青霉素鏈霉素溶液 雙抗 **** HyClone 100ml