Gibco馬血清（貨號：16050-122）現貨/* 中文(wen)簡(jian)介：

產品(pin)名(ming)稱：馬血清

英文名稱：Horse Serum

品牌：GIBCO

貨(huo)號：16050-122

血源(yuan)：New Zealand Origin

規(gui)格：500ML

庫(ku)存狀態(tai)：大量現貨

Gibco馬血清（貨號(hao)：16050-122）現貨/* 英文簡(jian)介：

Gibco™ sera offers excellent value for basic cell culture, specialty research, and specific assays, earning the trust of researchers with consistent quality and award-winning support that helps meet your research needs and budget requirements

Sera Category: Specialty

Origin: New Zealand.

EIA tested (negative) serum from a donor herd.

This reagent is classified as a medical device in several countries. If it is not regulated as a medical device in specific region, it should be used for laboratory use only.

 相關主(zhu)要產(chan)品(pin)：

胎牛血清FBS S-FBS-SA-011 SOUTH AMERICA 100ML 1100

胎牛血清FBS S-FBS-SA-015 SOUTH AMERICA 500ML 2500

胎牛血清FBS S-FBS-US-015 USA 500ML 4800

超(chao)低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS S-FBS-SA-055 SOUTH AMERICA 500ML 5200

透(tou)析(xi)胎牛血清Dialyzed FBS S-FBS-US-065 USA 500ML 5800

活性(xing)炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS S-FBS-AU-045 AUSTRALIA 500ML 5800

胎牛血清FBS SFBS SOUTH AMERICA 500ML 2600

胎牛(niu)血清FBS SFBS AUSTRALIA 500ML 6000

新生牛血(xue)清(qing)New born calf serum SNCS New Zealand 500ML 1300

胎(tai)牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清FBS 10270-106 SOUTH AMERICA 500ML 3200

胎牛血清(qing)FBS c2027050 SOUTH AMERICA 500ML 2600

優等胎牛血清(qing)FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優等胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優等(deng)胎牛血清FBS 10437-028  Mexico 500ML 3200

優等胎牛血清FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

優等胎牛血清(qing)FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

優等胎(tai)牛血清(qing)FBS 10099-141 AUSTRALIA 500ML 7000

特級胎牛血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特級胎牛血(xue)清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

特(te)級胎牛(niu)血清FBS 16000-044 USA 500ML 5800

優等(deng)胎牛血清(qing)FBS 26140-079 USA 500ML 3600

優等胎牛血清FBS 26140-079 USA 500ML 3600

熱滅活胎牛血清(qing)FBS heat inactivated 10082-147 USA 500ML 5600

熱滅活胎牛血清(qing)FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

熱(re)滅活胎牛(niu)血清FBS heat inactivated 10100-147 AUSTRALIA 500ML 14239

超(chao)低IgG胎牛血清Ultra-low IgG FBS 16250-078 USA 500ML 6000

透析胎牛血清(qing)Dialyzed FBS 264000-044 USA 500ML 6800

活性炭/葡聚糖處理胎牛(niu)血(xue)清Charcoal Stripped FBS 12676-029 USA 500Ml 6800

新生牛血清(qing)New born calf serum 16010159 New Zealand 500ML 1035

馬(ma)血清Horse Serum 16050-122 New Zealand 500ML 909

熱滅活馬(ma)血清Heat-Inactivated Horse Serum  26050-088 New Zealand 500Ml 1069

胎(tai)牛血清FBS Sv30087.01 SOUTH AMERICA 100ML 800

胎牛血清(qing)FBS Sv30087.02 SOUTH AMERICA 500ML 1800

優等胎牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

優等胎(tai)牛血清FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

優等胎牛血清(qing)FBS SH30084.03 AUSTRALIA 500ML 5800

特級(ji)胎牛血清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特級胎牛(niu)血(xue)清FBS SH30396.03 Canada 500ML 3900

特(te)級胎牛(niu)血清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特級胎牛(niu)血清FBS SH30070.03 USA 500ML 3900

特級(ji)胎(tai)牛(niu)血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

特(te)級胎(tai)牛血清FBS SH30070.03E USA 500ML 5600

標準胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

標準(zhun)胎牛血清FBS SH30370.03 AUSTRALIA 500ML 2800

活性炭/葡聚糖處理胎牛血清Charcoal Stripped FBS SH30068.03 USA 500ML 6000

活性炭/葡聚(ju)糖處(chu)理胎(tai)牛(niu)血清，熱滅(mie)活，Charcoal Stripped FBS SH30068.03HI USA 500ML 6000

新生牛血清New born calf serum SH30406.01 New Zealand 500ML 1300

馬血清Horse Serum SH30074.03 USA 500ML 980

胎牛血清FBS A15-101 EU 500ML PAA

胎牛血清(qing)FBS A15-151 EU 500ML PAA

胎牛血清FBS  04-001-1ACS SOUTH AMERICA 500ML BI

胎(tai)牛血(xue)清FBS  F2442 USA 500ML SIGMA

胎牛血(xue)清(qing)FBS 100-908 SOUTH AMERICA 500ML Gemini

胎(tai)牛血清(qing)FBS 100-700 AUSTRALIA 500ML Gemini

胎(tai)牛血(xue)清FBS 100-500 USA 500ML Gemini

一旦您在(zai)細胞培(pei)養(yang)(yang)的過程中發現有黑點生成，首先，要肉眼觀察培(pei)養(yang)(yang)基(ji)是(shi)否混(hun)濁，然后，在(zai)鏡下觀察培(pei)養(yang)(yang)細胞生長的狀態，黑點是(shi)否游動(dong)。如(ru)果細胞被(bei)污(wu)染，微生物則(ze)會大量繁(fan)殖(zhi)，培(pei)養(yang)(yang)基(ji)就會迅(xun)速(su)變黃、變混(hun)濁。污(wu)染包括(kuo)細菌污(wu)染、支原體污(wu)染等。

如果在(zai)鏡下觀察(cha)細胞，生長狀態(tai)良好，與(yu)黑(hei)點出現(xian)前相比(bi)，沒有任何變(bian)化，那么，黑(hei)點的出現(xian)可能與(yu)以下幾種情況有關(guan)：

(1)細胞(bao)生長過老，破碎的細胞(bao)殘骸;

(2)血(xue)清質量不好，反復(fu)凍融的結果;

(3)配(pei)制培養基的pH值偏高，不宜細胞生長;

(5)培(pei)養原代(dai)細胞中出現小黑(hei)點，可能是原代(dai)組織中的雜質(zhi)，多次傳代(dai)可以(yi)消除。

 (4)配制(zhi)培養基(ji)的(de)(de)水(shui)質、容器不合格。可應用離心、過濾的(de)(de)方(fang)法去除(chu)這些黑點;

細胞培養中如何(he)防止黑點生成

(1) 盡可能地減少血清凍融次數。

(2) 培養基無(wu)需37℃水浴。

(3) 培養基保持*PH值7.0- 7.2。

(4) 嚴格(ge)控制配制培(pei)養基的水質，容器定期刷洗。

(5) 掌握細胞傳代的*時機(ji)，細胞切勿生長(chang)過(guo)老(lao)。

血(xue)清中包含絮狀沉淀(dian)，它(ta)們是(shi)什么，怎么處理(li)?

沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)包含纖維蛋(dan)白和脂蛋(dan)白。這是正常特(te)性(xing)，不(bu)會(hui)影響產品性(xing)質(zhi)。要除(chu)去(qu)沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)，離心血(xue)清(qing)(400g，1-2分鐘)或者簡單(dan)的(de)讓其沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)在瓶(ping)子底(di)部，將血(xue)清(qing)小心的(de)轉(zhuan)移到(dao)另一個無菌瓶(ping)里(一般不(bu)建議采(cai)用(yong)(yong)過(guo)濾(lv)的(de)方法除(chu)去(qu)沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)，因(yin)為(wei)沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)會(hui)堵(du)塞濾(lv)膜而無法過(guo)濾(lv))。大多情況輕輕搖動沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)并加熱(re)至37℃就會(hui)再溶解。所以，使用(yong)(yong)產品時要搖動并加熱(re)血(xue)清(qing)至37℃，沉(chen)(chen)(chen)淀(dian)會(hui)自然消失。

 通常作(zuo)為補充成分添加(jia)在基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)內使用。它能夠提(ti)供各種大分子(zi)蛋白(bai)，小(xiao)分子(zi)量營養(yang)，水溶性成分的(de)(de)(de)轉(zhuan)運蛋白(bai)，和其它一(yi)些細胞在體外所必需的(de)(de)(de)成分，如激素和附著因子(zi)。血清可以(yi)結合或中和一(yi)些生長因子(zi)中的(de)(de)(de)有毒成分，并提(ti)供培(pei)養(yang)基(ji)的(de)(de)(de)緩沖能力。細胞培(pei)養(yang)時血清的(de)(de)(de)添加(jia)依(yi)賴于(yu)基(ji)礎(chu)培(pei)養(yang)基(ji)的(de)(de)(de)化學組成，培(pei)養(yang)細胞的(de)(de)(de)類(lei)型(xing)，及(ji)所用的(de)(de)(de)培(pei)養(yang)系統。

我(wo)(wo)們在提供細胞培養(yang)基、平衡(heng)鹽溶液(ye)、無血(xue)清(qing)培養(yang)基和(he)(he)試劑的(de)(de)同(tong)時(shi)，還提供高品(pin)質的(de)(de)血(xue)清(qing)。我(wo)(wo)們對血(xue)清(qing)制備進行全過(guo)程(cheng)(cheng)監管(guan)。從血(xue)清(qing)收集到zui終產(chan)品(pin)檢驗和(he)(he)內部稽(ji)核的(de)(de)每(mei)一個步(bu)驟，我(wo)(wo)們都采(cai)用(yong)設備和(he)(he)標準(zhun)操作程(cheng)(cheng)序，以確保整(zheng)個過(guo)程(cheng)(cheng)中每(mei)個環(huan)節的(de)(de)產(chan)品(pin)質量。對整(zheng)個過(guo)程(cheng)(cheng)的(de)(de)控制可以保證(zheng)產(chan)品(pin)的(de)(de)持續高品(pin)質，降(jiang)低不同(tong)批次的(de)(de)差異。

處(chu)理(li)：全部血(xue)清(qing)(qing)(qing)：收集的(de)血(xue)液均在冷藏條件下處(chu)理(li)。血(xue)清(qing)(qing)(qing)和血(xue)分離后(hou)立即將(jiang)血(xue)清(qing)(qing)(qing)合并并冷凍。只有符(fu)合我們的(de)檢測標準的(de)血(xue)清(qing)(qing)(qing)才被接受作進(jin)一步處(chu)理(li)。

熱滅(mie)(mie)活(huo)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)：熱滅(mie)(mie)活(huo)是在56℃水(shui)浴中(zhong)嚴格控(kong)溫30分(fen)鐘。透(tou)析血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)：用(yong)(yong)10,000截留(liu)分(fen)子量(liang)的(de)(de)(de)(de)透(tou)析膜在0.15M的(de)(de)(de)(de)NaCl中(zhong)進行(xing)(xing)透(tou)析，直到葡(pu)萄糖水(shui)平(ping)低于5mg/dl(用(yong)(yong)鄰甲苯胺測試法檢驗)。γ射(she)(she)線(xian)照(zhao)(zhao)射(she)(she)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)：可按客(ke)戶要求對血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)進行(xing)(xing)γ射(she)(she)線(xian)照(zhao)(zhao)射(she)(she)。通過γ射(she)(she)線(xian)照(zhao)(zhao)射(she)(she)以滅(mie)(mie)活(huo)各種動(dong)物(wu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)(包(bao)括胎牛(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)、新(xin)生牛(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)、豬(zhu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)和馬血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing))中(zhong)的(de)(de)(de)(de)病毒和支原體(ti)的(de)(de)(de)(de)方法已經得到證(zheng)實(shi)。研究證(zheng)實(shi)照(zhao)(zhao)射(she)(she)劑量(liang)在30-45kGy為(wei)宜(yi)。血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)在此(ci)照(zhao)(zhao)射(she)(she)后(hou)物(wu)理化(hua)學特(te)性和細胞培養表現(xian)沒(mei)有變(bian)化(hua)。裝(zhuang)瓶(ping)：粗(cu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)須通過一(yi)(yi)系列的(de)(de)(de)(de)過濾才成為(wei)成品。zui后(hou)的(de)(de)(de)(de)過濾步驟包(bao)括使用(yong)(yong)0.2um和0.1um的(de)(de)(de)(de)無菌過濾。胎牛(niu)血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)須通過三次0.1um過濾，其他血(xue)(xue)(xue)(xue)清(qing)須通過0.2um過濾。zui終產品的(de)(de)(de)(de)質量(liang)控(kong)制：我們采取(qu)以下(xia)方法對每一(yi)(yi)批次的(de)(de)(de)(de)產品選取(qu)一(yi)(yi)定(ding)數(shu)量(liang)的(de)(de)(de)(de)樣品進行(xing)(xing)質量(liang)控(kong)制分(fen)析：

化學檢測：使(shi)(shi)用(yong)低溫凝固點(dian)的(de)方法檢測滲透壓，以(yi)保(bao)證符合(he)產品規范(fan)。我們每天使(shi)(shi)用(yong)國家(jia)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)的(de)技術研究(jiu)所(suo)標(biao)(biao)(biao)定(ding)的(de)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)溶液對我們的(de)滲透壓檢測儀器進行(xing)校(xiao)準(zhun)(zhun)。同樣每天使(shi)(shi)用(yong)國家(jia)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)技術研究(jiu)所(suo)標(biao)(biao)(biao)定(ding)的(de)標(biao)(biao)(biao)準(zhun)(zhun)溶液對pH計進行(xing)校(xiao)準(zhun)(zhun)。

使(shi)用電泳圖譜(pu)鑒定(ding)血(xue)清的整(zheng)體(ti)性質。樣(yang)品被轉(zhuan)移到硝酸纖維素基質中(zhong)，并(bing)在(zai)緩沖體(ti)系(xi)內遷移。條(tiao)帶經染色、清潔(jie)、干燥后用密度(du)儀進行掃(sao)描，以檢測白(bai)蛋白(bai)和(he)(he)球蛋白(bai)組(zu)分的相對濃度(du)。為證(zheng)實是(shi)否在(zai)適當的條(tiao)件下(xia)進行采(cai)血(xue)和(he)(he)處理(li)，使(shi)用修(xiu)飾(shi)的Fleming方(fang)法對血(xue)紅蛋白(bai)進行分光光度(du)檢測。

隨(sui)著動物(wu)年齡的增加，血(xue)清(qing)總蛋(dan)白(bai)含量也(ye)相應地提高。使用(yong)自動化的Biuret方(fang)法進(jin)行總血(xue)清(qing)蛋(dan)白(bai)的檢測，以(yi)確認動物(wu)年齡并(bing)驗(yan)證符合產品規范。使用(yong)色度(du)計在不(bu)同波(bo)長下檢測樣品和Biuret試劑混(hun)合波(bo)的吸(xi)光度(du)。自動計算結果(guo)后，與標準曲(qu)線比較，即可得(de)到蛋(dan)白(bai)值(zhi)(克(ke)/公(gong)升(sheng))。

穩(wen)定(ding)性檢測程序：在每(mei)一個標記為體外診(zhen)斷的(de)產(chan)(chan)品(pin)(pin)上顯示的(de)效(xiao)期表(biao)明了這個產(chan)(chan)品(pin)(pin)具(ju)有(you)多長(chang)時間的(de)效(xiao)能。我(wo)(wo)們的(de)穩(wen)定(ding)性程序確(que)定(ding)和(he)證明了產(chan)(chan)品(pin)(pin)效(xiao)期。我(wo)(wo)們定(ding)期監測批量產(chan)(chan)品(pin)(pin)，確(que)定(ding)產(chan)(chan)品(pin)(pin)在推薦貯存條(tiao)件下具(ju)有(you)可(ke)接受(shou)效(xiao)果的(de)時間長(chang)度。

微生物學(xue)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)：所有(you)血(xue)清(qing)(qing)使用(yong)(yong)Barile&Kern的大體積方(fang)(fang)法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)支原(yuan)(yuan)體。在(zai)(zai)推薦(jian)方(fang)(fang)法(fa)(fa)的檢(jian)測(ce)(ce)(ce)范(fan)圍(wei)內檢(jian)測(ce)(ce)(ce)結果(guo)是準確的。樣品至(zhi)少(shao)應該在(zai)(zai)肉湯中合并培養(yang)3個星期，同時要(yao)在(zai)(zai)瓊脂(zhi)平(ping)板(ban)上進(jin)(jin)(jin)行(xing)不少(shao)于4次傳代培養(yang)。在(zai)(zai)有(you)氧和厭氧(95%氮(dan)，5%CO2)條件下，平(ping)板(ban)在(zai)(zai)36±2℃下孵(fu)育。在(zai)(zai)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)過程中，每周對(dui)瓊脂(zhi)平(ping)板(ban)進(jin)(jin)(jin)行(xing)一次微生物生長(chang)情況檢(jian)驗。使用(yong)(yong)Dienes染(ran)(ran)色(se)法(fa)(fa)對(dui)懷疑被污(wu)染(ran)(ran)的瓊脂(zhi)平(ping)板(ban)進(jin)(jin)(jin)行(xing)支原(yuan)(yuan)體菌落(luo)的檢(jian)測(ce)(ce)(ce)。然后(hou)，對(dui)平(ping)板(ban)進(jin)(jin)(jin)行(xing)再(zai)次鏡檢(jian)。對(dui)孵(fu)育肉湯瓶要(yao)定期進(jin)(jin)(jin)行(xing)濁度和pH值(zhi)變動的檢(jian)測(ce)(ce)(ce)。在(zai)(zai)推薦(jian)方(fang)(fang)法(fa)(fa)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)范(fan)圍(wei)內，所有(you)血(xue)清(qing)(qing)也要(yao)使用(yong)(yong)Hoechst熒光DNA染(ran)(ran)色(se)法(fa)(fa)進(jin)(jin)(jin)行(xing)不可在(zai)(zai)肉湯中培養(yang)的支原(yuan)(yuan)體(包括M.hyorhinis屬)檢(jian)測(ce)(ce)(ce)。

病(bing)(bing)毒(du)檢(jian)測(ce)：已(yi)知無外來物質(zhi)的(de)(de)細(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)須經過在包(bao)含(han)15%測(ce)試血清的(de)(de)生長(chang)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)中進(jin)行為(wei)期(qi)21天的(de)(de)三次傳(chuan)代培(pei)養(yang)(yang)。使(shi)用對(dui)照培(pei)養(yang)(yang)基(ji)(ji)和已(yi)知對(dui)外來物質(zhi)為(wei)陰(yin)性的(de)(de)血清平(ping)行地維持陰(yin)性對(dui)照培(pei)養(yang)(yang)。整個期(qi)間(jian)，檢(jian)測(ce)所有(you)的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)情(qing)況，以便發現(xian)是(shi)否存在病(bing)(bing)毒(du)誘(you)發的(de)(de)細(xi)胞(bao)形態改變或致細(xi)胞(bao)病(bing)(bing)變效應。在14至21天的(de)(de)培(pei)養(yang)(yang)期(qi)間(jian)，對(dui)含(han)有(you)檢(jian)測(ce)血清的(de)(de)平(ping)行培(pei)養(yang)(yang)瓶按(an)下面標準病(bing)(bing)毒(du)檢(jian)測(ce)方法進(jin)行評(ping)估。

將其中一瓶檢(jian)測細胞用胰蛋白(bai)酶消化，然后把細胞分別加入到總面積為6cm 2 的六室(shi)載(zai)玻(bo)片上。同時準備(bei)陰性(xing)對照(zhao)載(zai)玻(bo)片。在檢(jian)測培養(yang)的單室(shi)載(zai)玻(bo)片上加入牛(niu)病毒(du)(du)性(xing)腹瀉病毒(du)(du)(BVDV)、牛(niu)細小病毒(du)(du)、牛(niu)腺病毒(du)(du)、狂犬(quan)病毒(du)(du)和(he)呼腸病毒(du)(du)的染色劑，作為單個的陽性(xing)對照(zhao)。再經過7天培養(yang)(總共(gong)21天)，利用熒光抗(kang)體技術檢(jian)測病毒(du)(du)。

通(tong)過對檢(jian)測培養進(jin)行蘇木精伊紅染色，觀察致細胞(bao)突變效(xiao)(xiao)(xiao)應(ying)(ying)(CPE)或(huo)其(qi)他病毒誘導效(xiao)(xiao)(xiao)應(ying)(ying)。檢(jian)測細胞(bao)是否存在(zai)CPE效(xiao)(xiao)(xiao)應(ying)(ying)、內含物(wu)、多核體(ti)(ti)或(huo)其(qi)他異常效(xiao)(xiao)(xiao)應(ying)(ying)。

內毒素(su)檢測(ce)(ce)：我們用(yong)阿米(mi)巴變形(xing)細胞溶解物(wu)(LAL)凝膠法(fa)來檢測(ce)(ce)胎牛血清的內毒素(su)含量。

效(xiao)能(neng)檢(jian)測：
對(dui)每一(yi)批(pi)次(ci)的(de)(de)(de)(de)胎牛血(xue)清(qing)，我們都進(jin)行(xing)下(xia)述培(pei)養效(xiao)能檢測。選擇血(xue)清(qing)zui重要的(de)(de)(de)(de)標(biao)準是其支持特(te)殊細胞(bao)的(de)(de)(de)(de)生(sheng)長能力。因(yin)此，除了保(bao)證血(xue)清(qing)通過嚴格(ge)的(de)(de)(de)(de)品質(zhi)控制，我們也同時在(zai)實驗室條件下(xia)對(dui)血(xue)清(qing)的(de)(de)(de)(de)三個重要的(de)(de)(de)(de)培(pei)養效(xiao)能進(jin)行(xing)檢測：克隆效(xiao)率、貼壁(bi)效(xiao)果和二(er)倍體(ti)成纖維細胞(bao)生(sheng)長促進(jin)。

克隆效(xiao)率(lv)分(fen)析：克隆效(xiao)率(lv)實驗分(fen)析每一(yi)批胎牛血清促進小鼠骨(gu)髓瘤(liu)細胞及其衍生的雜交(jiao)瘤(liu)細胞的克隆和生長能力(li)。下(xia)列產品
經驗(yan)(yan)證可(ke)用(yong)于該實驗(yan)(yan)：
Sp2/0-Ag14(ATCC #CRL 1581)
P3x63-Ag8.653(ATCC #CRL 1580)

每一批胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)都要分(fen)別在復制(zhi)微(wei)量滴定平(ping)板上加入兩種血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)濃(nong)度和(he)兩種細胞接種量(10%血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)和(he)1cell/孔(kong)，4%血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)和(he)5cells/孔(kong))的(de)(de)(de)(de)情況下進行(xing)分(fen)析。克隆分(fen)析結果除以已(yi)確定的(de)(de)(de)(de)參照血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)值(zhi)得以歸一化。在許(xu)多日常雜(za)交(jiao)選擇程序(xu)中具(ju)有代表性的(de)(de)(de)(de)是(shi)高濃(nong)度的(de)(de)(de)(de)血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)，而(er)低濃(nong)度血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)在設(she)計血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)批次(ci)細微(wei)差異放大檢測(ce)(ce)中有更為嚴(yan)格(ge)的(de)(de)(de)(de)測(ce)(ce)試(shi)。嚴(yan)格(ge)的(de)(de)(de)(de)1cell/孔(kong)測(ce)(ce)試(shi)是(shi)模擬(ni)單一雜(za)交(jiao)選擇的(de)(de)(de)(de)實驗室(shi)條(tiao)件(jian)。為每一批次(ci)胎牛血(xue)(xue)清(qing)(qing)(qing)提供的(de)(de)(de)(de)分(fen)析證明報(bao)告中的(de)(de)(de)(de)克隆效率值(zhi)為兩次(ci)測(ce)(ce)試(shi)條(tiao)件(jian)下的(de)(de)(de)(de)平(ping)均值(zhi)。

克隆分(fen)析法：克隆分(fen)析法是(shi)在復(fu)式(shi)96孔(kong)板中加入兩種(zhong)胎牛(niu)血清濃度(10%v/v)和(4%v/v)和兩種(zhong)接種(zhong)量(liang)的情況下(xia)進行的。每一(yi)次化驗(yan)中，同時(shi)測量(liang)前期已驗(yan)證合格的一(yi)批(pi)胎牛(niu)血清，并將此(ci)測量(liang)值作為內部參(can)考(kao)標準。
克隆分析按下述方法進行：

1．Sp2/0-Ag14(sp2)和P3x63-Ag8.653(653)在含有10%的(de)胎牛血(xue)清(qing)的(de)RPM1640中通(tong)常保持對數(shu)生長(chang)期。在顯微(wei)鏡下(xia)，利用臺盼藍排除法對活細胞進行計數(shu)。

2．用RPM1640培養基(ji)將儲備細(xi)胞懸浮液進行連續稀釋，使其(qi)達到(dao)預期(qi)的25cells/ml和5cells/ml接種濃度(du)。準(zhun)備含有(you)參(can)照或測試胎(tai)牛血清的RPM1640培養基(ji)。將這(zhe)種密度(du)的細(xi)胞分(fen)配(pei)到(dao)各個分(fen)析生長(chang)培養基(ji)體積為0.2毫升的孔中，使其(qi)分(fen)別平均含有(you)5個和1個細(xi)胞。

3．將96孔板(ban)放入36±2℃，4-6% CO 2 的潮濕培養箱(xiang)孵育約10至15天(tian)。

4．在孵(fu)育期間，用(yong)肉眼觀察平(ping)板并(bing)對用(yong)于克(ke)隆的(de)孔進(jin)行計數(shu)。克(ke)隆效(xiao)率(lv)(lv)按下列方(fang)法(fa)計算：克(ke)隆效(xiao)率(lv)(lv)=(陽性孔平(ping)均數(shu)/孵(fu)育孔總(zong)數(shu))×100%

5．每(mei)(mei)一(yi)批(pi)次胎牛血清(qing)維持(chi)(chi)指示(shi)劑(ji)骨髓瘤細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)的(de)定量(liang)按照(zhao)以下方法測(ce)得的(de)相對克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)(RCE)進(jin)行(xing)歸一(yi)化(hua)：RCE=檢(jian)測(ce)血清(qing)的(de)克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)/對照(zhao)血清(qing)的(de)克(ke)隆(long)效(xiao)率(lv)貼(tie)壁(bi)效(xiao)率(lv)分析：貼(tie)壁(bi)效(xiao)率(lv)分析是(shi)利用已轉型的(de)人(ren)類細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系來檢(jian)測(ce)每(mei)(mei)一(yi)批(pi)血清(qing)促使持(chi)(chi)續貼(tie)附細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系的(de)生長能(neng)力。選擇已被驗證可(ke)以檢(jian)測(ce)貼(tie)壁(bi)效(xiao)率(lv)的(de)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)系A549(人(ren)肺腫瘤細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)，ATCC#CCL,185)，是(shi)因為它可(ke)以區分一(yi)批(pi)血清(qing)維持(chi)(chi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)貼(tie)壁(bi)和繁殖能(neng)力的(de)細(xi)(xi)(xi)微差異。

每(mei)一批(pi)次胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)都要在兩(liang)(liang)種(zhong)(zhong)血(xue)(xue)清(qing)(qing)濃度(du)和(he)兩(liang)(liang)種(zhong)(zhong)細胞(bao)(bao)接種(zhong)(zhong)濃度(du)下(xia)(10%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)100cells/孔，4%血(xue)(xue)清(qing)(qing)和(he)200cells/孔)測試三次。在36±2℃，4-6% CO 2 的(de)潮濕培(pei)養箱孵育(yu)約10至14天(tian)，對被染色(se)的(de)細胞(bao)(bao)菌落進行計數(shu)即可得(de)到(dao)其貼(tie)壁效率。將結果除以參考的(de)對照血(xue)(xue)清(qing)(qing)得(de)以歸(gui)一化。通過兩(liang)(liang)種(zhong)(zhong)血(xue)(xue)清(qing)(qing)濃度(du)的(de)測試，可以驗證該批(pi)次血(xue)(xue)清(qing)(qing)在減量和(he)標準水平下(xia)維持生長的(de)能力(li)。為(wei)每(mei)一批(pi)次胎牛(niu)血(xue)(xue)清(qing)(qing)提(ti)供的(de)分析證明報告中的(de)貼(tie)壁效率值為(wei)兩(liang)(liang)次測試條件下(xia)的(de)平均值。

貼壁(bi)分(fen)析法：使用貼附分(fen)析檢測上述(shu)每(mei)(mei)一(yi)批測試(shi)血清。這(zhe)種分(fen)析法針對(dui)每(mei)(mei)一(yi)個(ge)血清樣品使用一(yi)個(ge)6孔(kong)板(每(mei)(mei)室9.6cm 2 )，并可以對(dui)三個(ge)孔(kong)的(de)數據進(jin)行平均處(chu)理。每(mei)(mei)一(yi)次化(hua)驗(yan)中(zhong)，同時測量(liang)前期(qi)已驗(yan)證合格的(de)一(yi)批胎(tai)牛血清，并將此測量(liang)值(zhi)作為內(nei)部參考標準。

貼(tie)附分析按(an)下述方法進行(xing)：

1．A549細胞系用含有10%胎牛血清的(de)DMEM培養基，在36±2℃，以亞(ya)融合(he)密度下進(jin)行培養。

2．含10%(v/v)和(he)4%(v/v)血清的DMEM由分別(bie)(bie)在22.5毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)和(he)24毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)DMEM中(zhong)加(jia)入2.5毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)和(he)1毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)胎(tai)牛血清配制而成(cheng)，zui終有效體積為25毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)。將5毫(hao)升(sheng)(sheng)(sheng)含血清培養基(ji)分別(bie)(bie)加(jia)入6孔板的每(mei)一個孔中(zhong)。

3．A549培養細(xi)胞(bao)先經過胰蛋白酶消化，測(ce)定活細(xi)胞(bao)數(shu)，然后(hou)稀釋細(xi)胞(bao)懸(xuan)浮液至(zhi)2,000cells/ml。

4．將(jiang)0.1毫升(sheng)細胞懸浮液加(jia)入200cells/孔室(shi)中(zhong)，0.05毫升(sheng)懸浮液加(jia)入100cells/孔室(shi)中(zhong)。平(ping)板混合(he)后放入36±2℃，5%CO 2 的潮濕(shi)培養箱孵育約10至(zhi)14天。

5．孵育后，取出平板，去(qu)除生長培養基，用亞甲(jia)基蘭-甲(jia)醇(chun)溶液(ye)對(dui)菌落進行染色(se)。

6．計算(suan)菌(jun)落(luo)形成，然后按(an)下述方法(fa)計算(suan)貼壁效率(lv)：%貼壁效率(lv)=每孔菌(jun)落(luo)平(ping)(ping)均數/每孔孵育活細胞平(ping)(ping)均數×100

7．為(wei)方便比較，將(jiang)測(ce)得(de)(de)的(de)貼壁(bi)(bi)效(xiao)(xiao)率(lv)數值除以(yi)每(mei)批(pi)檢測(ce)血(xue)(xue)清(qing)的(de)相對貼壁(bi)(bi)效(xiao)(xiao)率(lv)(RPE)得(de)(de)以(yi)歸一化：RCE=檢測(ce)血(xue)(xue)清(qing)的(de)貼壁(bi)(bi)效(xiao)(xiao)率(lv)/參照血(xue)(xue)清(qing)的(de)貼壁(bi)(bi)效(xiao)(xiao)率(lv)二倍體成纖維(wei)細(xi)胞(bao)生(sheng)長：促進生(sheng)長分析用(yong)于檢測(ce)每(mei)一批(pi)胎牛血(xue)(xue)清(qing)維(wei)持難培養的(de)人二倍體成纖維(wei)細(xi)胞(bao)長期生(sheng)長的(de)能力。

下列細胞系經(jing)認證可用于該實驗：

WI-38(人二倍(bei)體(ti)肺成纖維細胞(bao)，ATCC#CCL 75)

WI-38細胞在含(han)5%胎牛血(xue)清的(de)(de)低(di)密度(du)(2X10 5 /瓶)復式25-cm 2瓶中孵育(yu)(yu)，并進行為(wei)(wei)期三(san)個連續7天(tian)的(de)(de)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)(yang)。在每(mei)一(yi)個培(pei)養(yang)(yang)期，細胞都從初(chu)始(shi)孵育(yu)(yu)密度(du)開始(shi)傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)(yang)。壓力(li)分(fen)層率、成倍繁殖數量(liang)和減量(liang)血(xue)清濃度(du)是每(mei)批次促(cu)進難培(pei)養(yang)(yang)二(er)倍體細胞的(de)(de)生(sheng)(sheng)長(chang)(chang)血(xue)清的(de)(de)嚴(yan)格(ge)測(ce)試(shi)指標。通過(guo)連續三(san)代(dai)培(pei)養(yang)(yang)以(yi)減少前一(yi)次生(sheng)(sheng)長(chang)(chang)培(pei)養(yang)(yang)基(ji)的(de)(de)殘留影響，從而保證得(de)到檢(jian)測(ce)批促(cu)進生(sheng)(sheng)長(chang)(chang)能(neng)力(li)的(de)(de)真實結果。為(wei)(wei)每(mei)一(yi)批次胎牛血(xue)清提供的(de)(de)分(fen)析證明報(bao)告為(wei)(wei)第三(san)次傳(chuan)代(dai)培(pei)養(yang)(yang)每(mei)復式培(pei)養(yang)(yang)瓶細胞數的(de)(de)平均值(zhi)。將檢(jian)測(ce)值(zhi)除以(yi)參考對照值(zhi)得(de)以(yi)歸一(yi)化。

二倍(bei)體(ti)成纖維細(xi)胞(bao)(bao)生長分析(xi)法：培養數代WI-38人類(lei)二倍(bei)體(ti)肺成纖維細(xi)胞(bao)(bao)，計(ji)算每(mei)一代的(de)細(xi)胞(bao)(bao)總數。此項檢測所挑選出的(de)胎牛血清(qing)批號(hao)能(neng)維持難以生長細(xi)胞(bao)(bao)、貼壁性細(xi)胞(bao)(bao)、正常的(de)細(xi)胞(bao)(bao)株生長及(ji)存活。

1．準備含(han)5%檢測(ce)血(xue)清(qing)(qing)或(huo)已驗證合格的(de)參照血(xue)清(qing)(qing)生長(chang)培(pei)養基(ji)，基(ji)礎生長(chang)培(pei)養基(ji)為含(han)L-谷氨酰(xian)胺的(de)HBME：EBME(1：1)。按要求，在(zai)每一(yi)次流量變化和(he)分析過程中進行傳代培(pei)養時需配(pei)制含(han)5%血(xue)清(qing)(qing)生長(chang)的(de)培(pei)養基(ji)。

2．在(zai)(zai)(zai)低代培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)水平(ping)時，將(jiang)(jiang)2X10 5 WI-38細胞(bao)加入各個含9.5毫升生(sheng)長培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)的復(fu)式25-cm 2 培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)中。在(zai)(zai)(zai)不擰(ning)緊瓶(ping)蓋(gai)的情況下(xia)，將(jiang)(jiang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)放入4-6%CO 2， 36℃±2℃環境(jing)中，保持(chi)24小時。然后擰(ning)緊瓶(ping)蓋(gai)，將(jiang)(jiang)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)瓶(ping)放在(zai)(zai)(zai)36℃±2℃下(xia)孵育7天(tian)，在(zai)(zai)(zai)第2天(tian)或第3天(tian)全部更換(huan)培(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)基(ji)。

3．在第(di)7天(tian)，用(yong)胰蛋白酶對每一個含參照(zhao)或檢測(ce)血清(qing)(qing)的復式瓶(ping)中的細胞(bao)進行消化得到一定數(shu)量細胞(bao)，然后合(he)并(bing)并(bing)計數(shu)。將2x10 5 WI-38細胞(bao)加入含有新(xin)鮮生長培養基(已加入了與上一代(dai)同一批次的參照(zhao)或檢測(ce)胎牛血清(qing)(qing))的新(xin)的復式25-cm 2 瓶(ping)中，進行細胞(bao)傳(chuan)代(dai)培養。按第(di)2步所(suo)述，將培養瓶(ping)進行平衡并(bing)孵育。

4．如上所述(shu)經過三代連續分析，在每(mei)(mei)一(yi)代結束時(shi)計算每(mei)(mei)一(yi)批參(can)(can)照或(huo)檢(jian)測(ce)血清(qing)的(de)(de)每(mei)(mei)瓶(ping)細胞(bao)平均(jun)數。zui后一(yi)代培養的(de)(de)各批檢(jian)測(ce)血清(qing)實(shi)驗中的(de)(de)相對(dui)生長率(lv)(RGR)作為(wei)參(can)(can)照血清(qing)實(shi)驗中獲得的(de)(de)細胞(bao)生長率(lv)分子：

%RGR=檢(jian)測血(xue)清(qing)(qing)實(shi)(shi)驗中每瓶平均(jun)細胞數/參照血(xue)清(qing)(qing)實(shi)(shi)驗中每瓶平均(jun)細胞數X100S f9細胞生(sheng)長(chang)促進(jin)分(fen)析。通過昆蟲分(fen)析可以(yi)保證您購買(mai)的(de)(de)(de)胎牛血(xue)清(qing)(qing)批次可以(yi)維持S f9細胞的(de)(de)(de)生(sheng)長(chang)。收到產(chan)品后，您需(xu)要做的(de)(de)(de)就是混(hun)勻血(xue)清(qing)(qing)，在56℃下熱(re)滅活30分(fen)鐘。這(zhe)種分(fen)析法也(ye)可以(yi)用于乳白(bai)(bai)蛋白(bai)(bai)水(shui)解(jie)產(chan)品、酵母和(he)其它生(sheng)長(chang)輔料(liao)作為原(yuan)料(liao)的(de)(de)(de)生(sheng)物效能分(fen)析。該分(fen)析法的(de)(de)(de)準確性取(qu)決于是否用常規的(de)(de)(de)細胞培養方案進(jin)行(xing)培養。用臺盼藍染色排除法測得的(de)(de)(de)細胞活性至少不低于80%。

細胞(bao)生長分析(xi)法。

1．使用含10%檢測或參(can)照熱(re)滅活胎牛血清的已(yi)驗證的Grace昆明培養基(ji)配制*檢測培養基(ji)。

2．將(jiang)儲(chu)備Sf9細(xi)胞加入50毫(hao)升離(li)心管中，在50Xg下離(li)心5分鐘。然后將(jiang)每支試(shi)管的沉淀物重(zhong)新用含10%的檢(jian)測或參照熱滅活胎牛血清(qing)*培養基(ji)配制成懸(xuan)浮液。

3．反試(shi)管(guan)顛倒幾次，然后每支試(shi)管(guan)倒出1毫升樣品(pin)。用臺(tai)盼藍染色排除進(jin)行活(huo)細胞計數。

4．如果活(huo)性≥80%，把(ba)試管再(zai)顛倒(dao)幾次并取出0.25毫升樣(yang)品。然后用Coulter計數器進行細胞計數。

5．將(jiang)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)加入Erlenmeyer瓶中，使其zui終細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)濃(nong)度為2.75X10 5 cells/ml。孵育后，再一次進行細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)計數，以(yi)保證細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)密度為2.5X10 5 至3.0X10 5 cells/ml。

6．將培養瓶放到搖(yao)床上，在27℃±1℃、80-90rpm條件(jian)下孵(fu)育(yu)96小時。

7．從每一(yi)培養(yang)瓶中(zhong)分別取出(chu)0.25毫升樣(yang)品，用Coulter計數器進行計數。同時(shi)取出(chu)一(yi)定量的樣(yang)品進行細胞活性(xing)檢測。

8．將檢測(ce)細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度與參(can)照細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度相比即(ji)可得到相對細(xi)(xi)胞(bao)密(mi)度(RCN)。

噬菌(jun)(jun)體(ti)檢(jian)測:我們利用溶(rong)菌(jun)(jun)斑(ban)分析法(fa)來檢(jian)測是否存在(zai)噬菌(jun)(jun)體(ti)。從每(mei)一批血清中取具代表性的樣(yang)品(pin)加入胰(yi)(yi)蛋(dan)白酶(mei)磷酸瓊脂中，并在(zai)其加入含有噬菌(jun)(jun)體(ti)敏感(gan)的大腸桿菌(jun)(jun)懸浮(fu)液(C-3000或K-12)。然后(hou)，混合物會在(zai)胰(yi)(yi)蛋(dan)白酶(mei)磷酸瓊脂平板上(shang)分層(ceng)，在(zai)36±2℃環(huan)境下孵育約24小時后(hou)，觀(guan)察(cha)平板上(shang)溶(rong)菌(jun)(jun)斑(ban)的形(xing)態。

生化特征檢測(ce)。

血紅(hong)(hong)蛋(dan)白(bai)檢測：所有批次的(de)胎牛血清(qing)我們都進(jin)行了血紅(hong)(hong)蛋(dan)白(bai)的(de)檢測，血紅(hong)(hong)蛋(dan)白(bai)含量低于(yu)《中國生物制品主要原輔(fu)材(cai)料(liao)指(zhi)控(kong)指(zhi)標》(2000年版)公布(bu)的(de)指(zhi)標。

效(xiao)能檢測：其(qi)它血(xue)清

新生(sheng)牛(niu)血清。檢測新生(sheng)牛(niu)血清維(wei)持(chi)超過(guo)三代(dai)(dai)VERO細胞(bao)生(sheng)長的(de)能力。在每(mei)一個培(pei)養期，細胞(bao)都從初始孵育(yu)密度開始傳代(dai)(dai)培(pei)養。可將所得結(jie)果(guo)與使用含有(you)已知(zhi)特征的(de)參照(zhao)血清對照(zhao)生(sheng)長培(pei)養基(ji)獲得的(de)平行結(jie)果(guo)進行比較(jiao)。

馬血(xue)清(qing)。每一批馬血(xue)清(qing)被檢測維持在(zai)含(han)(han)有檢測批血(xue)清(qing)的(de)(de)對照(zhao)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)上Sp2/0-Ag14(小鼠骨髓瘤)細胞生長的(de)(de)能(neng)力。可將所得結果(guo)(guo)與使(shi)用含(han)(han)有已知特征(zheng)的(de)(de)參照(zhao)血(xue)清(qing)對照(zhao)生長培(pei)養(yang)基(ji)(ji)獲得的(de)(de)平行(xing)結果(guo)(guo)進行(xing)比(bi)較。

血(xue)清的使用(yong)與(yu)儲存：正確的使用(yong)及保存血(xue)清，才能使血(xue)清發揮應(ying)有的作用(yong)。

1. 儲(chu)存條件：血清一般儲(chu)存于－20℃，同時應避免反復(fu)凍融。購買大(da)包裝的血清后，首先要滅活處理，然后分裝成小包裝，儲(chu)存于－20℃，使(shi)用前(qian)融化(hua)(hua)。融化(hua)(hua)時先置于4℃。融化(hua)(hua)后的血清在(zai)4℃不宜(yi)長(chang)時間存放，應盡快使(shi)用。

2. 使(shi)用(yong)濃(nong)度：自(zi)從有了合成培(pei)(pei)養(yang)基，血清就是(shi)(shi)作為一(yi)(yi)種添(tian)加成分與合成培(pei)(pei)養(yang)基混合使(shi)用(yong)，使(shi)用(yong)濃(nong)度一(yi)(yi)般為5－20％，zui常用(yong)是(shi)(shi)10％。過多血清容易使(shi)培(pei)(pei)養(yang)中的細胞發生(sheng)變化，特別是(shi)(shi)一(yi)(yi)些(xie)二倍體的無限細胞系，迅速(su)生(sheng)長(chang)之后容易發生(sheng)惡(e)性轉化。

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關于使用(yong)中的常見問題

1.保(bao)存(cun)血清的辦(ban)法？
我們建議血清應保存在-5℃至-20℃。若你一次無法用完一瓶(ping)，建議您無菌分裝血清至恰當的滅菌容器內(nei)，再放(fang)回冷(leng)凍。

2.如(ru)何解凍(dong)血清才不會使產(chan)品質(zhi)量受損？
我們建議您(nin)將血清從冷凍箱中(zhong)取出后，先置于2-8℃冰箱中(zhong)使之溶(rong)解，然后在室溫下使之全溶(rong)。但必須(xu)注意的是，溶(rong)解過程中(zhong)必須(xu)規則地搖晃(huang)均勻。

3.血清(qing)解凍后發現有絮狀(zhuang)沉淀(dian)物出現，該如何處理？
血(xue)(xue)清(qing)中沉(chen)淀物的(de)(de)出現有許多(duo)原(yuan)因(yin)，但(dan)zui普遍的(de)(de)原(yuan)因(yin)是(shi)由于(yu)血(xue)(xue)清(qing)中脂蛋(dan)白的(de)(de)變性(xing)造成(cheng)的(de)(de)；而血(xue)(xue)纖維蛋(dan)白(形成(cheng)凝血(xue)(xue)的(de)(de)蛋(dan)白之一)在血(xue)(xue)清(qing)解凍(dong)后，也會存在于(yu)血(xue)(xue)清(qing)中，亦是(shi)造成(cheng)血(xue)(xue)清(qing)沉(chen)淀物的(de)(de)主要原(yuan)因(yin)之一。但(dan)這些絮狀(zhuang)沉(chen)淀物，并不影響血(xue)(xue)清(qing)本(ben)身的(de)(de)質(zhi)量。
若您欲去除這(zhe)些絮狀沉淀(dian)物，可以(yi)(yi)將血清分裝至無菌離心(xin)管中(zhong)，以(yi)(yi)400g稍微離心(xin)，上(shang)清液即可接著加入培養基內一起(qi)過濾(lv)。我(wo)們不建議您以(yi)(yi)過濾(lv)的方法去除這(zhe)些絮狀沉淀(dian)物，因為(wei)它可能會阻(zu)塞您的過濾(lv)膜。

4.何謂熱滅活(huo)？有必(bi)要(yao)做熱滅活(huo)嗎(ma)？
一般以(yi)56℃，30分鐘水浴(yu)來處理(li)已解凍的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)，因(yin)為此加熱步驟，可(ke)以(yi)使補體(ti)去活(huo)性(xing)，而補體(ti)所參(can)與的(de)(de)(de)(de)(de)反應有：溶細(xi)胞(bao)活(huo)性(xing)，平滑肌的(de)(de)(de)(de)(de)收縮，肥(fei)大(da)細(xi)胞(bao)和血(xue)小板組胺的(de)(de)(de)(de)(de)釋放，增(zeng)強吞(tun)噬作(zuo)(zuo)用(yong)，淋巴細(xi)胞(bao)、巨(ju)噬細(xi)胞(bao)的(de)(de)(de)(de)(de)趨化和激活(huo)。實(shi)驗顯示，經過(guo)正確處理(li)的(de)(de)(de)(de)(de)熱滅活(huo)血(xue)清(qing)(qing)，對(dui)大(da)多數的(de)(de)(de)(de)(de)細(xi)胞(bao)而言是不(bu)需要的(de)(de)(de)(de)(de)。經過(guo)處理(li)的(de)(de)(de)(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)對(dui)細(xi)胞(bao)生長(chang)只(zhi)有微小的(de)(de)(de)(de)(de)促進，或*沒有任何作(zuo)(zuo)用(yong)，甚至通常因(yin)為高溫處理(li)影響了血(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)(de)(de)(de)質(zhi)量(liang)，而造成細(xi)胞(bao)生長(chang)速率(lv)的(de)(de)(de)(de)(de)降低。
而經過熱處理的(de)(de)血(xue)(xue)(xue)清(qing)，沉(chen)淀物(wu)(wu)的(de)(de)形成會(hui)顯著(zhu)的(de)(de)增多(duo)(duo)，這(zhe)些沉(chen)淀物(wu)(wu)在(zai)倒置(zhi)顯微鏡下觀察，像(xiang)是“小黑點”，常常會(hui)讓研(yan)究(jiu)者(zhe)誤以為是血(xue)(xue)(xue)清(qing)遭受污(wu)染，而把血(xue)(xue)(xue)清(qing)放(fang)在(zai)37℃環(huan)境(jing)中，又會(hui)使(shi)(shi)此沉(chen)淀物(wu)(wu)更增多(duo)(duo)，使(shi)(shi)研(yan)究(jiu)者(zhe)認為是微生物(wu)(wu)的(de)(de)分裂擴增。因此我們(men)建議(yi)您(nin)(nin)，若非必須，您(nin)(nin)可以不需要做熱滅活(huo)這(zhe)一步。如此以來，不但節省您(nin)(nin)寶貴的(de)(de)時間，更確保您(nin)(nin)血(xue)(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)質(zhi)量(liang)！

5.如何避免沉淀物的出(chu)現？
我們建議您在使用血清的(de)時(shi)候，注意正確的(de)血清解凍步(bu)驟，并盡量避免滅(mie)活血清及長(chang)時(shi)間(jian)的(de)將血清置(zhi)于(yu)高溫(wen)環境中(zhong)。

胎(tai)牛(niu)血(xue)清(qing)(qing)，小牛(niu)血(xue)清(qing)(qing)和新生牛(niu)血(xue)清(qing)(qing)三種之(zhi)間的區別：

這三種血(xue)清(qing)(qing)的(de)(de)(de)成(cheng)份，總體(ti)沒有(you)(you)(you)什么明(ming)顯差(cha)別，只是有(you)(you)(you)一(yi)些(xie)成(cheng)分與其生存環(huan)境有(you)(you)(you)關，如上述有(you)(you)(you)人說的(de)(de)(de)抗體(ti)等很少。此外(wai)，因生長發育的(de)(de)(de)需要(yao)，有(you)(you)(you)些(xie)成(cheng)分在小(xiao)牛(niu)(niu)出(chu)生后會發生一(yi)些(xie)變化。不過還沒有(you)(you)(you)搞清(qing)(qing)楚它(ta)與其它(ta)的(de)(de)(de)血(xue)清(qing)(qing)之間的(de)(de)(de)差(cha)別。有(you)(you)(you)一(yi)點(dian)可以肯定，胎牛(niu)(niu)血(xue)清(qing)(qing)中的(de)(de)(de)部分功能蛋白與小(xiao)牛(niu)(niu)血(xue)清(qing)(qing)中的(de)(de)(de)含量(liang)有(you)(you)(you)差(cha)別。

胎牛本身(shen)生(sheng)活在一個潔凈環境當中，其血清與外界(jie)隔絕，只要(yao)生(sheng)產工藝科學規范，其質量肯定要(yao)新生(sheng)牛和小牛要(yao)好。

血清(qing)是血漿去除(chu)纖維蛋(dan)白而(er)形成(cheng)(cheng)的一(yi)種(zhong)很復(fu)雜的混合物(wu)，其組成(cheng)(cheng)成(cheng)(cheng)份雖(sui)大(da)部(bu)分已知，但(dan)還有一(yi)部(bu)分尚不清(qing)楚，且血清(qing)組成(cheng)(cheng)及(ji)含量常(chang)隨供血動物(wu)的性(xing)別、年齡、生(sheng)(sheng)理條(tiao)件(jian)和(he)營(ying)養(yang)條(tiao)件(jian)不同而(er)異。血清(qing)中(zhong)含有各種(zhong)血漿蛋(dan)白、多肽、脂肪(fang)、碳水化(hua)合物(wu)、生(sheng)(sheng)長因子、激(ji)素、無(wu)機物(wu)等，這(zhe)些(xie)物(wu)質(zhi)對促進細(xi)胞生(sheng)(sheng)長或抑制生(sheng)(sheng)長活性(xing)是達到生(sheng)(sheng)理平衡的。對血清(qing)的成(cheng)(cheng)分和(he)作(zuo)用的研究雖(sui)有很大(da)進展，但(dan)仍存在一(yi)些(xie)問(wen)題。

胎牛血(xue)清(qing)是(shi)品(pin)質zui高的，因為(wei)胎牛還未接觸(chu)外界，血(xue)清(qing)中(zhong)所(suo)含的抗體(ti)、補體(ti)等(deng)對細胞有(you)害(hai)的成(cheng)分zui少(shao)。

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10828-028 gibco 無血清培養(yang)基 500ml 美國 用于細(xi)胞的以制(zhi)備單克隆抗體(ti)，病毒抗原(yuan)和重組蛋白等(deng) 詢價(jia)

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C11885500BT gibco DMEM 低糖培養基 500ml 國產 含1000mg/L D-葡(pu)萄(tao)糖、L-谷氨酰胺、110mg/L丙(bing)酮酸鈉和酚紅，不(bu)含HEPES緩沖液 詢價(jia)

C11960500BT gibco DMEM 高糖培養基 500ml 國(guo)產(chan) 含(han)4500mg/L D-葡萄糖和酚紅，不含(han)L-谷氨(an)酰胺、丙酮酸鈉和HEPES緩(huan)沖液 詢價

C11965500BT gibco 500ml 國產 含4500mg/L D-葡萄糖、L-谷氨酰胺和酚紅，不(bu)含丙酮酸鈉(na)和HEPES緩沖液 詢價

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C11875500BT gibco RPMI 1640培(pei)養基 500ml 國產 含L-谷氨酰(xian)胺和酚紅(hong),不含HEPES緩沖(chong)液(ye) 詢價(jia)

C22400500BT gibco 500ml 國產 含(han)25mM HEPES緩(huan)沖(chong)液(ye)、L-谷氨酰(xian)胺和酚紅 詢價

C11095500BT gibco MEM EARLES培養基 500ml 國(guo)產(chan) 含Earle's平(ping)衡鹽、L-谷氨酰胺(an)和酚紅(hong)，不含HEPES緩沖液 詢價

C11330500BT gibco DMEM /F12 500ml 國產 1:1，含15mM HEPES緩沖液、L-谷氨酰胺和酚紅 詢價(jia)

C12571500BT gibco MEM ALPHA 500ml 國產 含L-谷氨(an)酰胺、核(he)苷、脫氧(yang)核(he)苷和酚紅 詢(xun)價

C14190500BT gibco DPBS 500ml 國產(chan) 1X,不含氯化(hua)鈣(gai)、氯化(hua)鎂和酚紅(hong) 詢價

C10010500BT gibco PBS 7.4 (1X) 500ml 國產 1X,不含氯化鈣(gai)、氯化鎂和酚紅，細(xi)胞培養級 詢價

C20012500BT gibco PBS 7.2 (1X) 500ml 國產(chan) 1X,不含(han)氯(lv)化鈣、氯(lv)化鎂和(he)酚紅，細(xi)胞(bao)培養(yang)級 詢價

SH30022.01 Hyclone DMEM高糖培養(yang)基 500ML 國產(chan) 含4.0 mM L-谷(gu)氨酰胺，不含丙酮酸鈉。

SH30809.01 Hyclone 1640培(pei)養基 500ML 國(guo)產

SH30022.01 DMEM高糖液體培養(yang)基 DMEM HyClone 500ml

SH30809.01 1640液體(ti)培養基 1640 HyClone 500ml

SH30021.01 DMEM低糖液體(ti)培養基(ji) DMEM HyClone 500ml

SH30023.01 DMEM/F12(1:1)液體培養基 DMEM/F12(1:1) HyClone 500ml

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SH30256.01 PBS緩沖(chong)液 PBS HyClone 500ml

SH30265.01 α-MEM液體培養基(ji) α-MEM HyClone 500ml

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