MCM細胞|小鼠(shu)心肌(ji)細胞 培(pei)養(yang)

產品名稱(cheng)：MCM細胞

中(zhong)文名稱：小鼠心肌細(xi)胞(bao)

生長狀態(tai)：貼(tie)壁生長

培養條件：DMEM（高糖） +10% 德國SERANA胎牛血清（建議）

MCM細胞|小鼠心肌(ji)細胞 培(pei)養

慧穎(ying)生物公司專業(ye)提供美國ATCC細(xi)胞(bao)庫來源正常細(xi)胞(bao)系、腫瘤細(xi)胞(bao)系、癌細(xi)胞(bao)系（三千多種），提供細(xi)胞(bao)株(zhu)生物體、生長特性、來源、器官(guan)、類型、形態、培養(yang)條件、應用、系、疾病、組(zu)織、凍存條件等復(fu)蘇(su)及(ji)凍存說明書信息(xi)，我們擁有豐(feng)富的(de)細(xi)胞(bao)系培養(yang)經驗，能(neng)提供細(xi)胞(bao)培養(yang)*的(de)，讓您(nin)實驗再無(wu)煩擾！

1、收(shou)到細胞，請查看瓶子是(shi)否有破裂，培養(yang)基是(shi)否漏出，是(shi)否渾濁，如有請盡快。

2、收到細(xi)胞(bao)，如包裝(zhuang)完好，請(qing)在(zai)顯微(wei)鏡(jing)(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)細(xi)胞(bao)。,由于運輸過程中的(de)(de)問題(ti)，細(xi)胞(bao)培(pei)養瓶(ping)中的(de)(de)貼壁細(xi)胞(bao)有可(ke)能從瓶(ping)壁中脫落下(xia)來，顯微(wei)鏡(jing)(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)會出現細(xi)胞(bao)懸浮的(de)(de)情況，出現此(ci)狀(zhuang)態(tai)時，請(qing)不(bu)要打(da)開細(xi)胞(bao)培(pei)養瓶(ping)，先不(bu)要把培(pei)養基吸出來。應(ying)立即將培(pei)養瓶(ping)置于細(xi)胞(bao)培(pei)養箱里(li)靜止(zhi)3-5小時左右，讓(rang)細(xi)胞(bao)先穩(wen)定下(xia)，再于顯微(wei)鏡(jing)(jing)下(xia)觀(guan)察(cha)，此(ci)時多數細(xi)胞(bao)會重新貼附于瓶(ping)壁。如細(xi)胞(bao)仍不(bu)能貼壁，請(qing)用臺盼(pan)藍染色(se)法鑒定細(xi)胞(bao)活力(li)，如臺盼(pan)藍染色(se)證實細(xi)胞(bao)活力(li)正常請(qing)按懸浮細(xi)胞(bao)的(de)(de)方法處理(li)

3. 收(shou)到(dao)細(xi)(xi)(xi)胞時(shi)如無異常(chang)情(qing)況 ，請在顯微(wei)鏡下觀察細(xi)(xi)(xi)胞密(mi)度，如為貼壁細(xi)(xi)(xi)胞，未超(chao)(chao)過80%匯合(he)度時(shi)，用(yong)(yong)75%酒精(jing)（建議配置75%酒精(jing)的(de)水也是滅菌(jun)超(chao)(chao)純水。噴灑整個瓶消(xiao)毒后(hou)放(fang)到(dao)超(chao)(chao)菌(jun)臺內，嚴格無菌(jun)操作：然(ran)后(hou)打開蓋子，先用(yong)(yong)槍頭把培(pei)養(yang)基吸出(chu)10ML左(zuo)右，放(fang)在離心管(guan)里，然(ran)后(hou)瓶口過火，（嚴禁直接傾倒），這樣可以保證(zheng)不(bu)污染，再用(yong)(yong)10ML的(de)移液管(guan)，將剩余的(de)培(pei)養(yang)基全(quan)部(bu)吸出(chu)，放(fang)于(yu)離心管(guan)中(zhong)，培(pei)養(yang)瓶中(zhong)只剩余5-10ML左(zuo)右培(pei)養(yang)液繼續培(pei)養(yang)就可以了）：超(chao)(chao)過80%匯合(he)度時(shi)，請按細(xi)(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)條(tiao)件(jian)傳代培(pei)養(yang)。

如為懸(xuan)浮細(xi)胞，吸(xi)出培養液，1000轉/分鐘離(li)心(xin)3-5分鐘，吸(xi)出上清，管(guan)底細(xi)胞用新(xin)鮮培養基懸(xuan)浮細(xi)胞后移回培養瓶。

4，將(jiang)培(pei)(pei)養瓶置于(yu)37℃培(pei)(pei)養箱(xiang)中培(pei)(pei)養，蓋子(zi)微微擰松。吸出的培(pei)(pei)養基(ji)可以保(bao)存(cun)在滅(mie)菌過的瓶子(zi)里，存(cun)放于(yu)4℃冰箱(xiang)，以備(bei)不(bu)(bu)時之需(xu)。第二(er)天換液時，要(yao)配制新鮮的培(pei)(pei)養基(ji)和進口胎牛血清。這(zhe)樣對細胞生長(chang)更好。不(bu)(bu)要(yao)再用(yong)我們原瓶的培(pei)(pei)養基(ji)了(le)。

5 、24小時后，細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)形態已恢復并(bing)貼滿瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)(bi)(bi)，就(jiu)可(ke)(ke)以傳代了。（貼壁(bi)(bi)(bi)(bi)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)）將培(pei)(pei)養瓶(ping)(ping)里的(de)培(pei)(pei)養基倒(dao)去(qu)，加(jia)(jia)(jia)3-5ml（以能覆蓋細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)生(sheng)(sheng)長面為(wei)(wei)(wei)準）PBS或Hanks’液(ye)(ye)洗滌(di)后棄去(qu)。加(jia)(jia)(jia)0.5-1ml  0.25%含EDTA的(de)胰酶消化(hua)(hua)，消化(hua)(hua)時間(jian)以具體細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)為(wei)(wei)(wei)準，一般1-3分(fen)(fen)鐘，不超過5分(fen)(fen)鐘。可(ke)(ke)以放入(ru)37℃培(pei)(pei)養箱消化(hua)(hua)。輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)晃動瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)(bi)(bi)，見細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)脫落下(xia)來，加(jia)(jia)(jia)入(ru)3-5ml培(pei)(pei)養基終止消化(hua)(hua)。用(yong)(yong)移液(ye)(ye)管(guan)(guan)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打(da)瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)(bi)(bi)上的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)，使之*脫落，然后將溶液(ye)(ye)吸入(ru)離(li)心(xin)管(guan)(guan)內離(li)心(xin)，1000rpm/5min。棄上清，視細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)數量決定分(fen)(fen)瓶(ping)(ping)數，一般一傳二(er)，如(ru)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)量多可(ke)(ke)一傳三，有(you)些(xie)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)不易(yi)傳得(de)過稀，有(you)些(xie)生(sheng)(sheng)長較快的(de)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)則可(ke)(ke)以多傳幾瓶(ping)(ping)，以具體細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)和經(jing)驗(yan)為(wei)(wei)(wei)準。（懸浮(fu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞(bao)）用(yong)(yong)移液(ye)(ye)管(guan)(guan)輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹打(da)瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)(bi)(bi)，直接(jie)將溶液(ye)(ye)吸入(ru)離(li)心(xin)管(guan)(guan)離(li)心(xin)即可(ke)(ke)。

6，貼壁細(xi)(xi)胞 ，懸浮細(xi)(xi)胞。嚴格無菌操作(zuo)。換(huan)液時(shi)，換(huan)新的(de)細(xi)(xi)胞培(pei)養(yang)瓶和換(huan)新鮮(xian)的(de)培(pei)養(yang)液和進口胎牛血(xue)清，37度    5%CO2 培(pei)養(yang)

7.  收到(dao)(dao)細(xi)(xi)胞(bao)后，請(qing)鏡下觀察細(xi)(xi)胞(bao)，用恰當方式處理細(xi)(xi)胞(bao)。若(ruo)懸(xuan)浮的(de)細(xi)(xi)胞(bao)較多，請(qing)離心收集細(xi)(xi)胞(bao)，接種到(dao)(dao)一(yi)個(ge)新(xin)的(de)培養(yang)瓶中。棄掉原液，使用新(xin)鮮配制(zhi)的(de)培養(yang)基(ji)，使用進口(kou)胎牛血清(qing). 剛接到(dao)(dao)細(xi)(xi)胞(bao)，若(ruo)細(xi)(xi)胞(bao)不多時 血清(qing)濃(nong)度可(ke)以(yi)加到(dao)(dao)15％去培養(yang)。若(ruo)細(xi)(xi)胞(bao)迏到(dao)(dao)80%左右 ，血清(qing)濃(nong)度還是(shi)在10％。

胎牛血清|ELISA試(shi)(shi)劑(ji)盒(he)|抗原抗體(ti)|培養基|雙(shuang)抗|胰酶|無外(wai)泌體(ti)血清|細胞株細胞系|默克試(shi)(shi)劑(ji)盒(he)|Sigma試(shi)(shi)劑(ji)|生(sheng)化試(shi)(shi)劑(ji)|染色劑(ji)|GE填料|BSA ………..盡在(zai)慧穎生(sheng)物 （）

MCM細(xi)胞|小鼠(shu)心肌細(xi)胞 培(pei)養 細胞培養(yang)條件(jian)

1，1640培養基（GIBCO,貨號11875093） +10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.。貨號。15630-080)

2,DMEM高糖培養基（GIBCO,貨號11995065）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉1,HEPES(gibco.。貨號。15630-080)

3,E,MEM培養基（GIBCO,貨號11095080）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉）

4，F12K培養基 （GIBCO,貨號(hao)11765054）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

5，McCoy's 5a培養基（GIBCO,貨號16600082）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

6 . L 15培養基（Hyclone,貨號SH30525.01）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

7. DMEM/F12培養基（GIBCO,貨號(hao)11330032）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

8. IMDM培養基（GIBCO,貨號C12440500BT）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號(hao)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

2, L-G(L-谷氨酸(suan)胺)。L-Glutamine 200mM  (GIBCO。貨號25030-081)

3,NEAA(非必需(xu)氨基酸).(GIBCO。貨(huo)號11140-050)

4..sodium.pyruvate  (GIBCO。貨號11360-070)  

100ML 1640*培養基配法
1640培養基   86ML 

 FBS 血清        10ML      

 L-谷氨酸胺。100X  1ML
丙酮酸鈉  100X        1ML

HEPES(1M) 10mM  1ML  

抗(kang)菌素（青(qing)、鏈霉素） 1ML