MPC細(xi)胞|小鼠垂體(ti)細(xi)胞培養

產品名稱：MPC細胞

中文名(ming)稱：小(xiao)鼠垂體細胞

生長(chang)狀態(tai)：貼(tie)壁生長(chang)

培(pei)養條件：DMEM（高糖） +10% 德國SERANA胎牛血(xue)清（建議）

MPC細胞|小鼠垂體(ti)細胞培(pei)養

慧穎生(sheng)物公司專(zhuan)業提(ti)供(gong)美國ATCC細(xi)(xi)(xi)胞(bao)庫來源正常細(xi)(xi)(xi)胞(bao)系、腫瘤(liu)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)系、癌細(xi)(xi)(xi)胞(bao)系（三千多(duo)種），提(ti)供(gong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)株(zhu)生(sheng)(sheng)物(wu)體(ti)(ti)、生(sheng)(sheng)長(chang)特性、來源、器(qi)官、類型、形態(tai)、培養條(tiao)件(jian)、應用、系、疾(ji)病、組織(zhi)、凍(dong)存條(tiao)件(jian)等(deng)復蘇及凍(dong)存說明書信息，我(wo)們(men)擁有豐(feng)富的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)系培養經驗，能(neng)提(ti)供(gong)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)培養*的，讓(rang)您實(shi)驗再無煩擾(rao)！

1、收(shou)到細胞，請查看瓶子(zi)是(shi)(shi)否有(you)破裂，培養基是(shi)(shi)否漏(lou)出，是(shi)(shi)否渾濁，如有(you)請盡快(kuai)。

2、收到細(xi)(xi)胞(bao)，如包(bao)裝完好，請(qing)(qing)在顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察細(xi)(xi)胞(bao)。,由于運輸過程(cheng)中(zhong)的問題，細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶中(zhong)的貼壁(bi)細(xi)(xi)胞(bao)有可能從瓶壁(bi)中(zhong)脫落下(xia)來，顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察會出現細(xi)(xi)胞(bao)懸(xuan)浮的情況(kuang)，出現此(ci)狀(zhuang)態時(shi)，請(qing)(qing)不要打開細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)瓶，先不要把培(pei)養(yang)(yang)基吸出來。應立即將培(pei)養(yang)(yang)瓶置(zhi)于細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)(yang)箱里(li)靜(jing)止3-5小時(shi)左右，讓細(xi)(xi)胞(bao)先穩定下(xia)，再于顯微鏡(jing)下(xia)觀(guan)察，此(ci)時(shi)多數細(xi)(xi)胞(bao)會重(zhong)新貼附于瓶壁(bi)。如細(xi)(xi)胞(bao)仍(reng)不能貼壁(bi)，請(qing)(qing)用臺(tai)(tai)盼藍(lan)染色法鑒定細(xi)(xi)胞(bao)活(huo)力，如臺(tai)(tai)盼藍(lan)染色證實(shi)細(xi)(xi)胞(bao)活(huo)力正(zheng)常請(qing)(qing)按懸(xuan)浮細(xi)(xi)胞(bao)的方法處理(li)

3. 收到細(xi)胞(bao)時(shi)如(ru)無異常情況 ，請在顯(xian)微(wei)鏡(jing)下觀察(cha)細(xi)胞(bao)密度，如(ru)為貼壁(bi)細(xi)胞(bao)，未(wei)超過(guo)80%匯合(he)度時(shi)，用75%酒(jiu)精（建(jian)議(yi)配置75%酒(jiu)精的水也是滅(mie)菌超純水。噴灑(sa)整個(ge)瓶消毒(du)后(hou)放到超菌臺內，嚴格(ge)無菌操作(zuo)：然(ran)后(hou)打開蓋子，先(xian)用槍(qiang)頭(tou)把(ba)培(pei)(pei)養基(ji)吸出10ML左(zuo)右(you)，放在離(li)心(xin)(xin)管(guan)(guan)里，然(ran)后(hou)瓶口過(guo)火，（嚴禁直接傾(qing)倒），這(zhe)樣可(ke)以保(bao)證不(bu)污染，再用10ML的移液(ye)管(guan)(guan)，將剩余的培(pei)(pei)養基(ji)全(quan)部吸出，放于離(li)心(xin)(xin)管(guan)(guan)中，培(pei)(pei)養瓶中只剩余5-10ML左(zuo)右(you)培(pei)(pei)養液(ye)繼續培(pei)(pei)養就可(ke)以了(le)）：超過(guo)80%匯合(he)度時(shi)，請按細(xi)胞(bao)培(pei)(pei)養條件(jian)傳代培(pei)(pei)養。

如為懸(xuan)浮細(xi)胞，吸出培養(yang)液，1000轉(zhuan)/分(fen)(fen)鐘(zhong)離心3-5分(fen)(fen)鐘(zhong)，吸出上清，管底細(xi)胞用新鮮(xian)培養(yang)基懸(xuan)浮細(xi)胞后移回培養(yang)瓶。

4，將培(pei)養(yang)瓶置于37℃培(pei)養(yang)箱(xiang)中培(pei)養(yang)，蓋子微(wei)微(wei)擰(ning)松。吸(xi)出的(de)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)可以保存在滅菌過的(de)瓶子里，存放于4℃冰箱(xiang)，以備不時(shi)之需。第(di)二天換(huan)液時(shi)，要(yao)配(pei)制新鮮的(de)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)和進(jin)口胎牛血清。這樣對細胞生長(chang)更(geng)好。不要(yao)再用(yong)我們原瓶的(de)培(pei)養(yang)基(ji)(ji)了。

5 、24小時(shi)后(hou)，細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)形(xing)態(tai)已恢復并貼滿瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)，就可(ke)(ke)以(yi)(yi)傳代了。（貼壁(bi)(bi)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)）將培養(yang)瓶(ping)(ping)里的培養(yang)基倒去，加(jia)3-5ml（以(yi)(yi)能覆蓋細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)生長面為準）PBS或Hanks’液(ye)洗(xi)滌后(hou)棄去。加(jia)0.5-1ml  0.25%含EDTA的胰酶消(xiao)化(hua)，消(xiao)化(hua)時(shi)間以(yi)(yi)具(ju)體細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)為準，一般(ban)1-3分鐘(zhong)，不超過(guo)5分鐘(zhong)。可(ke)(ke)以(yi)(yi)放入(ru)(ru)37℃培養(yang)箱消(xiao)化(hua)。輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)晃動瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)，見細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)脫(tuo)落下來，加(jia)入(ru)(ru)3-5ml培養(yang)基終止消(xiao)化(hua)。用移液(ye)管輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打(da)瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)上(shang)的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)，使(shi)之(zhi)*脫(tuo)落，然后(hou)將溶液(ye)吸入(ru)(ru)離(li)(li)心(xin)管內離(li)(li)心(xin)，1000rpm/5min。棄上(shang)清，視細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)數量(liang)決定分瓶(ping)(ping)數，一般(ban)一傳二，如細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)量(liang)多可(ke)(ke)一傳三，有些(xie)(xie)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)不易(yi)傳得過(guo)稀，有些(xie)(xie)生長較快的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)則可(ke)(ke)以(yi)(yi)多傳幾瓶(ping)(ping)，以(yi)(yi)具(ju)體細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)和經驗為準。（懸浮細(xi)(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)(bao)）用移液(ye)管輕(qing)(qing)輕(qing)(qing)吹(chui)打(da)瓶(ping)(ping)壁(bi)(bi)，直接將溶液(ye)吸入(ru)(ru)離(li)(li)心(xin)管離(li)(li)心(xin)即可(ke)(ke)。

6，貼壁細胞(bao) ，懸浮細胞(bao)。嚴格無菌(jun)操作。換(huan)液時，換(huan)新(xin)的(de)細胞(bao)培養瓶和換(huan)新(xin)鮮的(de)培養液和進口胎牛血清，37度    5%CO2 培養

7.  收到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)后，請鏡下觀察細(xi)胞(bao)(bao)，用(yong)恰(qia)當(dang)方式(shi)處理細(xi)胞(bao)(bao)。若懸浮的(de)(de)細(xi)胞(bao)(bao)較多，請離心收集細(xi)胞(bao)(bao)，接(jie)種到(dao)一個新的(de)(de)培養(yang)(yang)瓶中。棄(qi)掉原液，使(shi)用(yong)新鮮配制的(de)(de)培養(yang)(yang)基，使(shi)用(yong)進口(kou)胎(tai)牛(niu)血(xue)清. 剛接(jie)到(dao)細(xi)胞(bao)(bao)，若細(xi)胞(bao)(bao)不多時 血(xue)清濃度(du)可以加到(dao)15％去(qu)培養(yang)(yang)。若細(xi)胞(bao)(bao)迏到(dao)80%左右 ，血(xue)清濃度(du)還是在(zai)10％。

胎牛血(xue)清|ELISA試(shi)劑(ji)盒(he)|抗(kang)原抗(kang)體(ti)|培(pei)養基|雙(shuang)抗(kang)|胰酶|無外泌體(ti)血(xue)清|細(xi)胞株細(xi)胞系|默克試(shi)劑(ji)盒(he)|Sigma試(shi)劑(ji)|生化試(shi)劑(ji)|染色劑(ji)|GE填料|BSA ………..盡(jin)在慧穎生物 （）

MPC細胞|小鼠垂(chui)體(ti)細胞培養 細胞培養條件

1，1640培養基（GIBCO,貨號11875093） +10%進口胎牛血清（GIBCO,貨(huo)號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酰胺)+1mM  Sodium pyruvate+10mM   HEPES(gibco.。貨號。15630-080)

2,DMEM高糖培養基（GIBCO,貨號11995065）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+4mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉1,HEPES(gibco.。貨號。15630-080)

3,E,MEM培養基（GIBCO,貨號11095080）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+NEAA(非必需氨基酸)+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)+1mM （丙酮酸鈉）

4，F12K培養基 （GIBCO,貨號11765054）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+2mM  L-G(L-谷氨酸胺)

5，McCoy's 5a培養基（GIBCO,貨號16600082）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨(huo)號(hao)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

6 . L 15培養基（Hyclone,貨號SH30525.01）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨(huo)號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

7. DMEM/F12培養基（GIBCO,貨(huo)號11330032）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

8. IMDM培養基（GIBCO,貨號C12440500BT）+10%進口胎牛血清（GIBCO,貨號(hao)10099141）+1.5mM  L-G(L-谷氨酸胺)

2, L-G(L-谷氨酸胺(an))。L-Glutamine 200mM  (GIBCO。貨號(hao)25030-081)

3,NEAA(非(fei)必需(xu)氨基(ji)酸).(GIBCO。貨號(hao)11140-050)

4..sodium.pyruvate  (GIBCO。貨號(hao)11360-070)  

100ML 1640*培養基配法
1640培養基   86ML 

 FBS 血清        10ML      

 L-谷氨酸胺。100X  1ML
丙酮酸鈉  100X        1ML

HEPES(1M) 10mM  1ML  

抗菌(jun)素（青、鏈霉素） 1ML