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HGC27細胞|人胃癌細胞|STR入庫
產品名稱(cheng):HGC27細胞
中文名(ming)稱:人胃癌細胞
是(shi)否(fou)STR:是(shi)
供應公司:慧穎生物
復蘇周期:1-2周
您是否(fou)在關心各(ge)種細(xi)(xi)胞系特異性鑒定方法(fa),是否(fou)被細(xi)(xi)菌,病(bing)毒,支原體污染(ran),購買(mai)慧(hui)穎生物(wu)細(xi)(xi)胞株細(xi)(xi)胞系值得放(fang)心,大部分細(xi)(xi)胞經過(guo)STR鑒定,支原體,細(xi)(xi)菌,病(bing)毒檢測后入庫。!
分離培養法
分(fen)(fen)離培養法(fa)(fa)是(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢測(ce)的金(jin)標(biao)方法(fa)(fa),其檢測(ce)精確度zui高(gao)。這種(zhong)方法(fa)(fa)是(shi)從可(ke)(ke)疑的細(xi)胞培養體(ti)系(xi)中(zhong)(zhong)取(qu)樣(yang),并接(jie)種(zhong)到zui適(shi)宜支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)生長(chang)的瓊脂平(ping)板(ban)上。如(ru)果樣(yang)本(ben)中(zhong)(zhong)含有支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti),它(ta)們(men)就會在這種(zhong)瓊脂平(ping)板(ban)上*生長(chang),zui終(zhong)形(xing)成明顯可(ke)(ke)見的特征(zheng)性菌落。分(fen)(fen)離培養法(fa)(fa)基本(ben)不(bu)會出(chu)現假陰(yin)性結(jie)果,因此被譽為支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢測(ce)金(jin)標(biao)準。不(bu)過分(fen)(fen)離培養法(fa)(fa)也(ye)存在兩(liang)個弊(bi)端,一(yi)是(shi)檢測(ce)時(shi)(shi)間太長(chang),支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)要(yao)長(chang)出(chu)明顯克隆(long)至少需要(yao)4周時(shi)(shi)間。二(er)是(shi)盡管可(ke)(ke)以檢測(ce)絕大多(duo)數支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)種(zhong)類,分(fen)(fen)離培養法(fa)(fa)也(ye)有力(li)所不(bu)及的時(shi)(shi)候,例如(ru)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)M. hyorhinis。
DNA檢測(ce)
DNA檢測(ce)需(xu)要(yao)(yao)將可(ke)疑(yi)樣(yang)品與指(zhi)示細(xi)(xi)胞(bao)共同(tong)培養,因此一(yi)般需(xu)要(yao)(yao)幾天(tian)時(shi)間。DNA檢測(ce)所(suo)用的指(zhi)示細(xi)(xi)胞(bao)通常是細(xi)(xi)胞(bao)質(zhi)區域(yu)較大(da)的Vero細(xi)(xi)胞(bao),如(ru)果原樣(yang)本中含(han)有支(zhi)原體(ti),那么當細(xi)(xi)胞(bao)DNA被熒(ying)光染料(如(ru)Hoechst染料)染色(se)時(shi),就可(ke)以在(zai)指(zhi)示細(xi)(xi)胞(bao)的核周(zhou)圍觀察到熒(ying)光斑點或(huo)熒(ying)光顆粒。分離培養法用來(lai)(lai)檢測(ce)支(zhi)原體(ti)M. hyorhinis菌株并不可(ke)靠,而(er)DNA法可(ke)以準確的將其檢測(ce)出(chu)來(lai)(lai)。
PCR法(fa)
PCR法(fa)(fa)也(ye)(ye)可(ke)以檢(jian)(jian)測(ce)(ce)M. hyorhinis菌株,PCR法(fa)(fa)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)支(zhi)原(yuan)體(ti)只需幾(ji)個小時(shi),是(shi)zui快但也(ye)(ye)是(shi)zui不靈敏(min)的(de)支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)(fa)。該方(fang)法(fa)(fa)采用針對支(zhi)原(yuan)體(ti)DNA的(de)引物用PCR檢(jian)(jian)測(ce)(ce)可(ke)疑樣本,其中PCR引物通常針對支(zhi)原(yuan)體(ti)的(de)16S rRNA基(ji)因。在凝(ning)膠電泳過程中,支(zhi)原(yuan)體(ti)DNA會(hui)顯示為特異性條帶,以此指(zhi)示支(zhi)原(yuan)體(ti)的(de)存在。PCR法(fa)(fa)可(ke)以檢(jian)(jian)測(ce)(ce)大多數(shu)支(zhi)原(yuan)體(ti),但謹慎起見(jian)同時(shi)使用另(ling)一種檢(jian)(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)(fa)來進行驗證。
酶學(xue)檢測和ELISA
此外,也還存在(zai)一些其(qi)他支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測(ce)方法。例如酶(mei)(mei)學(xue)檢測(ce)是(shi)將(jiang)可疑樣本(ben)添加到特定底物(wu)中,在(zai)這一體(ti)系內支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)的(de)酶(mei)(mei)可以(yi)將(jiang)ADP轉(zhuan)化為(wei)ATP,隨(sui)后能利用(yong)ATP發(fa)光(guang)的(de)luciferase酶(mei)(mei)就可以(yi)指示支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)的(de)存在(zai)。ELISA也能用(yong)于支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測(ce),以(yi)ELISA法為(wei)基礎的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測(ce)一般(ban)使用(yong)針(zhen)對支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)16S rRNA基因的(de)帶標(biao)記探針(zhen)或抗體(ti),來檢測(ce)培養物(wu)中是(shi)否含有支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)。
定期檢測(ce)
支(zhi)(zhi)原體(ti)感染會使培養(yang)(yang)細胞(bao)慢(man)慢(man)枯萎,因(yin)此(ci)對培養(yang)(yang)細胞(bao)定期(qi)進行(xing)支(zhi)(zhi)原體(ti)檢測(ce)非常重要。一般來說每1至3個月就應該進行(xing)一次(ci)支(zhi)(zhi)原體(ti)檢測(ce)。將定期(qi)支(zhi)(zhi)原體(ti)檢測(ce)常規化(hua)堅(jian)持(chi)下去,是細胞(bao)培養(yang)(yang)實驗室(shi)應對支(zhi)(zhi)原體(ti)感染的關鍵。
HGC27細胞|人胃癌細胞|STR入庫
出庫公司 細胞代號(hao) 細胞名(ming)稱(cheng) 備注
慧穎生物 siha 人宮(gong)頸癌(ai)細胞 STR
慧穎生(sheng)物(wu) MCF-7 人乳(ru)腺癌細胞 STR
慧穎生物 Hela 人宮頸癌細胞 STR
慧穎(ying)生物 HCT116 人的結腸癌細胞 STR
慧穎生物 Hep G2 人肝癌(ai)細(xi)胞 STR
慧穎生物(wu) NCI-H1437 人肺癌(ai)細胞 STR
慧(hui)穎生物 DU 145 人(ren)前列腺癌細胞 STR
慧穎(ying)生物 HT1080 人纖維肉瘤(liu)細胞 STR
慧穎生(sheng)物(wu) T24 人膀(bang)胱移行細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao) STR
慧穎生(sheng)物 T47D 人乳(ru)腺管(guan)癌細胞(bao) STR
慧穎(ying)生物 5637 人(ren)膀胱癌細胞(bao) STR
慧穎生物 U251 人膠質瘤細胞(bao) STR
慧(hui)穎生物 PANC-1 人(ren)胰腺癌(ai)細胞 STR
預防(fang)支(zhi)原體(ti)污染的建議:
培(pei)養(yang)工作(zuo)中,主(zhu)要從以(yi)下幾個方面來預防支原體(ti)的污染:
控(kong)制(zhi)環境污染;
嚴格實驗操作;
細胞培養基和器材要保證無菌;
在(zai)細胞培養基中加入適量的抗生(sheng)素。
支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)污染細(xi)(xi)胞(bao)后,特(te)別(bie)是重要的細(xi)(xi)胞(bao)株,有(you)(you)必要清(qing)除(chu)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti),常(chang)用(yong)方法有(you)(you)抗(kang)生素(su)(su)(su)處理(li)(li)(li)、抗(kang)血清(qing)處理(li)(li)(li)、抗(kang)生素(su)(su)(su)加抗(kang)血清(qing)和(he)補體(ti)聯合(he)處理(li)(li)(li)。支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)zui突出的結構特(te)征是沒有(you)(you)細(xi)(xi)胞(bao)壁,一般來講,對(dui)作用(yong)于(yu)細(xi)(xi)胞(bao)壁生物(wu)(wu)合(he)成(cheng)的抗(kang)生素(su)(su)(su),如 -內酰胺類(lei)(lei)(lei)、萬古霉素(su)(su)(su)等*不敏(min)感(gan)(gan);對(dui)多(duo)粘菌素(su)(su)(su)(polymycin)、利福平、磺(huang)胺藥(yao)物(wu)(wu)普遍耐藥(yao)。對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)zui有(you)(you)抑(yi)制活性及(ji)常(chang)用(yong)于(yu)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)感(gan)(gan)染治療的抗(kang)生素(su)(su)(su)是四環(huan)素(su)(su)(su)類(lei)(lei)(lei)、大環(huan)內酯類(lei)(lei)(lei)及(ji)一些氟(fu)喹諾酮;其他類(lei)(lei)(lei)抗(kang)生素(su)(su)(su)如氨基糖苷類(lei)(lei)(lei)、氯(lv)霉素(su)(su)(su)對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)有(you)(you)較小抑(yi)制作用(yong),所以常(chang)不用(yong)來作為支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)感(gan)(gan)染的化學(xue)治療劑。
支原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)在細胞培養中實(shi)際(ji)上(shang)是(shi)比較常見的, 據資料(liao), 可達30%甚(shen)至(zhi)更高(gao). 支原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)時(shi)細胞表現為長(chang)得不(bu)(bu)(bu)好,也(ye)(ye)不(bu)(bu)(bu)死(si)亡, 同時(shi), 培養基(ji)又是(shi)清亮的. 時(shi)間長(chang)達一周也(ye)(ye)沒有什么變化. 這(zhe)時(shi)基(ji)本上(shang)可以(yi)判斷出是(shi)支原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)了, 愿(yuan)意檢測就(jiu)檢測一下,不(bu)(bu)(bu)愿(yuan)意直接用清除試(shi)劑處理(li)吧.
避免細胞(bao)污染,可以(yi)從預(yu)防著手,超(chao)凈工作臺(tai)物(wu)品放置要合理、進(jin)入細胞(bao)房要換(huan)鞋和穿實(shi)驗(yan)服(fu)、實(shi)驗(yan)員戴手套后要用酒精等消(xiao)毒、避免細胞(bao)交(jiao)叉污染等等。