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SK-MES-1細胞|人肺鱗癌細胞|STR入庫
產(chan)品名稱(cheng):SK-MES-1 細胞
中文名(ming)稱:人肺鱗癌細胞
是否STR:是
供應公司:慧穎生物
復蘇周(zhou)期:1-2周(zhou)
您是否在關(guan)心各(ge)種細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系特異性鑒(jian)定(ding)(ding)方法,是否被細(xi)(xi)菌(jun),病毒,支原體污(wu)染(ran),購買慧穎生物細(xi)(xi)胞(bao)(bao)株細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系值(zhi)得放心,大部(bu)分細(xi)(xi)胞(bao)(bao)經過STR鑒(jian)定(ding)(ding),支原體,細(xi)(xi)菌(jun),病毒檢測后入庫。!
分離培養法(fa)
分離培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)是(shi)支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測的金標方法(fa),其檢(jian)測精確度zui高。這種(zhong)方法(fa)是(shi)從可疑的細胞培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)體(ti)(ti)系中取(qu)樣,并(bing)接種(zhong)到zui適宜支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)生長(chang)的瓊脂平(ping)板上(shang)。如果樣本(ben)中含有(you)支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti),它們就會在(zai)這種(zhong)瓊脂平(ping)板上(shang)*生長(chang),zui終形(xing)成明(ming)顯可見的特征(zheng)性菌(jun)落。分離培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)基本(ben)不(bu)(bu)會出現假陰(yin)性結(jie)果,因此被譽為支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測金標準。不(bu)(bu)過(guo)分離培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也存在(zai)兩(liang)個弊(bi)端(duan),一是(shi)檢(jian)測時(shi)間(jian)太長(chang),支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)要長(chang)出明(ming)顯克隆至少需(xu)要4周(zhou)時(shi)間(jian)。二是(shi)盡管可以檢(jian)測絕大(da)多數支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)種(zhong)類,分離培(pei)(pei)(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也有(you)力所(suo)不(bu)(bu)及的時(shi)候,例如支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)M. hyorhinis。
DNA檢測(ce)
DNA檢測(ce)需要將(jiang)可(ke)疑(yi)樣(yang)品與指(zhi)示(shi)細(xi)胞共同培(pei)養(yang),因(yin)此一般需要幾天時間。DNA檢測(ce)所用的(de)指(zhi)示(shi)細(xi)胞通常(chang)是細(xi)胞質(zhi)區域較(jiao)大的(de)Vero細(xi)胞,如果原樣(yang)本中含有(you)支(zhi)原體(ti),那么當細(xi)胞DNA被熒光染(ran)料(如Hoechst染(ran)料)染(ran)色時,就可(ke)以在指(zhi)示(shi)細(xi)胞的(de)核周圍觀察到(dao)熒光斑點或熒光顆粒。分離培(pei)養(yang)法(fa)用來(lai)(lai)檢測(ce)支(zhi)原體(ti)M. hyorhinis菌株并不可(ke)靠(kao),而DNA法(fa)可(ke)以準確的(de)將(jiang)其檢測(ce)出來(lai)(lai)。
PCR法
PCR法(fa)(fa)也(ye)可(ke)以檢(jian)測M. hyorhinis菌株,PCR法(fa)(fa)檢(jian)測支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)只需(xu)幾個小時(shi),是zui快但(dan)也(ye)是zui不靈敏(min)的支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測方(fang)法(fa)(fa)。該方(fang)法(fa)(fa)采(cai)用(yong)針(zhen)對支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)DNA的引物用(yong)PCR檢(jian)測可(ke)疑樣本,其(qi)中(zhong)PCR引物通常針(zhen)對支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的16S rRNA基因。在(zai)凝膠電泳過程中(zhong),支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)DNA會顯示(shi)為特異性(xing)條(tiao)帶,以此指示(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的存在(zai)。PCR法(fa)(fa)可(ke)以檢(jian)測大多(duo)數支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti),但(dan)謹慎(shen)起見同時(shi)使用(yong)另一(yi)種(zhong)檢(jian)測方(fang)法(fa)(fa)來進行(xing)驗證。
酶學檢測和(he)ELISA
此外,也(ye)還(huan)存在一(yi)些其他支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測方法。例(li)如(ru)酶學檢(jian)(jian)(jian)測是(shi)將可(ke)(ke)疑(yi)樣本添(tian)加(jia)到特定底物(wu)中,在這一(yi)體(ti)(ti)(ti)系內支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)酶可(ke)(ke)以將ADP轉化(hua)為ATP,隨(sui)后能利(li)用(yong)ATP發光的(de)luciferase酶就可(ke)(ke)以指(zhi)示支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)存在。ELISA也(ye)能用(yong)于(yu)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測,以ELISA法為基礎(chu)的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測一(yi)般使用(yong)針對支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)16S rRNA基因的(de)帶標記探針或抗(kang)體(ti)(ti)(ti),來檢(jian)(jian)(jian)測培養物(wu)中是(shi)否含有支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)。
定期檢測(ce)
支(zhi)原體感染會使培(pei)養細胞慢(man)慢(man)枯萎(wei),因此對培(pei)養細胞定期進行支(zhi)原體檢測(ce)非(fei)常(chang)重(zhong)要。一般(ban)來說每1至3個月就應該進行一次(ci)支(zhi)原體檢測(ce)。將定期支(zhi)原體檢測(ce)常(chang)規(gui)化堅(jian)持下去(qu),是細胞培(pei)養實驗(yan)室應對支(zhi)原體感染的關鍵(jian)。
SK-MES-1細胞|人肺鱗癌細胞|STR入庫
出庫公司 細胞(bao)代號 細胞名稱 備注
慧穎(ying)生物 siha 人宮頸癌細胞 STR
慧穎生物 MCF-7 人(ren)乳(ru)腺癌細(xi)胞(bao) STR
慧穎生物 Hela 人(ren)宮(gong)頸(jing)癌細胞 STR
慧穎(ying)生物(wu) HCT116 人的結腸癌細胞 STR
慧穎生物 Hep G2 人肝癌(ai)細(xi)胞 STR
慧穎(ying)生物 NCI-H1437 人肺癌(ai)細胞 STR
慧穎生物 DU 145 人(ren)前列腺癌細(xi)胞(bao) STR
慧穎(ying)生(sheng)物(wu) HT1080 人纖(xian)維肉瘤細(xi)胞 STR
慧穎(ying)生物 T24 人膀胱移行(xing)細(xi)胞(bao)癌(ai)細(xi)胞(bao) STR
慧穎生物 T47D 人乳腺管癌細胞 STR
慧穎生物 5637 人(ren)膀胱癌細胞 STR
慧穎(ying)生物 U251 人膠質瘤細胞 STR
慧(hui)穎生(sheng)物 PANC-1 人胰腺癌(ai)細胞 STR
預防支原體污(wu)染的(de)建議:
培養工作中,主要(yao)從以下幾個方面來預(yu)防(fang)支原體的污染:
控制環境污染(ran);
嚴格實(shi)驗操作;
細胞培養基和器材要(yao)保(bao)證無菌(jun);
在細胞培(pei)養(yang)基中加入(ru)適量的抗生(sheng)素。
支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)污染(ran)(ran)細胞后,特別(bie)是(shi)(shi)(shi)重要(yao)的(de)細胞株,有(you)(you)(you)必(bi)要(yao)清除支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti),常用(yong)方法有(you)(you)(you)抗(kang)(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)處(chu)理、抗(kang)(kang)(kang)(kang)血(xue)清處(chu)理、抗(kang)(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)加抗(kang)(kang)(kang)(kang)血(xue)清和補體(ti)(ti)(ti)(ti)聯合(he)處(chu)理。支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)zui突出的(de)結構特征是(shi)(shi)(shi)沒有(you)(you)(you)細胞壁,一(yi)般來講,對作(zuo)用(yong)于細胞壁生(sheng)物合(he)成的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su),如 -內(nei)酰(xian)胺類(lei)、萬(wan)古霉素(su)(su)等(deng)*不(bu)敏感(gan);對多粘菌素(su)(su)(polymycin)、利福平、磺胺藥物普(pu)遍耐藥。對支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)zui有(you)(you)(you)抑制活(huo)性及常用(yong)于支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)感(gan)染(ran)(ran)治療的(de)抗(kang)(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)是(shi)(shi)(shi)四(si)環(huan)(huan)素(su)(su)類(lei)、大環(huan)(huan)內(nei)酯類(lei)及一(yi)些氟(fu)喹(kui)諾酮;其(qi)他類(lei)抗(kang)(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)如氨基(ji)糖苷類(lei)、氯霉素(su)(su)對支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)有(you)(you)(you)較(jiao)小抑制作(zuo)用(yong),所以常不(bu)用(yong)來作(zuo)為(wei)支(zhi)原體(ti)(ti)(ti)(ti)感(gan)染(ran)(ran)的(de)化學治療劑。
支原體(ti)(ti)污(wu)染在細胞培(pei)養中實際(ji)上(shang)是比較(jiao)常(chang)見的, 據資料, 可達30%甚至更高. 支原體(ti)(ti)污(wu)染時細胞表現為(wei)長(chang)得不(bu)好,也(ye)不(bu)死亡, 同時, 培(pei)養基又是清亮的. 時間長(chang)達一周也(ye)沒有什么變(bian)化. 這時基本(ben)上(shang)可以(yi)判斷出是支原體(ti)(ti)污(wu)染了(le), 愿意檢測就檢測一下,不(bu)愿意直(zhi)接(jie)用清除試劑處理吧.
避免(mian)細胞(bao)(bao)污染,可以(yi)從預防(fang)著手,超凈(jing)工作臺物品放置要合理、進(jin)入細胞(bao)(bao)房要換鞋和穿實驗服(fu)、實驗員戴手套后要用(yong)酒(jiu)精等消毒、避免(mian)細胞(bao)(bao)交叉污染等等。