LS 174t細胞|STR入庫

產品名稱(cheng)：LS 174t細胞

是(shi)否STR：是(shi)

供應公(gong)司：慧穎(ying)生物

復蘇周(zhou)期(qi)：1-2周(zhou)

您是否在關心(xin)各(ge)種(zhong)細(xi)胞(bao)(bao)系特異性鑒定(ding)方法，是否被細(xi)菌，病毒(du)(du)，支原體(ti)污染(ran)，購買慧穎生物細(xi)胞(bao)(bao)株(zhu)細(xi)胞(bao)(bao)系值得(de)放心(xin)，大部分細(xi)胞(bao)(bao)經(jing)過STR鑒定(ding)，支原體(ti)，細(xi)菌，病毒(du)(du)檢測后(hou)入庫。！

分離培(pei)養(yang)法

分(fen)離(li)培(pei)(pei)(pei)養法(fa)是支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測的金標(biao)方(fang)(fang)法(fa)，其(qi)檢(jian)(jian)(jian)測精(jing)確(que)度zui高。這種方(fang)(fang)法(fa)是從可(ke)(ke)疑(yi)的細胞培(pei)(pei)(pei)養體(ti)(ti)(ti)系中取(qu)樣，并接種到(dao)zui適宜支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)生長(chang)的瓊(qiong)脂平板上。如(ru)果(guo)樣本中含有支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)，它們就會(hui)在(zai)這種瓊(qiong)脂平板上*生長(chang)，zui終(zhong)形(xing)成明顯(xian)可(ke)(ke)見的特征性菌落。分(fen)離(li)培(pei)(pei)(pei)養法(fa)基(ji)本不會(hui)出現假陰(yin)性結果(guo)，因此被譽為(wei)支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測金標(biao)準。不過分(fen)離(li)培(pei)(pei)(pei)養法(fa)也存在(zai)兩個弊端，一是檢(jian)(jian)(jian)測時間(jian)太(tai)長(chang)，支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)要(yao)長(chang)出明顯(xian)克隆至少需要(yao)4周時間(jian)。二(er)是盡管可(ke)(ke)以檢(jian)(jian)(jian)測絕大(da)多數支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)種類(lei)，分(fen)離(li)培(pei)(pei)(pei)養法(fa)也有力(li)所不及的時候，例如(ru)支原(yuan)體(ti)(ti)(ti)M. hyorhinis。

DNA檢測

DNA檢(jian)測需要將可疑樣品與指(zhi)示(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)共同培養，因此一(yi)般需要幾(ji)天(tian)時(shi)(shi)間。DNA檢(jian)測所用的(de)指(zhi)示(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)通常是(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)質區域(yu)較大的(de)Vero細(xi)胞(bao)(bao)(bao)，如果原樣本中(zhong)含有支原體(ti)，那么當(dang)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)DNA被熒光染(ran)料（如Hoechst染(ran)料）染(ran)色時(shi)(shi)，就可以(yi)在指(zhi)示(shi)(shi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)核周圍觀察到熒光斑(ban)點(dian)或熒光顆(ke)粒。分離(li)培養法用來檢(jian)測支原體(ti)M. hyorhinis菌株(zhu)并不可靠，而DNA法可以(yi)準確的(de)將其檢(jian)測出(chu)來。

PCR法

PCR法(fa)也(ye)可(ke)以(yi)檢測(ce)(ce)(ce)M. hyorhinis菌(jun)株，PCR法(fa)檢測(ce)(ce)(ce)支(zhi)原體(ti)只(zhi)需幾個小時(shi)，是(shi)zui快但(dan)也(ye)是(shi)zui不靈敏的(de)支(zhi)原體(ti)檢測(ce)(ce)(ce)方(fang)法(fa)。該方(fang)法(fa)采用針(zhen)對支(zhi)原體(ti)DNA的(de)引(yin)物用PCR檢測(ce)(ce)(ce)可(ke)疑樣本，其中PCR引(yin)物通常針(zhen)對支(zhi)原體(ti)的(de)16S rRNA基因。在(zai)凝(ning)膠電泳過程中，支(zhi)原體(ti)DNA會顯示(shi)為特異性條帶(dai)，以(yi)此(ci)指(zhi)示(shi)支(zhi)原體(ti)的(de)存在(zai)。PCR法(fa)可(ke)以(yi)檢測(ce)(ce)(ce)大多數支(zhi)原體(ti)，但(dan)謹慎起見同時(shi)使(shi)用另一(yi)種檢測(ce)(ce)(ce)方(fang)法(fa)來進(jin)行驗證。

酶學檢測(ce)和ELISA

此外，也還存在(zai)一(yi)(yi)些其他(ta)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)方法。例如酶學檢(jian)測(ce)是將(jiang)可(ke)(ke)(ke)疑樣本(ben)添加到特(te)定底物中，在(zai)這一(yi)(yi)體(ti)(ti)(ti)系(xi)內支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)酶可(ke)(ke)(ke)以將(jiang)ADP轉化為(wei)ATP，隨后(hou)能利用(yong)ATP發光(guang)的(de)luciferase酶就可(ke)(ke)(ke)以指示支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)存在(zai)。ELISA也能用(yong)于支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)，以ELISA法為(wei)基礎的(de)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)一(yi)(yi)般使用(yong)針(zhen)對(dui)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)16S rRNA基因的(de)帶標記探針(zhen)或抗(kang)體(ti)(ti)(ti)，來檢(jian)測(ce)培養物中是否含有(you)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)。

定期檢(jian)測

支(zhi)原(yuan)(yuan)體感染會(hui)使培養(yang)細胞慢(man)慢(man)枯萎，因此(ci)對培養(yang)細胞定期進行(xing)支(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測(ce)非常重要。一(yi)般來(lai)說每(mei)1至3個月(yue)就應(ying)該進行(xing)一(yi)次(ci)支(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測(ce)。將(jiang)定期支(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測(ce)常規化堅(jian)持下去，是細胞培養(yang)實驗室應(ying)對支(zhi)原(yuan)(yuan)體感染的(de)關鍵(jian)。

LS 174t細胞|STR入庫

出庫公司 細胞(bao)代號 細胞(bao)名稱 備注(zhu)

慧穎生物 siha 人宮頸癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 MCF-7 人乳(ru)腺(xian)癌細胞(bao) STR

慧穎生物 Hela 人宮頸(jing)癌細(xi)胞(bao) STR

慧穎生物 HCT116 人的結腸(chang)癌細胞 STR

慧穎生物 Hep G2 人肝(gan)癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR

慧穎生物(wu) DU 145 人前列(lie)腺癌細胞 STR

慧(hui)穎生(sheng)物 HT1080 人纖(xian)維肉瘤細胞 STR

慧穎生物(wu) T24 人(ren)膀胱移(yi)行細胞癌細胞 STR

慧(hui)穎生物 T47D 人(ren)乳腺(xian)管(guan)癌細胞 STR

慧穎生物 5637 人膀(bang)胱(guang)癌細胞 STR

慧穎(ying)生物 U251 人膠質瘤細胞 STR

慧穎生(sheng)物 PANC-1 人(ren)胰腺癌細胞 STR

預防支原體(ti)污染(ran)的建議(yi)：

  培養工作中，主要從以下幾個方面來預防支原體的污染：

控(kong)制環境污染;

嚴格(ge)實驗操作;

細(xi)胞(bao)培養基和器材(cai)要保證無(wu)菌;

在細胞培(pei)養基中(zhong)加入適(shi)量的抗生(sheng)素。

支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體污染(ran)細(xi)(xi)胞后，特(te)別是(shi)重要的(de)(de)細(xi)(xi)胞株，有必要清除支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體，常(chang)用(yong)(yong)方法(fa)有抗生(sheng)素(su)處理、抗血清處理、抗生(sheng)素(su)加(jia)抗血清和補體聯合(he)處理。支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體zui突(tu)出的(de)(de)結構(gou)特(te)征是(shi)沒有細(xi)(xi)胞壁，一(yi)般(ban)來(lai)講，對作用(yong)(yong)于細(xi)(xi)胞壁生(sheng)物合(he)成(cheng)的(de)(de)抗生(sheng)素(su)，如 -內(nei)酰(xian)胺類(lei)、萬古(gu)霉素(su)等*不敏(min)感;對多粘菌素(su)(polymycin)、利福平、磺胺藥(yao)物普遍耐藥(yao)。對支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體zui有抑(yi)制活性及常(chang)用(yong)(yong)于支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體感染(ran)治療(liao)的(de)(de)抗生(sheng)素(su)是(shi)四環素(su)類(lei)、大(da)環內(nei)酯類(lei)及一(yi)些氟喹諾(nuo)酮;其他類(lei)抗生(sheng)素(su)如氨基糖苷類(lei)、氯霉素(su)對支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體有較小抑(yi)制作用(yong)(yong)，所(suo)以(yi)常(chang)不用(yong)(yong)來(lai)作為支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)體感染(ran)的(de)(de)化學(xue)治療(liao)劑(ji)。

支(zhi)原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)(ran)(ran)在(zai)細(xi)胞(bao)培養中實際上是(shi)比較常見(jian)的, 據資料, 可達30%甚至更(geng)高. 支(zhi)原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)(ran)(ran)時細(xi)胞(bao)表現(xian)為長(chang)得不(bu)(bu)好,也不(bu)(bu)死亡(wang), 同時, 培養基(ji)又是(shi)清(qing)亮的. 時間長(chang)達一周也沒有什么變化(hua). 這時基(ji)本上可以判斷(duan)出是(shi)支(zhi)原(yuan)體(ti)污(wu)染(ran)(ran)(ran)了, 愿(yuan)意檢測(ce)就檢測(ce)一下,不(bu)(bu)愿(yuan)意直接用清(qing)除試(shi)劑處理吧(ba).

避免(mian)細胞污染，可以(yi)從預防著(zhu)手，超凈工作臺物品放置(zhi)要合理、進入細胞房要換鞋和穿(chuan)實驗服、實驗員(yuan)戴(dai)手套后要用酒精等消(xiao)毒、避免(mian)細胞交叉污染等等。