BRL細胞|STR入庫

產品名稱：BRL細胞

是(shi)否STR：是(shi)

供應(ying)公司：慧穎生物

復蘇周期(qi)：1-2周

您是否(fou)在關心各(ge)種細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系(xi)特異性鑒(jian)定方法(fa)，是否(fou)被細(xi)菌，病毒，支(zhi)原體污染，購買慧穎生物細(xi)胞(bao)(bao)(bao)株細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系(xi)值(zhi)得放心，大部分細(xi)胞(bao)(bao)(bao)經過STR鑒(jian)定，支(zhi)原體，細(xi)菌，病毒檢(jian)測后入庫。！

分離培養法

分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)法是(shi)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)的(de)金(jin)標(biao)方法，其檢(jian)測(ce)精確度zui高。這(zhe)種(zhong)方法是(shi)從可疑的(de)細(xi)胞培(pei)(pei)養(yang)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)系中取(qu)樣，并接種(zhong)到zui適宜(yi)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)生長(chang)的(de)瓊(qiong)脂平板上。如果樣本(ben)中含有(you)支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)，它們(men)就會(hui)在(zai)這(zhe)種(zhong)瓊(qiong)脂平板上*生長(chang)，zui終形成(cheng)明(ming)顯可見的(de)特征性菌落。分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)法基本(ben)不會(hui)出(chu)現假陰(yin)性結(jie)果，因此(ci)被譽為支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)金(jin)標(biao)準。不過分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)法也(ye)存在(zai)兩個弊(bi)端，一是(shi)檢(jian)測(ce)時間太長(chang)，支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)要長(chang)出(chu)明(ming)顯克隆至少需(xu)要4周時間。二(er)是(shi)盡管可以檢(jian)測(ce)絕大多數支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)種(zhong)類(lei)，分(fen)離培(pei)(pei)養(yang)法也(ye)有(you)力所不及(ji)的(de)時候，例如支(zhi)(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)(ti)M. hyorhinis。

DNA檢測

DNA檢(jian)(jian)測需(xu)(xu)要(yao)將可疑樣(yang)品與指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)共同培養，因(yin)此一般需(xu)(xu)要(yao)幾天時(shi)間。DNA檢(jian)(jian)測所用(yong)的指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)通(tong)常(chang)是細(xi)胞(bao)(bao)質區域(yu)較大的Vero細(xi)胞(bao)(bao)，如(ru)果(guo)原樣(yang)本中含有支原體，那么當細(xi)胞(bao)(bao)DNA被熒光染(ran)料（如(ru)Hoechst染(ran)料）染(ran)色時(shi)，就可以在指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)的核周(zhou)圍(wei)觀察(cha)到熒光斑點(dian)或熒光顆粒。分離培養法用(yong)來檢(jian)(jian)測支原體M. hyorhinis菌株并不可靠，而DNA法可以準(zhun)確的將其檢(jian)(jian)測出來。

PCR法

PCR法也(ye)可(ke)以檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)M. hyorhinis菌株，PCR法檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)只需幾(ji)個小時，是zui快(kuai)但(dan)也(ye)是zui不靈敏的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)方法。該方法采用針對(dui)(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA的(de)引物用PCR檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)可(ke)疑樣(yang)本，其(qi)中(zhong)PCR引物通常針對(dui)(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)16S rRNA基(ji)因。在凝膠電(dian)泳過(guo)程中(zhong)，支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA會(hui)顯示(shi)為特異性條帶，以此指示(shi)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)存在。PCR法可(ke)以檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)大(da)多數支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)，但(dan)謹慎(shen)起見同時使(shi)用另一種檢(jian)(jian)(jian)測(ce)(ce)方法來(lai)進行驗證。

酶學檢測和ELISA

此外，也還(huan)存在(zai)(zai)一些(xie)其(qi)他支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)方法。例(li)如酶學檢(jian)測(ce)是(shi)將可疑(yi)樣本添(tian)加到特定底(di)物(wu)中(zhong)，在(zai)(zai)這一體(ti)(ti)系內支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的(de)酶可以將ADP轉化為ATP，隨后能利用ATP發光的(de)luciferase酶就可以指(zhi)示支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的(de)存在(zai)(zai)。ELISA也能用于支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)，以ELISA法為基(ji)礎的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)一般(ban)使(shi)用針對支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)16S rRNA基(ji)因的(de)帶標記探針或抗體(ti)(ti)，來檢(jian)測(ce)培養物(wu)中(zhong)是(shi)否含有支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)。

定期檢測(ce)

支原(yuan)(yuan)體(ti)感染會使培養細(xi)胞(bao)(bao)慢(man)(man)慢(man)(man)枯萎，因此對培養細(xi)胞(bao)(bao)定期進行(xing)支原(yuan)(yuan)體(ti)檢測非常(chang)重要。一般(ban)來說每1至3個月就(jiu)應(ying)該進行(xing)一次支原(yuan)(yuan)體(ti)檢測。將(jiang)定期支原(yuan)(yuan)體(ti)檢測常(chang)規化堅持下去(qu)，是細(xi)胞(bao)(bao)培養實驗室應(ying)對支原(yuan)(yuan)體(ti)感染的(de)關鍵(jian)。

BRL細胞|STR入庫

出庫(ku)公司(si) 細胞代(dai)號 細胞名(ming)稱 備注

慧穎生(sheng)物 siha 人宮頸癌細胞 STR

慧穎(ying)生物 MCF-7 人(ren)乳腺癌細胞 STR

慧穎生物 Hela 人宮頸癌細胞 STR

慧穎生物(wu) HCT116 人的結(jie)腸癌細(xi)胞(bao) STR

慧穎生(sheng)物 Hep G2 人(ren)肝癌(ai)細(xi)胞 STR

慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR

慧(hui)穎生物 DU 145 人前列腺癌細胞 STR

慧(hui)穎(ying)生物 HT1080 人纖維肉(rou)瘤細(xi)胞(bao) STR

慧穎生(sheng)物 T24 人膀胱(guang)移行細(xi)胞癌細(xi)胞 STR

慧穎生物 T47D 人(ren)乳(ru)腺(xian)管癌(ai)細胞 STR

慧(hui)穎生物 5637 人膀胱癌細(xi)胞 STR

慧穎生(sheng)物(wu) U251 人膠質瘤細胞 STR

慧穎生物 PANC-1 人胰腺(xian)癌(ai)細胞(bao) STR

預防支原體污染(ran)的(de)建(jian)議(yi)：

  培養工作中，主(zhu)要從(cong)以下幾個(ge)方(fang)面來預防支(zhi)原體的污染：

控(kong)制(zhi)環境污染;

嚴格實驗操作;

細胞培養基和器材要保證無菌;

在細胞(bao)培養(yang)基中加入適量的抗生素。

支(zhi)原(yuan)(yuan)體污染細(xi)(xi)(xi)胞(bao)后，特(te)別是重要的細(xi)(xi)(xi)胞(bao)株，有(you)必要清除支(zhi)原(yuan)(yuan)體，常用方(fang)法有(you)抗(kang)(kang)生素(su)(su)(su)(su)處理、抗(kang)(kang)血(xue)清處理、抗(kang)(kang)生素(su)(su)(su)(su)加抗(kang)(kang)血(xue)清和補(bu)體聯合處理。支(zhi)原(yuan)(yuan)體zui突出的結構特(te)征是沒有(you)細(xi)(xi)(xi)胞(bao)壁，一般來(lai)(lai)講，對(dui)作用于細(xi)(xi)(xi)胞(bao)壁生物合成的抗(kang)(kang)生素(su)(su)(su)(su)，如(ru) -內(nei)酰(xian)胺(an)類、萬古霉(mei)素(su)(su)(su)(su)等*不(bu)(bu)敏(min)感;對(dui)多粘(zhan)菌素(su)(su)(su)(su)(polymycin)、利福(fu)平(ping)、磺胺(an)藥(yao)(yao)物普遍耐(nai)藥(yao)(yao)。對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)體zui有(you)抑制(zhi)活性及常用于支(zhi)原(yuan)(yuan)體感染治療的抗(kang)(kang)生素(su)(su)(su)(su)是四環素(su)(su)(su)(su)類、大環內(nei)酯類及一些(xie)氟喹諾酮;其他(ta)類抗(kang)(kang)生素(su)(su)(su)(su)如(ru)氨(an)基(ji)糖苷(gan)類、氯霉(mei)素(su)(su)(su)(su)對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)體有(you)較(jiao)小(xiao)抑制(zhi)作用，所以常不(bu)(bu)用來(lai)(lai)作為(wei)支(zhi)原(yuan)(yuan)體感染的化學治療劑。

支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)污染(ran)在細(xi)胞培(pei)養(yang)中實際上是(shi)比較(jiao)常(chang)見的(de), 據資料, 可達30%甚(shen)至更高. 支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)污染(ran)時細(xi)胞表現為長得(de)不好(hao),也不死亡(wang), 同時, 培(pei)養(yang)基(ji)又是(shi)清亮的(de). 時間長達一(yi)周也沒有什(shen)么變化. 這時基(ji)本上可以(yi)判斷出是(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)污染(ran)了(le), 愿意(yi)檢(jian)測(ce)就檢(jian)測(ce)一(yi)下,不愿意(yi)直接用清除(chu)試劑處理吧.

避(bi)免細胞(bao)污(wu)染，可以從(cong)預防(fang)著手，超凈工作臺物(wu)品放(fang)置(zhi)要合理、進入細胞(bao)房(fang)要換(huan)鞋和穿實驗服、實驗員(yuan)戴(dai)手套后(hou)要用酒精等(deng)消毒、避(bi)免細胞(bao)交叉(cha)污(wu)染等(deng)等(deng)。