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HBL-100細胞|STR入庫
產品名稱(cheng):HBL-100細胞
是(shi)否(fou)STR:是(shi)
供應公(gong)司:慧穎生(sheng)物
復(fu)蘇(su)周期:1-2周
您(nin)是否(fou)在關心各(ge)種細(xi)(xi)胞系特異性鑒定方法(fa),是否(fou)被細(xi)(xi)菌(jun),病毒,支原體污(wu)染(ran),購買慧穎生物細(xi)(xi)胞株細(xi)(xi)胞系值得放心,大部(bu)分細(xi)(xi)胞經過STR鑒定,支原體,細(xi)(xi)菌(jun),病毒檢(jian)測(ce)后入庫。!
分離培養法(fa)
分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)是支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)(ce)的(de)金標(biao)方法(fa),其檢(jian)測(ce)(ce)精(jing)確(que)度zui高。這種(zhong)方法(fa)是從可(ke)(ke)疑(yi)的(de)細胞(bao)培(pei)養(yang)體(ti)系(xi)中取樣,并接(jie)種(zhong)到(dao)zui適(shi)宜支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)生長的(de)瓊(qiong)脂平(ping)板上(shang)。如果樣本中含有支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti),它們(men)就會在這種(zhong)瓊(qiong)脂平(ping)板上(shang)*生長,zui終(zhong)形成明(ming)顯(xian)可(ke)(ke)見的(de)特征性菌落。分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)基本不會出(chu)現假陰性結(jie)果,因(yin)此被譽(yu)為(wei)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)(ce)金標(biao)準。不過分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)也存在兩個弊端,一是檢(jian)測(ce)(ce)時間太長,支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)要長出(chu)明(ming)顯(xian)克隆至(zhi)少需要4周時間。二是盡管可(ke)(ke)以檢(jian)測(ce)(ce)絕大(da)多(duo)數支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)種(zhong)類(lei),分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)也有力所(suo)不及的(de)時候,例(li)如支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)M. hyorhinis。
DNA檢(jian)測(ce)
DNA檢(jian)測(ce)需要將可(ke)疑樣品與指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)共同培養,因此一(yi)般需要幾天(tian)時間。DNA檢(jian)測(ce)所用的指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)通常是細(xi)胞(bao)(bao)質區域較大(da)的Vero細(xi)胞(bao)(bao),如(ru)果原樣本中(zhong)含有(you)支原體(ti),那么當細(xi)胞(bao)(bao)DNA被熒(ying)光(guang)染(ran)料(如(ru)Hoechst染(ran)料)染(ran)色時,就(jiu)可(ke)以在指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)的核周圍觀察(cha)到(dao)熒(ying)光(guang)斑點(dian)或(huo)熒(ying)光(guang)顆粒。分離培養法用來(lai)(lai)檢(jian)測(ce)支原體(ti)M. hyorhinis菌株并(bing)不可(ke)靠,而(er)DNA法可(ke)以準確的將其檢(jian)測(ce)出(chu)來(lai)(lai)。
PCR法
PCR法(fa)(fa)(fa)也(ye)可以檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)M. hyorhinis菌株,PCR法(fa)(fa)(fa)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)只需(xu)幾個小時(shi),是zui快但(dan)也(ye)是zui不靈敏的支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)方(fang)法(fa)(fa)(fa)。該(gai)方(fang)法(fa)(fa)(fa)采用(yong)針(zhen)對支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)DNA的引物用(yong)PCR檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)可疑樣本,其(qi)中PCR引物通常針(zhen)對支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的16S rRNA基(ji)因(yin)。在凝(ning)膠電泳過程中,支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)DNA會顯示為特異性(xing)條帶,以此指示支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)的存(cun)在。PCR法(fa)(fa)(fa)可以檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)大多(duo)數支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti),但(dan)謹慎起見同(tong)時(shi)使用(yong)另(ling)一種(zhong)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測(ce)方(fang)法(fa)(fa)(fa)來(lai)進(jin)行驗(yan)證。
酶學檢測(ce)和ELISA
此外,也還存在(zai)一些其他(ta)支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測方法。例(li)如(ru)酶學檢(jian)(jian)測是將可疑樣本添加到(dao)特定(ding)底(di)物中,在(zai)這一體(ti)(ti)系內支(zhi)原體(ti)(ti)的(de)(de)酶可以(yi)(yi)將ADP轉(zhuan)化為ATP,隨后(hou)能利(li)用(yong)(yong)ATP發光的(de)(de)luciferase酶就可以(yi)(yi)指示支(zhi)原體(ti)(ti)的(de)(de)存在(zai)。ELISA也能用(yong)(yong)于支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測,以(yi)(yi)ELISA法為基礎(chu)的(de)(de)支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測一般使用(yong)(yong)針(zhen)對支(zhi)原體(ti)(ti)16S rRNA基因的(de)(de)帶標記(ji)探針(zhen)或抗體(ti)(ti),來(lai)檢(jian)(jian)測培養物中是否含(han)有支(zhi)原體(ti)(ti)。
定期檢測(ce)
支原(yuan)體感(gan)染會使培養(yang)(yang)細胞(bao)慢慢枯(ku)萎,因此對培養(yang)(yang)細胞(bao)定期(qi)進(jin)行支原(yuan)體檢(jian)測非常(chang)重要。一般來說每1至(zhi)3個月(yue)就應該進(jin)行一次支原(yuan)體檢(jian)測。將定期(qi)支原(yuan)體檢(jian)測常(chang)規化堅持下去,是細胞(bao)培養(yang)(yang)實(shi)驗(yan)室應對支原(yuan)體感(gan)染的關鍵。
HBL-100細胞|STR入庫
出庫公司 細胞代號 細胞名稱 備注(zhu)
慧(hui)穎生(sheng)物 siha 人宮頸癌細胞(bao) STR
慧(hui)穎生物 MCF-7 人乳腺癌細胞 STR
慧穎生物 Hela 人宮頸(jing)癌細(xi)胞 STR
慧穎生物 HCT116 人的結(jie)腸癌細(xi)胞 STR
慧(hui)穎(ying)生物 Hep G2 人肝癌(ai)細胞 STR
慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR
慧穎生物 DU 145 人前列腺癌(ai)細胞 STR
慧(hui)穎(ying)生物 HT1080 人纖(xian)維(wei)肉瘤細胞 STR
慧穎生(sheng)物 T24 人膀胱移行細胞癌(ai)細胞 STR
慧穎生(sheng)物 T47D 人乳腺管癌細胞 STR
慧穎生物 5637 人(ren)膀(bang)胱(guang)癌(ai)細胞 STR
慧穎生(sheng)物 U251 人膠質瘤(liu)細(xi)胞 STR
慧穎生物 PANC-1 人胰(yi)腺癌細胞 STR
預防支原體(ti)污染(ran)的建議:
培養(yang)工作中,主要從以(yi)下幾個方面(mian)來預防支原體的污染:
控制環(huan)境污(wu)染;
嚴格實驗操作;
細(xi)胞培養基和器材要(yao)保證無菌;
在細(xi)胞培養(yang)基中加入適量的抗生素。
支(zhi)原體(ti)污染(ran)細胞后(hou),特別是(shi)(shi)重要的(de)細胞株,有必(bi)要清(qing)除支(zhi)原體(ti),常(chang)用(yong)方法有抗生(sheng)(sheng)(sheng)素處(chu)理(li)、抗血清(qing)處(chu)理(li)、抗生(sheng)(sheng)(sheng)素加抗血清(qing)和補體(ti)聯合(he)處(chu)理(li)。支(zhi)原體(ti)zui突出(chu)的(de)結構(gou)特征是(shi)(shi)沒有細胞壁(bi),一(yi)般來(lai)講,對(dui)作(zuo)用(yong)于(yu)細胞壁(bi)生(sheng)(sheng)(sheng)物合(he)成的(de)抗生(sheng)(sheng)(sheng)素,如 -內酰胺(an)(an)類(lei)、萬古霉素等*不(bu)敏感;對(dui)多(duo)粘菌素(polymycin)、利福平、磺胺(an)(an)藥物普(pu)遍耐(nai)藥。對(dui)支(zhi)原體(ti)zui有抑(yi)制(zhi)(zhi)活性及(ji)常(chang)用(yong)于(yu)支(zhi)原體(ti)感染(ran)治療的(de)抗生(sheng)(sheng)(sheng)素是(shi)(shi)四環素類(lei)、大環內酯類(lei)及(ji)一(yi)些氟喹(kui)諾(nuo)酮;其他(ta)類(lei)抗生(sheng)(sheng)(sheng)素如氨基糖苷類(lei)、氯霉素對(dui)支(zhi)原體(ti)有較小(xiao)抑(yi)制(zhi)(zhi)作(zuo)用(yong),所(suo)以常(chang)不(bu)用(yong)來(lai)作(zuo)為支(zhi)原體(ti)感染(ran)的(de)化學治療劑。
支(zhi)(zhi)原(yuan)體污染(ran)在(zai)細胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)中實際上是(shi)(shi)比較常見的, 據資料, 可(ke)達(da)30%甚(shen)至更高. 支(zhi)(zhi)原(yuan)體污染(ran)時(shi)(shi)細胞(bao)(bao)表現為長(chang)得(de)不好(hao),也不死亡, 同時(shi)(shi), 培(pei)養(yang)基又是(shi)(shi)清亮(liang)的. 時(shi)(shi)間長(chang)達(da)一周也沒(mei)有(you)什(shen)么變(bian)化(hua). 這時(shi)(shi)基本(ben)上可(ke)以判(pan)斷(duan)出(chu)是(shi)(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體污染(ran)了, 愿意檢測就檢測一下,不愿意直接用清除(chu)試(shi)劑處理吧(ba).
避免細胞污(wu)染,可以從(cong)預(yu)防(fang)著手,超凈工作臺物品放(fang)置要(yao)合(he)理、進(jin)入細胞房要(yao)換鞋和穿(chuan)實驗服(fu)、實驗員戴手套后要(yao)用(yong)酒精等(deng)消(xiao)毒、避免細胞交叉污(wu)染等(deng)等(deng)。
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