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RSC096細胞|STR入庫
產品名稱:RSC096細胞
是(shi)否STR:是(shi)
供(gong)應公司(si):慧穎生物
復蘇周(zhou)期:1-2周(zhou)
您是(shi)否在關心(xin)各種細(xi)胞系特(te)異性(xing)鑒定(ding)方法,是(shi)否被(bei)細(xi)菌,病毒,支原(yuan)體污染(ran),購買慧穎生(sheng)物(wu)細(xi)胞株細(xi)胞系值得(de)放心(xin),大部(bu)分細(xi)胞經過STR鑒定(ding),支原(yuan)體,細(xi)菌,病毒檢測后入庫。!
分離(li)培養法
分(fen)(fen)離培養法是支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)(jian)測的(de)(de)金標方法,其檢(jian)(jian)(jian)測精確(que)度zui高(gao)。這種(zhong)(zhong)方法是從可(ke)疑的(de)(de)細胞培養體(ti)系中取樣,并接種(zhong)(zhong)到zui適宜支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)生(sheng)長的(de)(de)瓊脂平板上。如果樣本(ben)(ben)中含有(you)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti),它(ta)們就會在這種(zhong)(zhong)瓊脂平板上*生(sheng)長,zui終(zhong)形成明顯可(ke)見的(de)(de)特征性菌(jun)落。分(fen)(fen)離培養法基本(ben)(ben)不會出現(xian)假陰(yin)性結果,因此被(bei)譽(yu)為(wei)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)(jian)測金標準。不過分(fen)(fen)離培養法也(ye)(ye)存在兩個弊端(duan),一是檢(jian)(jian)(jian)測時(shi)間太(tai)長,支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)要長出明顯克隆(long)至少需要4周(zhou)時(shi)間。二是盡管可(ke)以檢(jian)(jian)(jian)測絕大多數支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)種(zhong)(zhong)類,分(fen)(fen)離培養法也(ye)(ye)有(you)力所(suo)不及(ji)的(de)(de)時(shi)候,例如支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)M. hyorhinis。
DNA檢(jian)測
DNA檢(jian)測(ce)(ce)需要將可(ke)疑(yi)樣(yang)品與指示(shi)細(xi)胞共同(tong)培養(yang),因此一般需要幾天時間。DNA檢(jian)測(ce)(ce)所用的(de)指示(shi)細(xi)胞通常是細(xi)胞質區(qu)域較大的(de)Vero細(xi)胞,如(ru)果原樣(yang)本中含(han)有支(zhi)原體,那么當細(xi)胞DNA被熒(ying)光染料(如(ru)Hoechst染料)染色時,就可(ke)以在指示(shi)細(xi)胞的(de)核周(zhou)圍觀察(cha)到熒(ying)光斑(ban)點或熒(ying)光顆(ke)粒。分離(li)培養(yang)法(fa)用來(lai)檢(jian)測(ce)(ce)支(zhi)原體M. hyorhinis菌(jun)株并不可(ke)靠,而DNA法(fa)可(ke)以準確的(de)將其檢(jian)測(ce)(ce)出(chu)來(lai)。
PCR法
PCR法也可(ke)以檢測(ce)(ce)(ce)(ce)M. hyorhinis菌株(zhu),PCR法檢測(ce)(ce)(ce)(ce)支(zhi)原(yuan)體只需幾個小時(shi),是zui快(kuai)但也是zui不靈敏(min)的支(zhi)原(yuan)體檢測(ce)(ce)(ce)(ce)方(fang)法。該方(fang)法采用針(zhen)對支(zhi)原(yuan)體DNA的引物用PCR檢測(ce)(ce)(ce)(ce)可(ke)疑樣本,其中(zhong)PCR引物通常針(zhen)對支(zhi)原(yuan)體的16S rRNA基因。在(zai)凝膠電(dian)泳過程中(zhong),支(zhi)原(yuan)體DNA會顯示(shi)(shi)為特異性條帶,以此指示(shi)(shi)支(zhi)原(yuan)體的存(cun)在(zai)。PCR法可(ke)以檢測(ce)(ce)(ce)(ce)大多數(shu)支(zhi)原(yuan)體,但謹慎起(qi)見同時(shi)使(shi)用另(ling)一種(zhong)檢測(ce)(ce)(ce)(ce)方(fang)法來進(jin)行驗證(zheng)。
酶學檢測(ce)和ELISA
此外(wai),也還(huan)存在一(yi)(yi)些其(qi)他支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測方法。例(li)如酶(mei)學檢測是(shi)(shi)將可(ke)(ke)疑樣本添加到特定底物中,在這一(yi)(yi)體(ti)系內(nei)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)的(de)酶(mei)可(ke)(ke)以將ADP轉(zhuan)化為ATP,隨后(hou)能利用(yong)ATP發光的(de)luciferase酶(mei)就可(ke)(ke)以指示支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)的(de)存在。ELISA也能用(yong)于支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測,以ELISA法為基礎(chu)的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)檢測一(yi)(yi)般(ban)使用(yong)針對支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)16S rRNA基因的(de)帶標記探針或抗體(ti),來(lai)檢測培養物中是(shi)(shi)否含有(you)支(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)。
定期檢(jian)測
支(zhi)原體(ti)(ti)感染(ran)會使(shi)培(pei)養(yang)細胞(bao)慢(man)慢(man)枯萎,因此對(dui)培(pei)養(yang)細胞(bao)定(ding)(ding)期進行支(zhi)原體(ti)(ti)檢測非常重(zhong)要。一般(ban)來說每1至3個月就應該(gai)進行一次支(zhi)原體(ti)(ti)檢測。將定(ding)(ding)期支(zhi)原體(ti)(ti)檢測常規化堅持(chi)下去,是(shi)細胞(bao)培(pei)養(yang)實驗室應對(dui)支(zhi)原體(ti)(ti)感染(ran)的關鍵。
RSC096細胞|STR入庫
出庫公(gong)司 細胞(bao)代號 細胞名稱(cheng) 備注
慧穎生物 siha 人宮(gong)頸(jing)癌細胞 STR
慧(hui)穎(ying)生物 MCF-7 人乳(ru)腺癌細胞 STR
慧穎生物(wu) Hela 人宮頸癌(ai)細胞 STR
慧(hui)穎(ying)生物 HCT116 人的結腸癌(ai)細胞 STR
慧穎生物 Hep G2 人肝(gan)癌細胞 STR
慧穎生物 NCI-H1437 人(ren)肺癌細胞 STR
慧穎生物 DU 145 人前列腺癌細胞 STR
慧穎生物(wu) HT1080 人纖維肉瘤細胞 STR
慧穎生物 T24 人膀胱(guang)移行細胞癌細胞 STR
慧(hui)穎生物 T47D 人乳腺(xian)管癌細胞(bao) STR
慧穎生物(wu) 5637 人膀(bang)胱癌細胞(bao) STR
慧穎生物(wu) U251 人膠質(zhi)瘤細胞(bao) STR
慧(hui)穎生物 PANC-1 人胰腺癌細(xi)胞 STR
培養工作(zuo)中,主要(yao)從以下幾個方面來(lai)預(yu)防支原體的污染(ran):
控制(zhi)環境污(wu)染;
嚴格實(shi)驗操(cao)作;
細胞培養基和器材要保證(zheng)無菌;
在細胞培養基中加入適量(liang)的抗生(sheng)素。
支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)污(wu)染細(xi)胞后,特別是重要的細(xi)胞株,有(you)(you)(you)必(bi)要清(qing)除支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti),常用(yong)(yong)(yong)方法有(you)(you)(you)抗(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)處理、抗(kang)(kang)(kang)血(xue)清(qing)處理、抗(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)加抗(kang)(kang)(kang)血(xue)清(qing)和補體(ti)(ti)(ti)(ti)聯(lian)合(he)處理。支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)zui突出(chu)的結構特征(zheng)是沒有(you)(you)(you)細(xi)胞壁,一般(ban)來講,對(dui)作用(yong)(yong)(yong)于細(xi)胞壁生(sheng)物(wu)合(he)成的抗(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su),如 -內酰胺類(lei)、萬古霉素(su)等*不敏感(gan)(gan);對(dui)多粘(zhan)菌(jun)素(su)(polymycin)、利福平、磺(huang)胺藥(yao)物(wu)普遍(bian)耐藥(yao)。對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)zui有(you)(you)(you)抑制(zhi)活性及(ji)(ji)常用(yong)(yong)(yong)于支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)感(gan)(gan)染治(zhi)療的抗(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)是四環素(su)類(lei)、大環內酯(zhi)類(lei)及(ji)(ji)一些氟喹諾酮;其他類(lei)抗(kang)(kang)(kang)生(sheng)素(su)如氨基糖(tang)苷(gan)類(lei)、氯霉素(su)對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)有(you)(you)(you)較小抑制(zhi)作用(yong)(yong)(yong),所以常不用(yong)(yong)(yong)來作為(wei)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)感(gan)(gan)染的化學治(zhi)療劑。
支(zhi)原(yuan)(yuan)體污(wu)(wu)染在細胞(bao)(bao)培養(yang)中(zhong)實際上(shang)是(shi)比較常見的(de), 據資料, 可(ke)達30%甚至(zhi)更(geng)高. 支(zhi)原(yuan)(yuan)體污(wu)(wu)染時(shi)(shi)細胞(bao)(bao)表現(xian)為長(chang)得不(bu)好,也(ye)不(bu)死亡(wang), 同(tong)時(shi)(shi), 培養(yang)基又是(shi)清(qing)(qing)亮的(de). 時(shi)(shi)間(jian)長(chang)達一周也(ye)沒有(you)什(shen)么變化. 這(zhe)時(shi)(shi)基本上(shang)可(ke)以判斷出是(shi)支(zhi)原(yuan)(yuan)體污(wu)(wu)染了, 愿意(yi)檢(jian)測(ce)就檢(jian)測(ce)一下,不(bu)愿意(yi)直(zhi)接用(yong)清(qing)(qing)除(chu)試劑處理(li)吧.
避免細(xi)(xi)(xi)胞(bao)污(wu)(wu)染(ran),可(ke)以從預(yu)防著手,超凈工作臺(tai)物品(pin)放(fang)置(zhi)要合理、進入細(xi)(xi)(xi)胞(bao)房要換鞋和穿實(shi)驗(yan)服、實(shi)驗(yan)員戴手套后要用酒精(jing)等(deng)(deng)消毒、避免細(xi)(xi)(xi)胞(bao)交叉污(wu)(wu)染(ran)等(deng)(deng)等(deng)(deng)。
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