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HuT 78細胞|STR入庫
產品名稱:HuT 78細胞
是否(fou)STR:是
供應公司:慧穎生(sheng)物(wu)
復(fu)蘇周(zhou)期(qi):1-2周(zhou)
您(nin)是(shi)否(fou)在關心各種細(xi)胞系(xi)特異性鑒定方法,是(shi)否(fou)被細(xi)菌(jun),病毒(du)(du),支原(yuan)體污染,購買慧穎生物細(xi)胞株細(xi)胞系(xi)值得放心,大部(bu)分細(xi)胞經過STR鑒定,支原(yuan)體,細(xi)菌(jun),病毒(du)(du)檢測后入庫。!
分離培養法
分(fen)(fen)離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)是支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)(ce)的(de)金(jin)標方法(fa),其(qi)檢(jian)測(ce)(ce)精確(que)度zui高。這(zhe)種(zhong)方法(fa)是從可疑(yi)的(de)細胞培(pei)養(yang)(yang)(yang)體(ti)(ti)系(xi)中(zhong)取樣,并接(jie)種(zhong)到zui適宜(yi)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)生長(chang)的(de)瓊脂(zhi)平板上。如果樣本(ben)中(zhong)含(han)有(you)支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti),它們(men)就會在這(zhe)種(zhong)瓊脂(zhi)平板上*生長(chang),zui終形成(cheng)明(ming)顯可見的(de)特征性(xing)菌(jun)落。分(fen)(fen)離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)基(ji)本(ben)不會出(chu)(chu)現假(jia)陰性(xing)結果,因此被譽為支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)(ce)金(jin)標準。不過分(fen)(fen)離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也存在兩(liang)個弊端,一是檢(jian)測(ce)(ce)時(shi)間(jian)太長(chang),支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)要長(chang)出(chu)(chu)明(ming)顯克隆至少需要4周時(shi)間(jian)。二(er)是盡管可以檢(jian)測(ce)(ce)絕(jue)大(da)多數支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)種(zhong)類,分(fen)(fen)離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也有(you)力所不及的(de)時(shi)候,例如支原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)M. hyorhinis。
DNA檢(jian)測
DNA檢測(ce)(ce)需要(yao)將可疑樣(yang)品與指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)共同培(pei)養,因此一(yi)般需要(yao)幾天時(shi)間(jian)。DNA檢測(ce)(ce)所用的(de)指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)通常是細(xi)胞(bao)(bao)質區域較大的(de)Vero細(xi)胞(bao)(bao),如果原(yuan)(yuan)樣(yang)本(ben)中含有支原(yuan)(yuan)體(ti),那么當細(xi)胞(bao)(bao)DNA被熒光(guang)染料(如Hoechst染料)染色時(shi),就(jiu)可以(yi)在指示(shi)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)核周圍觀察到熒光(guang)斑點或熒光(guang)顆粒。分離培(pei)養法(fa)(fa)用來檢測(ce)(ce)支原(yuan)(yuan)體(ti)M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法(fa)(fa)可以(yi)準確的(de)將其檢測(ce)(ce)出來。
PCR法
PCR法也(ye)可以(yi)檢測(ce)M. hyorhinis菌株(zhu),PCR法檢測(ce)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)只需幾個(ge)小(xiao)時(shi),是zui快但也(ye)是zui不(bu)靈敏的支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢測(ce)方(fang)法。該方(fang)法采用針對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)DNA的引物用PCR檢測(ce)可疑樣本,其中PCR引物通常針對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的16S rRNA基因。在凝膠電泳過程中,支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)DNA會顯(xian)示為(wei)特(te)異(yi)性條帶,以(yi)此指示支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的存在。PCR法可以(yi)檢測(ce)大多數(shu)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti),但謹(jin)慎起(qi)見同時(shi)使用另一(yi)種檢測(ce)方(fang)法來進行驗證(zheng)。
酶(mei)學檢(jian)測和ELISA
此外,也還存(cun)在一(yi)些其(qi)他支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢測(ce)方法(fa)。例如酶(mei)(mei)學檢測(ce)是(shi)(shi)將(jiang)可(ke)疑樣本添加到特定(ding)底物(wu)中(zhong),在這一(yi)體(ti)(ti)(ti)系內支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)酶(mei)(mei)可(ke)以將(jiang)ADP轉化(hua)為ATP,隨后(hou)能利(li)用(yong)ATP發光(guang)的(de)luciferase酶(mei)(mei)就(jiu)可(ke)以指示(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)的(de)存(cun)在。ELISA也能用(yong)于(yu)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢測(ce),以ELISA法(fa)為基(ji)礎的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢測(ce)一(yi)般使(shi)用(yong)針對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)16S rRNA基(ji)因的(de)帶標記探針或抗體(ti)(ti)(ti),來檢測(ce)培養物(wu)中(zhong)是(shi)(shi)否含有支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)。
定期檢測
支(zhi)原體(ti)(ti)感(gan)染(ran)會使培(pei)(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)(bao)慢慢枯(ku)萎(wei),因此對培(pei)(pei)養(yang)細(xi)胞(bao)(bao)定期進行(xing)支(zhi)原體(ti)(ti)檢測非(fei)常重要。一般來說(shuo)每1至3個月(yue)就應(ying)該進行(xing)一次支(zhi)原體(ti)(ti)檢測。將定期支(zhi)原體(ti)(ti)檢測常規化堅(jian)持下去,是細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)(pei)養(yang)實驗室應(ying)對支(zhi)原體(ti)(ti)感(gan)染(ran)的關鍵。
HuT 78細胞|STR入庫
出(chu)庫公司 細胞代號 細(xi)胞名(ming)稱 備注
慧穎生(sheng)物 siha 人宮頸癌細胞 STR
慧穎(ying)生物(wu) MCF-7 人乳腺(xian)癌(ai)細胞 STR
慧穎生物(wu) Hela 人宮頸(jing)癌細胞 STR
慧穎生物 HCT116 人的結腸癌細胞 STR
慧穎生物 Hep G2 人肝癌細(xi)胞(bao) STR
慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細(xi)胞 STR
慧穎生物 DU 145 人(ren)前列腺癌細胞 STR
慧穎(ying)生物 HT1080 人纖維肉瘤細胞 STR
慧穎(ying)生物 T24 人(ren)膀胱(guang)移行細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao) STR
慧(hui)穎(ying)生物 T47D 人乳腺管癌細胞(bao) STR
慧穎生物 5637 人(ren)膀胱癌細胞(bao) STR
慧穎生(sheng)物 U251 人膠(jiao)質瘤細胞 STR
慧穎生物 PANC-1 人胰腺癌細胞 STR
培養工作中,主要從以下幾(ji)個(ge)方面來預(yu)防(fang)支原體的污染:
控制環(huan)境污染(ran);
嚴格實驗操作;
細胞(bao)培(pei)養基和(he)器材要保證無菌;
在細胞培養基中加入適(shi)量(liang)的抗生素。
支原(yuan)體(ti)(ti)污染細胞后(hou),特(te)別是重要(yao)(yao)的(de)細胞株,有必(bi)要(yao)(yao)清除支原(yuan)體(ti)(ti),常用方法有抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)處(chu)(chu)理、抗(kang)(kang)血清處(chu)(chu)理、抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)加抗(kang)(kang)血清和補體(ti)(ti)聯合處(chu)(chu)理。支原(yuan)體(ti)(ti)zui突出的(de)結構特(te)征是沒(mei)有細胞壁(bi),一般來講,對(dui)作用于細胞壁(bi)生(sheng)物合成(cheng)的(de)抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su),如(ru) -內酰胺(an)類(lei)、萬古(gu)霉素(su)(su)等*不(bu)敏感;對(dui)多粘菌素(su)(su)(polymycin)、利福平(ping)、磺胺(an)藥物普遍耐藥。對(dui)支原(yuan)體(ti)(ti)zui有抑制活性及常用于支原(yuan)體(ti)(ti)感染治療的(de)抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)是四環素(su)(su)類(lei)、大(da)環內酯(zhi)類(lei)及一些氟喹(kui)諾酮;其他類(lei)抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)(su)如(ru)氨基糖苷類(lei)、氯霉素(su)(su)對(dui)支原(yuan)體(ti)(ti)有較小抑制作用,所以常不(bu)用來作為支原(yuan)體(ti)(ti)感染的(de)化學治療劑。
支原(yuan)體污染在細胞培(pei)養中實際上是(shi)比較常見(jian)的, 據資料, 可達30%甚至更(geng)高(gao). 支原(yuan)體污染時細胞表現為長得不(bu)(bu)好,也(ye)不(bu)(bu)死亡, 同(tong)時, 培(pei)養基(ji)又是(shi)清亮的. 時間(jian)長達一周也(ye)沒有什么變化. 這時基(ji)本上可以(yi)判(pan)斷出是(shi)支原(yuan)體污染了(le), 愿意(yi)檢測就檢測一下(xia),不(bu)(bu)愿意(yi)直接用(yong)清除試劑處理吧.
避免細(xi)胞(bao)污染,可(ke)以(yi)從預防(fang)著(zhu)手(shou)(shou),超凈(jing)工作臺物品放置要合理、進(jin)入細(xi)胞(bao)房(fang)要換鞋和穿實(shi)驗(yan)服、實(shi)驗(yan)員戴(dai)手(shou)(shou)套后要用(yong)酒精等(deng)消毒、避免細(xi)胞(bao)交叉污染等(deng)等(deng)。
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