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LoVo細胞|STR入庫
產品名稱:LoVo細胞
是(shi)否STR:是(shi)
供應公(gong)司:慧穎生物
復蘇周期:1-2周
您是否(fou)在(zai)關(guan)心各種細(xi)(xi)(xi)(xi)胞系(xi)特(te)異性(xing)鑒定方法,是否(fou)被細(xi)(xi)(xi)(xi)菌,病毒,支原體污染,購買(mai)慧穎(ying)生物(wu)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞株細(xi)(xi)(xi)(xi)胞系(xi)值得放(fang)心,大部分(fen)細(xi)(xi)(xi)(xi)胞經(jing)過STR鑒定,支原體,細(xi)(xi)(xi)(xi)菌,病毒檢測后入(ru)庫。!
分離培養(yang)法
分離(li)培(pei)養(yang)法(fa)是支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)測的(de)金標(biao)方法(fa),其檢(jian)測精確度zui高。這種(zhong)方法(fa)是從(cong)可疑的(de)細胞培(pei)養(yang)體(ti)(ti)系(xi)中(zhong)取樣,并接(jie)種(zhong)到zui適(shi)宜支(zhi)原體(ti)(ti)生長(chang)的(de)瓊脂平(ping)板(ban)上。如(ru)果樣本中(zhong)含有(you)支(zhi)原體(ti)(ti),它們(men)就會在(zai)這種(zhong)瓊脂平(ping)板(ban)上*生長(chang),zui終(zhong)形成明顯可見的(de)特征性(xing)菌落。分離(li)培(pei)養(yang)法(fa)基本不(bu)會出現(xian)假(jia)陰性(xing)結果,因此被(bei)譽為(wei)支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)測金標(biao)準(zhun)。不(bu)過分離(li)培(pei)養(yang)法(fa)也(ye)存在(zai)兩個弊端,一是檢(jian)測時(shi)間太長(chang),支(zhi)原體(ti)(ti)要長(chang)出明顯克隆至少需要4周時(shi)間。二是盡管可以(yi)檢(jian)測絕大多數支(zhi)原體(ti)(ti)種(zhong)類,分離(li)培(pei)養(yang)法(fa)也(ye)有(you)力所不(bu)及(ji)的(de)時(shi)候(hou),例如(ru)支(zhi)原體(ti)(ti)M. hyorhinis。
DNA檢測
DNA檢(jian)測(ce)需(xu)(xu)要(yao)將(jiang)可疑樣(yang)品與指示細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)共同培養(yang),因此一般需(xu)(xu)要(yao)幾天時間。DNA檢(jian)測(ce)所(suo)用的(de)(de)指示細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)通常是細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)質區域較大的(de)(de)Vero細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao),如(ru)果原樣(yang)本中含有支(zhi)原體,那么當細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)DNA被熒光染(ran)料(如(ru)Hoechst染(ran)料)染(ran)色時,就可以(yi)(yi)在指示細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的(de)(de)核周圍觀察(cha)到(dao)熒光斑點(dian)或熒光顆粒。分離培養(yang)法用來檢(jian)測(ce)支(zhi)原體M. hyorhinis菌株并不可靠,而DNA法可以(yi)(yi)準(zhun)確的(de)(de)將(jiang)其檢(jian)測(ce)出(chu)來。
PCR法
PCR法(fa)(fa)也可(ke)(ke)以(yi)檢(jian)測M. hyorhinis菌(jun)株,PCR法(fa)(fa)檢(jian)測支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)只需(xu)幾(ji)個(ge)小時,是(shi)zui快(kuai)但也是(shi)zui不(bu)靈敏的支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢(jian)測方(fang)法(fa)(fa)。該方(fang)法(fa)(fa)采(cai)用針(zhen)對支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)DNA的引物(wu)用PCR檢(jian)測可(ke)(ke)疑樣本,其(qi)中PCR引物(wu)通常針(zhen)對支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的16S rRNA基(ji)因。在凝膠(jiao)電泳過程中,支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)DNA會(hui)顯示為特異性條帶(dai),以(yi)此指示支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)的存在。PCR法(fa)(fa)可(ke)(ke)以(yi)檢(jian)測大多數支(zhi)原(yuan)體(ti)(ti),但謹慎起見同(tong)時使用另一種(zhong)檢(jian)測方(fang)法(fa)(fa)來(lai)進行驗證。
酶學檢測和ELISA
此外,也還(huan)存在一些其他支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)方法。例如酶學檢(jian)測(ce)是(shi)(shi)將(jiang)可疑樣本添加到特(te)定底物中,在這一體(ti)(ti)系內支(zhi)原體(ti)(ti)的(de)酶可以(yi)將(jiang)ADP轉化為ATP,隨后能(neng)利用(yong)ATP發光的(de)luciferase酶就(jiu)可以(yi)指示支(zhi)原體(ti)(ti)的(de)存在。ELISA也能(neng)用(yong)于支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)測(ce),以(yi)ELISA法為基礎的(de)支(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)測(ce)一般使用(yong)針對支(zhi)原體(ti)(ti)16S rRNA基因的(de)帶(dai)標記(ji)探針或抗體(ti)(ti),來檢(jian)測(ce)培養(yang)物中是(shi)(shi)否含有(you)支(zhi)原體(ti)(ti)。
定期檢測
支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體感染(ran)會使培(pei)養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)慢慢枯萎(wei),因此對培(pei)養(yang)細(xi)(xi)胞(bao)定期進行支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應該(gai)進行一次支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測。將定期支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體檢測常規化堅持下去,是細(xi)(xi)胞(bao)培(pei)養(yang)實驗(yan)室應對支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體感染(ran)的關鍵。
LoVo細胞|STR入庫
出(chu)庫公(gong)司 細胞代號 細胞名稱 備注
慧穎生物 siha 人(ren)宮頸癌細胞 STR
慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌細(xi)胞 STR
慧穎生物 Hela 人宮頸癌細胞 STR
慧穎生物 HCT116 人的結(jie)腸癌細胞(bao) STR
慧穎生物 Hep G2 人(ren)肝癌細胞(bao) STR
慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR
慧穎生物 DU 145 人(ren)前列腺(xian)癌細胞 STR
慧穎生物(wu) HT1080 人纖(xian)維肉瘤細胞 STR
慧(hui)穎生物(wu) T24 人(ren)膀胱移行細(xi)胞(bao)癌(ai)細(xi)胞(bao) STR
慧(hui)穎生物(wu) T47D 人乳腺管癌細胞(bao) STR
慧穎生物 5637 人膀胱癌細胞 STR
慧穎生物 U251 人膠質瘤(liu)細胞 STR
慧穎生物 PANC-1 人胰腺癌(ai)細胞(bao) STR
培養工作中,主(zhu)要從以(yi)下幾個方面來預防支原體的污染:
控制環境污染;
嚴格實(shi)驗操作;
細胞培(pei)養基和(he)器材要保證無(wu)菌;
在(zai)細(xi)胞(bao)培養基中加入適量(liang)的抗生(sheng)素。
支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)污染(ran)細胞后,特別是(shi)重要(yao)的(de)(de)細胞株,有(you)(you)必要(yao)清除支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti),常(chang)用(yong)方法(fa)有(you)(you)抗生(sheng)素(su)(su)處(chu)理、抗血(xue)清處(chu)理、抗生(sheng)素(su)(su)加(jia)抗血(xue)清和補(bu)體(ti)聯合處(chu)理。支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)zui突出的(de)(de)結構特征是(shi)沒有(you)(you)細胞壁(bi),一(yi)般來講,對(dui)作用(yong)于細胞壁(bi)生(sheng)物(wu)合成的(de)(de)抗生(sheng)素(su)(su),如 -內酰胺類(lei)、萬古(gu)霉(mei)素(su)(su)等*不(bu)敏感;對(dui)多粘菌素(su)(su)(polymycin)、利福平、磺胺藥(yao)(yao)物(wu)普遍耐藥(yao)(yao)。對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)zui有(you)(you)抑制(zhi)活性及(ji)常(chang)用(yong)于支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)感染(ran)治療(liao)的(de)(de)抗生(sheng)素(su)(su)是(shi)四環素(su)(su)類(lei)、大環內酯類(lei)及(ji)一(yi)些氟喹諾酮;其他(ta)類(lei)抗生(sheng)素(su)(su)如氨基糖苷(gan)類(lei)、氯霉(mei)素(su)(su)對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)有(you)(you)較小抑制(zhi)作用(yong),所(suo)以常(chang)不(bu)用(yong)來作為(wei)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)感染(ran)的(de)(de)化學(xue)治療(liao)劑(ji)。
支原(yuan)(yuan)體(ti)污染在細胞(bao)培養中(zhong)實際上(shang)是比較常(chang)見的, 據資料, 可(ke)(ke)達30%甚至更高. 支原(yuan)(yuan)體(ti)污染時細胞(bao)表現為長(chang)得不好,也(ye)不死亡, 同時, 培養基又(you)是清亮的. 時間長(chang)達一周也(ye)沒有什么變化. 這時基本上(shang)可(ke)(ke)以判斷出是支原(yuan)(yuan)體(ti)污染了, 愿意(yi)檢(jian)測就檢(jian)測一下,不愿意(yi)直接用清除(chu)試劑(ji)處理吧.
避(bi)免(mian)細(xi)(xi)胞(bao)污(wu)染(ran),可以從預防著手,超凈工作臺物品(pin)放置要(yao)合理、進入細(xi)(xi)胞(bao)房(fang)要(yao)換鞋(xie)和穿(chuan)實驗服、實驗員戴(dai)手套后(hou)要(yao)用酒(jiu)精(jing)等(deng)(deng)消毒、避(bi)免(mian)細(xi)(xi)胞(bao)交叉污(wu)染(ran)等(deng)(deng)等(deng)(deng)。