Hep3B細胞|STR入庫

產品名稱：Hep3B細胞

是否(fou)STR：是

供(gong)應(ying)公(gong)司：慧穎(ying)生物

復蘇周期：1-2周

您是否在(zai)關(guan)心各種細(xi)胞系(xi)特異(yi)性鑒(jian)定方法，是否被細(xi)菌，病(bing)毒，支(zhi)(zhi)原體污染，購(gou)買慧穎生物細(xi)胞株細(xi)胞系(xi)值得(de)放心，大部分(fen)細(xi)胞經過STR鑒(jian)定，支(zhi)(zhi)原體，細(xi)菌，病(bing)毒檢(jian)測后(hou)入庫。！

分(fen)離培(pei)養法

分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)(fa)(fa)是支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)(ce)的金標(biao)方法(fa)(fa)(fa)，其檢(jian)測(ce)(ce)精確度zui高。這種方法(fa)(fa)(fa)是從可(ke)疑的細(xi)胞培(pei)養(yang)體(ti)(ti)(ti)系中取樣(yang)，并接種到zui適(shi)宜支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)生長(chang)(chang)的瓊脂平(ping)板(ban)上(shang)。如果(guo)(guo)樣(yang)本中含有支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)，它(ta)們就會(hui)在這種瓊脂平(ping)板(ban)上(shang)*生長(chang)(chang)，zui終形成明顯(xian)可(ke)見(jian)的特(te)征性(xing)菌落。分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)(fa)(fa)基本不(bu)會(hui)出(chu)現假陰性(xing)結果(guo)(guo)，因此(ci)被譽(yu)為支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)(ce)金標(biao)準。不(bu)過分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)(fa)(fa)也存在兩個(ge)弊(bi)端，一(yi)是檢(jian)測(ce)(ce)時(shi)間太(tai)長(chang)(chang)，支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)要長(chang)(chang)出(chu)明顯(xian)克(ke)隆至(zhi)少需要4周時(shi)間。二是盡管可(ke)以檢(jian)測(ce)(ce)絕大多數(shu)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)種類，分(fen)離(li)(li)培(pei)養(yang)法(fa)(fa)(fa)也有力所不(bu)及的時(shi)候，例如支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)M. hyorhinis。

DNA檢(jian)測

DNA檢測(ce)(ce)需要(yao)將可(ke)(ke)疑(yi)樣品與指(zhi)示(shi)細(xi)(xi)胞共同培養(yang)(yang)，因(yin)此一般需要(yao)幾天(tian)時(shi)間。DNA檢測(ce)(ce)所用的(de)指(zhi)示(shi)細(xi)(xi)胞通常是細(xi)(xi)胞質區域較大的(de)Vero細(xi)(xi)胞，如(ru)果原(yuan)(yuan)樣本中含有支原(yuan)(yuan)體，那(nei)么(me)當細(xi)(xi)胞DNA被熒(ying)光(guang)(guang)(guang)染料（如(ru)Hoechst染料）染色時(shi)，就(jiu)可(ke)(ke)以在指(zhi)示(shi)細(xi)(xi)胞的(de)核周圍觀察到熒(ying)光(guang)(guang)(guang)斑點或熒(ying)光(guang)(guang)(guang)顆(ke)粒。分離培養(yang)(yang)法(fa)用來(lai)檢測(ce)(ce)支原(yuan)(yuan)體M. hyorhinis菌株并不可(ke)(ke)靠，而DNA法(fa)可(ke)(ke)以準確的(de)將其檢測(ce)(ce)出來(lai)。

PCR法

PCR法(fa)(fa)(fa)也可(ke)以(yi)(yi)檢測(ce)(ce)M. hyorhinis菌株，PCR法(fa)(fa)(fa)檢測(ce)(ce)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)只需幾個小時，是(shi)zui快但(dan)也是(shi)zui不靈敏的(de)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)檢測(ce)(ce)方(fang)法(fa)(fa)(fa)。該(gai)方(fang)法(fa)(fa)(fa)采用(yong)針對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA的(de)引物用(yong)PCR檢測(ce)(ce)可(ke)疑樣本(ben)，其中PCR引物通(tong)常針對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)16S rRNA基因(yin)。在(zai)凝(ning)膠電泳(yong)過(guo)程中，支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)DNA會顯示為特異性條帶，以(yi)(yi)此指示支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)的(de)存在(zai)。PCR法(fa)(fa)(fa)可(ke)以(yi)(yi)檢測(ce)(ce)大多(duo)數支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)，但(dan)謹(jin)慎起見(jian)同時使用(yong)另一種檢測(ce)(ce)方(fang)法(fa)(fa)(fa)來進行驗證。

酶學檢測和(he)ELISA

此外，也還存在一(yi)些其他支原體(ti)(ti)(ti)檢測方(fang)法。例如酶學(xue)檢測是(shi)將可(ke)疑樣本添加到特定(ding)底物中，在這一(yi)體(ti)(ti)(ti)系內支原體(ti)(ti)(ti)的(de)酶可(ke)以(yi)將ADP轉化為(wei)ATP，隨后能利用(yong)ATP發光的(de)luciferase酶就可(ke)以(yi)指(zhi)示支原體(ti)(ti)(ti)的(de)存在。ELISA也能用(yong)于支原體(ti)(ti)(ti)檢測，以(yi)ELISA法為(wei)基(ji)礎的(de)支原體(ti)(ti)(ti)檢測一(yi)般使用(yong)針對(dui)支原體(ti)(ti)(ti)16S rRNA基(ji)因的(de)帶標記(ji)探針或抗體(ti)(ti)(ti)，來檢測培養物中是(shi)否含有(you)支原體(ti)(ti)(ti)。

定(ding)期檢測

支(zhi)原(yuan)體(ti)感染(ran)會(hui)使培養細胞慢慢枯萎，因此對培養細胞定期(qi)(qi)進行(xing)支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)非常重要(yao)。一般來說每(mei)1至3個月就應該進行(xing)一次(ci)支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)。將定期(qi)(qi)支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)測(ce)常規化(hua)堅持(chi)下去(qu)，是細胞培養實驗室(shi)應對支(zhi)原(yuan)體(ti)感染(ran)的關鍵。

Hep3B細胞|STR入庫

出庫公司(si) 細胞代號 細(xi)胞名稱 備注

慧穎生(sheng)物 siha 人(ren)宮頸癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 MCF-7 人乳腺癌細胞 STR

慧穎生物 Hela 人宮頸(jing)癌(ai)細胞 STR

慧穎生物 HCT116 人的(de)結腸癌(ai)細胞 STR

慧穎生物 Hep G2 人(ren)肝癌細胞 STR

慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 DU 145 人前(qian)列(lie)腺癌細(xi)胞 STR

慧穎(ying)生物 HT1080 人纖維肉瘤細胞 STR

慧穎生物 T24 人(ren)膀(bang)胱移行細(xi)胞癌(ai)細(xi)胞 STR

慧穎生物 T47D 人乳腺管癌(ai)細胞(bao) STR

慧(hui)穎生物(wu) 5637 人膀胱癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 U251 人膠(jiao)質瘤細胞(bao) STR

慧(hui)穎生物 PANC-1 人胰腺癌細胞 STR

  培(pei)養(yang)工作中，主要(yao)從以(yi)下幾(ji)個方面來預防支原(yuan)體的(de)污染：

控制環境污染(ran);

嚴格實驗操作;

細胞(bao)培養(yang)基和(he)器(qi)材(cai)要保證無菌;

在細胞培養基中加(jia)入適量的抗生素(su)。

支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)污染(ran)細(xi)胞后(hou)，特別是重(zhong)要的(de)(de)細(xi)胞株，有(you)必要清(qing)除支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)，常(chang)用(yong)方(fang)法有(you)抗(kang)生(sheng)素(su)處(chu)(chu)理、抗(kang)血(xue)清(qing)處(chu)(chu)理、抗(kang)生(sheng)素(su)加抗(kang)血(xue)清(qing)和補體(ti)聯合處(chu)(chu)理。支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)zui突出的(de)(de)結構特征是沒(mei)有(you)細(xi)胞壁，一般來講，對作(zuo)用(yong)于(yu)細(xi)胞壁生(sheng)物合成的(de)(de)抗(kang)生(sheng)素(su)，如 -內(nei)酰胺類(lei)(lei)、萬古霉素(su)等*不敏感;對多粘(zhan)菌素(su)(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)zui有(you)抑制(zhi)活性及常(chang)用(yong)于(yu)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)感染(ran)治療的(de)(de)抗(kang)生(sheng)素(su)是四環素(su)類(lei)(lei)、大環內(nei)酯類(lei)(lei)及一些氟喹(kui)諾酮;其他類(lei)(lei)抗(kang)生(sheng)素(su)如氨基糖苷類(lei)(lei)、氯(lv)霉素(su)對支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)有(you)較小抑制(zhi)作(zuo)用(yong)，所以常(chang)不用(yong)來作(zuo)為(wei)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)感染(ran)的(de)(de)化學(xue)治療劑。

支(zhi)原體(ti)污染(ran)在(zai)細胞培(pei)養(yang)中實(shi)際上是比較常見的, 據資(zi)料(liao), 可(ke)達(da)30%甚至更高. 支(zhi)原體(ti)污染(ran)時細胞表現為長得不好,也不死(si)亡, 同時, 培(pei)養(yang)基又是清亮的. 時間長達(da)一周(zhou)也沒(mei)有什(shen)么變化. 這時基本上可(ke)以判(pan)斷出是支(zhi)原體(ti)污染(ran)了(le), 愿(yuan)(yuan)意檢(jian)測(ce)就檢(jian)測(ce)一下(xia),不愿(yuan)(yuan)意直接用清除試劑處理吧.

避(bi)免細胞污染，可以(yi)從預防著手(shou)(shou)，超凈(jing)工(gong)作臺物品放置要合(he)理、進入細胞房要換鞋和穿實(shi)驗服、實(shi)驗員戴手(shou)(shou)套后要用酒精等消毒、避(bi)免細胞交叉污染等等。