HCCC-9810細胞|STR入庫

產品名稱：HCCC-9810細胞

是(shi)(shi)否STR：是(shi)(shi)

供(gong)應公司(si)：慧穎生物

復蘇周期：1-2周

您是否在關(guan)心各種細(xi)(xi)胞(bao)系特異性鑒(jian)定方法，是否被細(xi)(xi)菌，病(bing)毒，支原(yuan)體污染，購買慧穎(ying)生物細(xi)(xi)胞(bao)株細(xi)(xi)胞(bao)系值得放心，大(da)部分細(xi)(xi)胞(bao)經(jing)過STR鑒(jian)定，支原(yuan)體，細(xi)(xi)菌，病(bing)毒檢測(ce)后入庫(ku)。！

分離培養法

分離(li)培養法(fa)是(shi)支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)測(ce)的(de)(de)(de)金標(biao)方法(fa)，其檢(jian)(jian)測(ce)精確度(du)zui高(gao)。這種方法(fa)是(shi)從可疑的(de)(de)(de)細胞培養體(ti)系中取樣，并接種到zui適宜支(zhi)原(yuan)體(ti)生(sheng)長的(de)(de)(de)瓊(qiong)脂平(ping)板上(shang)。如(ru)果樣本中含有支(zhi)原(yuan)體(ti)，它們就會在這種瓊(qiong)脂平(ping)板上(shang)*生(sheng)長，zui終形(xing)成明顯(xian)可見的(de)(de)(de)特征性菌落。分離(li)培養法(fa)基本不(bu)(bu)會出現假陰(yin)性結果，因此被(bei)譽為支(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)測(ce)金標(biao)準(zhun)。不(bu)(bu)過(guo)分離(li)培養法(fa)也(ye)存在兩個弊端，一是(shi)檢(jian)(jian)測(ce)時間太長，支(zhi)原(yuan)體(ti)要長出明顯(xian)克隆至少需要4周時間。二是(shi)盡管可以檢(jian)(jian)測(ce)絕大多數支(zhi)原(yuan)體(ti)種類(lei)，分離(li)培養法(fa)也(ye)有力所不(bu)(bu)及的(de)(de)(de)時候(hou)，例如(ru)支(zhi)原(yuan)體(ti)M. hyorhinis。

DNA檢測

DNA檢(jian)測需要將可疑樣(yang)品與指(zhi)示(shi)細(xi)胞(bao)共同(tong)培(pei)養，因此一般需要幾天時間。DNA檢(jian)測所用的指(zhi)示(shi)細(xi)胞(bao)通(tong)常是細(xi)胞(bao)質(zhi)區域較大的Vero細(xi)胞(bao)，如(ru)果原(yuan)樣(yang)本中含有(you)支(zhi)原(yuan)體(ti)，那么當細(xi)胞(bao)DNA被熒光染料（如(ru)Hoechst染料）染色(se)時，就可以(yi)在指(zhi)示(shi)細(xi)胞(bao)的核周圍觀察到熒光斑(ban)點(dian)或熒光顆(ke)粒。分離培(pei)養法用來(lai)檢(jian)測支(zhi)原(yuan)體(ti)M. hyorhinis菌(jun)株并(bing)不可靠，而DNA法可以(yi)準確的將其檢(jian)測出來(lai)。

PCR法

PCR法(fa)(fa)也可以檢(jian)(jian)測M. hyorhinis菌(jun)株(zhu)，PCR法(fa)(fa)檢(jian)(jian)測支原體(ti)只需(xu)幾個小(xiao)時，是(shi)zui快(kuai)但也是(shi)zui不靈(ling)敏的(de)支原體(ti)檢(jian)(jian)測方法(fa)(fa)。該方法(fa)(fa)采(cai)用針(zhen)對支原體(ti)DNA的(de)引(yin)物(wu)用PCR檢(jian)(jian)測可疑樣本，其中PCR引(yin)物(wu)通常針(zhen)對支原體(ti)的(de)16S rRNA基(ji)因(yin)。在凝(ning)膠電泳過(guo)程中，支原體(ti)DNA會顯示為特異性條帶，以此指示支原體(ti)的(de)存在。PCR法(fa)(fa)可以檢(jian)(jian)測大多(duo)數支原體(ti)，但謹(jin)慎起見(jian)同時使用另一(yi)種檢(jian)(jian)測方法(fa)(fa)來進行驗證。

酶學檢測和(he)ELISA

此(ci)外，也(ye)(ye)還存在(zai)(zai)一(yi)(yi)些(xie)其他支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測方法。例如酶(mei)學(xue)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測是將(jiang)可(ke)疑樣本添(tian)加到特(te)定底物(wu)中，在(zai)(zai)這一(yi)(yi)體(ti)系內支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)的酶(mei)可(ke)以(yi)將(jiang)ADP轉化為(wei)ATP，隨后能利用(yong)ATP發光(guang)的luciferase酶(mei)就可(ke)以(yi)指示支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)的存在(zai)(zai)。ELISA也(ye)(ye)能用(yong)于支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測，以(yi)ELISA法為(wei)基礎的支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)檢(jian)(jian)(jian)(jian)測一(yi)(yi)般使用(yong)針(zhen)對支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)16S rRNA基因的帶標記探針(zhen)或抗體(ti)，來檢(jian)(jian)(jian)(jian)測培養(yang)物(wu)中是否含有(you)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)。

定期檢測

支原體感(gan)染(ran)會使培(pei)養(yang)細胞(bao)慢(man)慢(man)枯(ku)萎，因此對培(pei)養(yang)細胞(bao)定(ding)期進行支原體檢測非常重要。一(yi)般(ban)來說每1至3個月就(jiu)應該進行一(yi)次支原體檢測。將定(ding)期支原體檢測常規化堅持下去，是細胞(bao)培(pei)養(yang)實(shi)驗室應對支原體感(gan)染(ran)的關鍵。

HCCC-9810細胞|STR入庫

出庫公司 細胞代(dai)號(hao) 細胞名稱(cheng) 備注

慧穎(ying)生物(wu) siha 人宮(gong)頸癌細胞 STR

慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌細胞 STR

慧穎生物 Hela 人宮頸(jing)癌(ai)細胞(bao) STR

慧穎生物 HCT116 人的結腸癌細胞 STR

慧(hui)穎生物 Hep G2 人肝癌細胞 STR

慧(hui)穎生物 NCI-H1437 人肺(fei)癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 DU 145 人前列腺癌細胞 STR

慧穎生物 HT1080 人纖維肉瘤細胞 STR

慧穎(ying)生物 T24 人(ren)膀(bang)胱移行細胞(bao)癌細胞(bao) STR

慧穎生物 T47D 人乳腺管(guan)癌(ai)細胞 STR

慧穎生物 5637 人膀胱癌細(xi)胞 STR

慧穎(ying)生(sheng)物(wu) U251 人膠(jiao)質瘤細胞 STR

慧穎(ying)生物(wu) PANC-1 人胰腺癌(ai)細胞 STR

  培養工(gong)作(zuo)中，主要從以下幾個(ge)方面來(lai)預防支原體(ti)的污染：

控制環(huan)境污染;

嚴格實驗操作(zuo);

細(xi)胞培養基和器材要保證無菌;

在細胞培養(yang)基中加(jia)入適(shi)量的抗生素(su)。

支(zhi)原(yuan)體(ti)污染細胞后，特別是(shi)(shi)重要的(de)細胞株，有必要清除支(zhi)原(yuan)體(ti)，常(chang)用方法有抗(kang)生素處理(li)(li)、抗(kang)血清處理(li)(li)、抗(kang)生素加抗(kang)血清和(he)補體(ti)聯(lian)合處理(li)(li)。支(zhi)原(yuan)體(ti)zui突出的(de)結構特征是(shi)(shi)沒有細胞壁(bi)，一般來(lai)(lai)講，對作(zuo)用于細胞壁(bi)生物合成(cheng)的(de)抗(kang)生素，如(ru) -內酰胺類、萬古霉(mei)素等*不敏感;對多粘(zhan)菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥(yao)物普遍耐藥(yao)。對支(zhi)原(yuan)體(ti)zui有抑制活性及常(chang)用于支(zhi)原(yuan)體(ti)感染治療(liao)的(de)抗(kang)生素是(shi)(shi)四環(huan)素類、大環(huan)內酯(zhi)類及一些氟喹諾酮;其(qi)他類抗(kang)生素如(ru)氨基糖(tang)苷類、氯霉(mei)素對支(zhi)原(yuan)體(ti)有較小(xiao)抑制作(zuo)用，所以(yi)常(chang)不用來(lai)(lai)作(zuo)為支(zhi)原(yuan)體(ti)感染的(de)化學治療(liao)劑(ji)。

支(zhi)原(yuan)體污染在細胞培(pei)養中(zhong)實際(ji)上是(shi)比較常(chang)見的, 據資料, 可達30%甚至更(geng)高. 支(zhi)原(yuan)體污染時(shi)(shi)細胞表現為長(chang)(chang)得不(bu)好(hao),也不(bu)死亡(wang), 同時(shi)(shi), 培(pei)養基(ji)又是(shi)清(qing)亮的. 時(shi)(shi)間長(chang)(chang)達一(yi)周也沒有什么變化. 這時(shi)(shi)基(ji)本(ben)上可以判斷出是(shi)支(zhi)原(yuan)體污染了, 愿(yuan)意檢測就檢測一(yi)下,不(bu)愿(yuan)意直接用清(qing)除試劑處理吧(ba).

避免(mian)(mian)細(xi)胞污(wu)染(ran)，可以從(cong)預防(fang)著手，超凈工作(zuo)臺物品放(fang)置要(yao)(yao)合理、進入細(xi)胞房要(yao)(yao)換鞋和穿實驗服、實驗員戴手套后要(yao)(yao)用酒精等(deng)消(xiao)毒、避免(mian)(mian)細(xi)胞交叉污(wu)染(ran)等(deng)等(deng)。