HuH-7細胞|STR入庫

產品名稱：HuH-7細胞

是(shi)否(fou)STR：是(shi)

供應公司：慧穎生物

復蘇周期：1-2周

您是否在關(guan)心各種(zhong)細(xi)(xi)(xi)胞系(xi)特異性鑒定方法，是否被細(xi)(xi)(xi)菌，病毒，支原(yuan)體污(wu)染，購買慧穎生物細(xi)(xi)(xi)胞株(zhu)細(xi)(xi)(xi)胞系(xi)值得放心，大部分細(xi)(xi)(xi)胞經過STR鑒定，支原(yuan)體，細(xi)(xi)(xi)菌，病毒檢測后入庫(ku)。！

分離培養法(fa)

分離(li)(li)培養(yang)法(fa)(fa)(fa)是(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)測(ce)的(de)(de)金(jin)標方法(fa)(fa)(fa)，其檢(jian)(jian)測(ce)精確度(du)zui高(gao)。這種(zhong)方法(fa)(fa)(fa)是(shi)從(cong)可(ke)疑的(de)(de)細胞培養(yang)體(ti)(ti)(ti)(ti)系中取樣，并接種(zhong)到zui適宜(yi)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)生(sheng)長(chang)的(de)(de)瓊脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)上。如果樣本(ben)中含(han)有(you)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)，它們(men)就會在這種(zhong)瓊脂(zhi)平(ping)(ping)板(ban)(ban)上*生(sheng)長(chang)，zui終形成明(ming)顯(xian)可(ke)見(jian)的(de)(de)特征性菌(jun)落。分離(li)(li)培養(yang)法(fa)(fa)(fa)基本(ben)不(bu)會出(chu)現假陰性結果，因(yin)此被(bei)譽為(wei)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)檢(jian)(jian)測(ce)金(jin)標準。不(bu)過分離(li)(li)培養(yang)法(fa)(fa)(fa)也(ye)存在兩個弊(bi)端(duan)，一(yi)是(shi)檢(jian)(jian)測(ce)時(shi)(shi)間太長(chang)，支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)要長(chang)出(chu)明(ming)顯(xian)克隆至(zhi)少(shao)需要4周時(shi)(shi)間。二是(shi)盡(jin)管(guan)可(ke)以檢(jian)(jian)測(ce)絕大多(duo)數支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)種(zhong)類(lei)，分離(li)(li)培養(yang)法(fa)(fa)(fa)也(ye)有(you)力(li)所不(bu)及的(de)(de)時(shi)(shi)候，例如支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)M. hyorhinis。

DNA檢測(ce)

DNA檢測需要將可(ke)(ke)疑樣品與指(zhi)(zhi)示細(xi)胞共同(tong)培養，因此一般需要幾(ji)天時(shi)間。DNA檢測所用(yong)(yong)的指(zhi)(zhi)示細(xi)胞通常是細(xi)胞質(zhi)區域較大(da)的Vero細(xi)胞，如果原(yuan)樣本中含有支原(yuan)體(ti)，那么當細(xi)胞DNA被熒光染料（如Hoechst染料）染色時(shi)，就可(ke)(ke)以(yi)在指(zhi)(zhi)示細(xi)胞的核周圍觀察(cha)到(dao)熒光斑點(dian)或熒光顆粒(li)。分離(li)培養法(fa)用(yong)(yong)來檢測支原(yuan)體(ti)M. hyorhinis菌株并不可(ke)(ke)靠，而(er)DNA法(fa)可(ke)(ke)以(yi)準確的將其檢測出來。

PCR法(fa)

PCR法也(ye)可以(yi)檢(jian)測(ce)M. hyorhinis菌(jun)株，PCR法檢(jian)測(ce)支(zhi)原(yuan)體只需幾個小時，是zui快但(dan)也(ye)是zui不靈(ling)敏的(de)支(zhi)原(yuan)體檢(jian)測(ce)方法。該方法采(cai)用(yong)針對支(zhi)原(yuan)體DNA的(de)引物用(yong)PCR檢(jian)測(ce)可疑樣本，其(qi)中PCR引物通常針對支(zhi)原(yuan)體的(de)16S rRNA基因(yin)。在凝膠電泳過程中，支(zhi)原(yuan)體DNA會顯示(shi)為特異性條帶，以(yi)此指(zhi)示(shi)支(zhi)原(yuan)體的(de)存(cun)在。PCR法可以(yi)檢(jian)測(ce)大多(duo)數支(zhi)原(yuan)體，但(dan)謹慎起見同(tong)時使用(yong)另一(yi)種檢(jian)測(ce)方法來進行驗(yan)證。

酶學檢測和ELISA

此外，也(ye)(ye)還(huan)存在一些其他支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測(ce)方法。例如酶(mei)學(xue)檢(jian)(jian)測(ce)是(shi)將可(ke)(ke)(ke)疑樣(yang)本添(tian)加到(dao)特定底物(wu)中，在這一體(ti)(ti)系(xi)內支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)的(de)酶(mei)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)將ADP轉化為(wei)(wei)ATP，隨(sui)后能利(li)用ATP發光(guang)的(de)luciferase酶(mei)就(jiu)可(ke)(ke)(ke)以(yi)(yi)指示支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)的(de)存在。ELISA也(ye)(ye)能用于支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測(ce)，以(yi)(yi)ELISA法為(wei)(wei)基礎的(de)支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)檢(jian)(jian)測(ce)一般使用針對支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)16S rRNA基因的(de)帶標記探(tan)針或抗體(ti)(ti)，來(lai)檢(jian)(jian)測(ce)培養物(wu)中是(shi)否含(han)有支(zhi)(zhi)原體(ti)(ti)。

定期檢測

支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)感(gan)染(ran)會使(shi)培養細胞(bao)慢慢枯萎，因此對(dui)培養細胞(bao)定期進行(xing)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢測非常重要。一般來說每1至3個月就應該進行(xing)一次支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢測。將定期支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)檢測常規(gui)化堅持下去，是(shi)細胞(bao)培養實驗室應對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)感(gan)染(ran)的關鍵。

HuH-7細胞|STR入庫

出庫公司(si) 細胞代號 細胞名(ming)稱 備注

慧穎生物 siha 人(ren)宮(gong)頸癌(ai)細胞(bao) STR

慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌(ai)細胞(bao) STR

慧穎生物(wu) Hela 人宮頸癌細胞 STR

慧穎生(sheng)物 HCT116 人的結腸癌(ai)細胞 STR

慧穎生(sheng)物 Hep G2 人肝癌細胞 STR

慧穎(ying)生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR

慧穎生物 DU 145 人前(qian)列腺癌(ai)細胞(bao) STR

慧穎(ying)生物 HT1080 人(ren)纖維肉瘤細胞 STR

慧穎生物 T24 人(ren)膀(bang)胱移行細胞癌(ai)細胞 STR

慧穎生物(wu) T47D 人乳腺管癌細胞 STR

慧穎生物 5637 人膀胱(guang)癌細胞 STR

慧穎(ying)生物 U251 人膠質瘤細胞 STR

慧穎生物 PANC-1 人胰腺癌(ai)細(xi)胞 STR

  培養工(gong)作中，主要從以下幾個方面來預(yu)防支原體的污染：

控制環境污染;

嚴格實驗操作;

細胞培養(yang)基(ji)和器材要(yao)保證(zheng)無菌(jun);

在(zai)細胞培養(yang)基中加入(ru)適量的抗(kang)生素。

支(zhi)原體(ti)(ti)污染細胞(bao)后，特別是(shi)重要(yao)的(de)細胞(bao)株，有(you)必要(yao)清(qing)除支(zhi)原體(ti)(ti)，常用方法有(you)抗(kang)(kang)生(sheng)素處(chu)理(li)、抗(kang)(kang)血(xue)清(qing)處(chu)理(li)、抗(kang)(kang)生(sheng)素加抗(kang)(kang)血(xue)清(qing)和補(bu)體(ti)(ti)聯(lian)合(he)處(chu)理(li)。支(zhi)原體(ti)(ti)zui突出的(de)結構(gou)特征(zheng)是(shi)沒有(you)細胞(bao)壁，一(yi)般來講(jiang)，對(dui)作(zuo)(zuo)(zuo)用于細胞(bao)壁生(sheng)物合(he)成(cheng)的(de)抗(kang)(kang)生(sheng)素，如 -內酰胺類(lei)(lei)(lei)、萬古霉(mei)素等*不敏感(gan);對(dui)多粘(zhan)菌素(polymycin)、利福平、磺胺藥物普遍耐藥。對(dui)支(zhi)原體(ti)(ti)zui有(you)抑制活(huo)性(xing)及常用于支(zhi)原體(ti)(ti)感(gan)染治療(liao)的(de)抗(kang)(kang)生(sheng)素是(shi)四環素類(lei)(lei)(lei)、大環內酯類(lei)(lei)(lei)及一(yi)些氟喹諾酮;其他類(lei)(lei)(lei)抗(kang)(kang)生(sheng)素如氨基(ji)糖苷類(lei)(lei)(lei)、氯霉(mei)素對(dui)支(zhi)原體(ti)(ti)有(you)較小(xiao)抑制作(zuo)(zuo)(zuo)用，所以常不用來作(zuo)(zuo)(zuo)為支(zhi)原體(ti)(ti)感(gan)染的(de)化學治療(liao)劑。

支(zhi)原(yuan)體污染在細胞培養中實(shi)際(ji)上是(shi)(shi)比較常見的, 據資料(liao), 可(ke)達30%甚至更高(gao). 支(zhi)原(yuan)體污染時細胞表(biao)現為長得不(bu)好,也(ye)不(bu)死亡(wang), 同時, 培養基又是(shi)(shi)清(qing)亮(liang)的. 時間長達一(yi)周(zhou)也(ye)沒(mei)有什(shen)么(me)變化. 這時基本上可(ke)以(yi)判(pan)斷出是(shi)(shi)支(zhi)原(yuan)體污染了, 愿(yuan)意檢測就檢測一(yi)下,不(bu)愿(yuan)意直(zhi)接用清(qing)除試(shi)劑處(chu)理吧.

避(bi)免細(xi)胞(bao)污(wu)(wu)染，可以從預防著手，超凈(jing)工作臺物品放置要合(he)理、進入細(xi)胞(bao)房要換鞋和穿實驗(yan)服、實驗(yan)員戴手套后要用酒精等(deng)消毒、避(bi)免細(xi)胞(bao)交叉污(wu)(wu)染等(deng)等(deng)。