A7r5細胞|STR入庫

產品(pin)名(ming)稱：A7r5細胞

是否STR：是

供應公司(si)：慧穎生物

復蘇(su)周(zhou)期(qi)：1-2周(zhou)

您是(shi)否在關心各種細(xi)胞系特異性(xing)鑒定方法，是(shi)否被細(xi)菌(jun)，病毒，支原(yuan)體污(wu)染，購買慧穎生物細(xi)胞株細(xi)胞系值(zhi)得放心，大(da)部(bu)分細(xi)胞經過STR鑒定，支原(yuan)體，細(xi)菌(jun)，病毒檢測后入庫。！

分離培養法

分離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)是(shi)(shi)支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測的(de)(de)金標(biao)方法(fa)，其檢(jian)測精確度(du)zui高。這種(zhong)(zhong)方法(fa)是(shi)(shi)從可疑的(de)(de)細胞培(pei)養(yang)(yang)(yang)體(ti)(ti)(ti)系中(zhong)取(qu)樣(yang)，并接(jie)種(zhong)(zhong)到(dao)zui適宜支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)生(sheng)長(chang)的(de)(de)瓊脂平板上(shang)。如果(guo)樣(yang)本中(zhong)含有支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)，它(ta)們就會(hui)在(zai)這種(zhong)(zhong)瓊脂平板上(shang)*生(sheng)長(chang)，zui終形成明(ming)顯(xian)可見(jian)的(de)(de)特(te)征性(xing)菌(jun)落。分離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)基本不(bu)會(hui)出現假(jia)陰(yin)性(xing)結果(guo)，因此(ci)被譽為支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)檢(jian)測金標(biao)準(zhun)。不(bu)過分離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也(ye)存在(zai)兩個弊端(duan)，一是(shi)(shi)檢(jian)測時間太長(chang)，支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)要長(chang)出明(ming)顯(xian)克隆至少需(xu)要4周時間。二是(shi)(shi)盡(jin)管(guan)可以檢(jian)測絕大多數支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)種(zhong)(zhong)類，分離培(pei)養(yang)(yang)(yang)法(fa)也(ye)有力所(suo)不(bu)及(ji)的(de)(de)時候(hou)，例(li)如支(zhi)(zhi)原(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)M. hyorhinis。

DNA檢(jian)測

DNA檢(jian)測(ce)需(xu)要(yao)將可(ke)疑樣品與指示(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)共(gong)同培養(yang)，因此(ci)一般(ban)需(xu)要(yao)幾天時間。DNA檢(jian)測(ce)所(suo)用(yong)的指示(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)通常是細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)質區域較大(da)的Vero細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)，如果原樣本中(zhong)含有(you)支原體，那么當細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)DNA被熒光(guang)染料(liao)（如Hoechst染料(liao)）染色時，就(jiu)可(ke)以在指示(shi)(shi)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(bao)的核(he)周圍觀察到熒光(guang)斑點或(huo)熒光(guang)顆粒(li)。分離培養(yang)法用(yong)來(lai)檢(jian)測(ce)支原體M. hyorhinis菌(jun)株(zhu)并不可(ke)靠，而DNA法可(ke)以準確的將其檢(jian)測(ce)出來(lai)。

PCR法

PCR法(fa)也可(ke)(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)(ce)M. hyorhinis菌株，PCR法(fa)檢(jian)測(ce)(ce)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)只需幾個小(xiao)時(shi)，是zui快(kuai)但也是zui不靈敏(min)的(de)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)檢(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)。該方(fang)法(fa)采(cai)用針對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)DNA的(de)引物用PCR檢(jian)測(ce)(ce)可(ke)(ke)疑樣本，其中(zhong)PCR引物通常針對(dui)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)16S rRNA基因(yin)。在(zai)凝(ning)膠電泳(yong)過(guo)程中(zhong)，支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)DNA會顯(xian)示為特異性(xing)條帶(dai)，以(yi)此指示支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)的(de)存在(zai)。PCR法(fa)可(ke)(ke)以(yi)檢(jian)測(ce)(ce)大多數(shu)支(zhi)(zhi)原(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)，但謹慎起見同時(shi)使(shi)用另一種檢(jian)測(ce)(ce)方(fang)法(fa)來進行驗證。

酶(mei)學檢測和ELISA

此外，也還存在一些其他支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)檢(jian)測方(fang)法(fa)。例如酶學檢(jian)測是(shi)將可疑樣本(ben)添加到特(te)定底物中(zhong)，在這一體(ti)系內支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)的(de)(de)(de)(de)酶可以將ADP轉(zhuan)化(hua)為ATP，隨后能利用ATP發光的(de)(de)(de)(de)luciferase酶就(jiu)可以指示(shi)支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)的(de)(de)(de)(de)存在。ELISA也能用于支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)檢(jian)測，以ELISA法(fa)為基礎的(de)(de)(de)(de)支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)檢(jian)測一般(ban)使(shi)用針(zhen)對支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)16S rRNA基因的(de)(de)(de)(de)帶標記探針(zhen)或抗體(ti)，來檢(jian)測培養物中(zhong)是(shi)否含有支原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)。

定期檢測

支(zhi)(zhi)原體(ti)感(gan)染會使培養細(xi)胞(bao)慢慢枯萎，因此對培養細(xi)胞(bao)定(ding)(ding)期(qi)進行支(zhi)(zhi)原體(ti)檢(jian)測(ce)非常(chang)重要。一般來說每1至3個月就應該進行一次支(zhi)(zhi)原體(ti)檢(jian)測(ce)。將(jiang)定(ding)(ding)期(qi)支(zhi)(zhi)原體(ti)檢(jian)測(ce)常(chang)規(gui)化堅持(chi)下去(qu)，是(shi)細(xi)胞(bao)培養實驗(yan)室應對支(zhi)(zhi)原體(ti)感(gan)染的關鍵。

A7r5細胞|STR入庫

出庫(ku)公司 細胞代號 細胞名稱(cheng) 備注

慧(hui)穎生物 siha 人宮頸癌(ai)細胞 STR

慧穎生物 MCF-7 人乳腺癌細(xi)胞 STR

慧(hui)穎(ying)生物 Hela 人(ren)宮(gong)頸癌(ai)細(xi)胞 STR

慧穎生物 HCT116 人的結腸癌細胞 STR

慧穎生物(wu) Hep G2 人肝癌細胞 STR

慧穎生物 NCI-H1437 人肺癌細胞 STR

慧穎(ying)生(sheng)物 DU 145 人(ren)前(qian)列腺癌細胞 STR

慧穎(ying)生物(wu) HT1080 人纖維(wei)肉瘤細胞 STR

慧穎(ying)生物 T24 人膀胱移行細(xi)胞(bao)癌細(xi)胞(bao) STR

慧穎生物 T47D 人乳腺管(guan)癌細(xi)胞 STR

慧穎生物(wu) 5637 人(ren)膀胱癌細胞 STR

慧穎生物 U251 人膠質瘤細胞 STR

慧(hui)穎生(sheng)物 PANC-1 人胰腺癌細胞 STR

  培養工作中，主(zhu)要從以下幾個方面來預(yu)防(fang)支原體的污染：

控制環境污染;

嚴(yan)格(ge)實驗操作;

細(xi)胞培養(yang)基和器材(cai)要保證無(wu)菌;

在細胞培養基(ji)中加入適量的抗生素。

支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)污染細胞后，特別是(shi)(shi)重要(yao)的細胞株，有(you)必要(yao)清除支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)，常用(yong)(yong)方法有(you)抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)處理、抗(kang)(kang)血清處理、抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)加(jia)抗(kang)(kang)血清和補體(ti)(ti)(ti)(ti)聯合處理。支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)zui突出(chu)的結構特征(zheng)是(shi)(shi)沒有(you)細胞壁，一般來講，對(dui)作(zuo)(zuo)(zuo)用(yong)(yong)于細胞壁生(sheng)物合成的抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)，如 -內酰胺(an)類(lei)、萬古霉(mei)素(su)等(deng)*不(bu)敏感;對(dui)多粘菌素(su)(polymycin)、利(li)福(fu)平、磺(huang)胺(an)藥物普遍耐藥。對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)zui有(you)抑制(zhi)活(huo)性(xing)及常用(yong)(yong)于支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)感染治療的抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)是(shi)(shi)四環(huan)素(su)類(lei)、大環(huan)內酯(zhi)類(lei)及一些氟喹諾酮;其他類(lei)抗(kang)(kang)生(sheng)素(su)如氨基糖苷類(lei)、氯霉(mei)素(su)對(dui)支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)有(you)較小抑制(zhi)作(zuo)(zuo)(zuo)用(yong)(yong)，所以常不(bu)用(yong)(yong)來作(zuo)(zuo)(zuo)為支(zhi)原(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)(yuan)體(ti)(ti)(ti)(ti)感染的化學治療劑。

支(zhi)原體污染(ran)在細(xi)(xi)胞培養(yang)中實際(ji)上(shang)是比較常(chang)見的, 據資(zi)料, 可(ke)達(da)30%甚至更高. 支(zhi)原體污染(ran)時(shi)細(xi)(xi)胞表(biao)現為長(chang)得不(bu)(bu)好,也不(bu)(bu)死(si)亡, 同時(shi), 培養(yang)基又是清(qing)亮的. 時(shi)間(jian)長(chang)達(da)一(yi)周也沒有什(shen)么變化. 這時(shi)基本上(shang)可(ke)以判斷(duan)出是支(zhi)原體污染(ran)了, 愿意檢測(ce)就檢測(ce)一(yi)下,不(bu)(bu)愿意直接用清(qing)除試劑處理吧.

避(bi)免細(xi)胞污(wu)染(ran)，可以從預防著手，超凈工作臺(tai)物品放置要合理、進入(ru)細(xi)胞房要換鞋和(he)穿(chuan)實(shi)驗服、實(shi)驗員(yuan)戴手套后要用(yong)酒精等(deng)消(xiao)毒、避(bi)免細(xi)胞交叉污(wu)染(ran)等(deng)等(deng)。