聯系電話:
慧穎生物提(ti)供優質血清,為實(shi)驗助(zhu)力!
Gemini100-500胎牛血清
把細胞(bao)養好的三個關鍵(jian)要素是:良好的細胞(bao)來源,正確的實驗操作,以及合適的培養體系(xi)。其中(zhong)“合適的培養體系”就(jiu)是要創造適合細胞生長的環境,給細胞建立一個(ge)滿意(yi)的“家”,而胎(tai)牛(niu)血清就(jiu)好比于這個(ge)家的裝修,可以提(ti)高細胞的居住環境和舒適性,讓(rang)細胞更好更快地生長
當(dang)(dang)然,胎牛血清并不(bu)是完美(mei)的,它除了可為細(xi)胞(bao)提供生(sheng)長(chang)所必須(xu)的蛋白、細(xi)胞(bao)因子、激素和微量(liang)元素等多種營(ying)養物質,同時也含(han)有(you)內毒素、補體(ti)、抗體(ti)等對細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)有(you)危害的成分(fen),若(ruo)選擇不(bu)當(dang)(dang),不(bu)合適(shi)的FBS會(hui)嚴重影響細(xi)胞(bao)的生(sheng)長(chang)狀態甚至(zhi)導致細(xi)胞(bao)死亡。因此,FBS既是讓細胞快樂成長的*營養物,又是可能導致細胞死亡的“定時の炸的啊彈”!辛苦養起來的細胞可能因為(wei)FBS用錯而(er)一切歸零(ling)……
近年來無血清培養基和非動物來源的培養基越來越受到關注,但目前大部分細胞還無法適用這些培養基,并且存在費用較高和細胞生長較緩慢的缺點,因此,含有FBS的*培養基仍然是目前主流的細胞培養體系。
那么,應如何為你的細胞選購FBS呢(ni)?選購FBS應考(kao)慮哪(na)些標準?
1.產品檢測
每(mei)款FBS在生產(chan)上市之前,必須經過嚴格(ge)的質控(kong)檢測(ce)。
質控環節*,以確保上市的血清(qing)符合規定合乎規格,而血清(qing)產品分析證書(COA)就(jiu)是FBS質控的重要體現。在COA中(zhong),常規的檢測(ce)指(zhi)標(biao)包(bao)括內(nei)(nei)毒素(su)、總蛋白、細菌、病(bing)毒等,例如(ru)我國(guo)藥(yao)典(dian)規定,FBS中(zhong)內(nei)(nei)毒素(su)含量應(ying)≤10EU/mL,另外總蛋白為30-50mg/mL、血紅(hong)蛋白檢測(ce)不高(gao)于30mg/dL。
2. 可(ke)追溯性
目(mu)前市面上存(cun)在較(jiao)多(duo)以假亂真的FBS產品,科研工作者對血清的真實產地、來源難以鑒別。
血清(qing)行業協會(ISIA)實施了供應鏈可追溯性的行業標準,以確(que)保FBS的質量和安全性。
例如,FBS供應商(shang)是否保留原產地的(de)可(ke)追(zhui)(zhui)溯記(ji)錄(lu)?是否持(chi)有(you)血(xue)清生產各階段處(chu)理(li)、運輸和商(shang)業交易的(de)文件?這些都是判(pan)斷(duan)FBS可(ke)追(zhui)(zhui)溯性需(xu)要考(kao)慮的(de)因素。
3. 生長驗證
我(wo)們使(shi)用FBS目的是為了讓(rang)細胞(bao)(bao)更真實、健(jian)康地生長。在確保了FBS的來源真實性(xing)(xing)、安(an)全(quan)可靠性(xing)(xing)后,下(xia)一步就要對(dui)FBS的質量,即培(pei)養細胞(bao)(bao)的效果進行鑒定了,而這也是決定細胞(bao)(bao)能否(fou)養好的關(guan)鍵(jian)。
在(zai)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養過程,質量粗糙的(de)(de)(de)FBS可能(neng)會導(dao)致細(xi)(xi)胞(bao)(bao)出現生長速(su)度緩慢、不(bu)(bu)貼壁、容(rong)易老化等現象,從(cong)而導(dao)致實驗(yan)受阻。經過質量驗(yan)證(zheng)的(de)(de)(de)FBS,則(ze)可以十分確定(ding)這款FBS對(dui)哪些細(xi)(xi)胞(bao)(bao)具有良(liang)好的(de)(de)(de)培(pei)養效果,進(jin)而判斷(duan)其能(neng)否把自己的(de)(de)(de)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)養好。對(dui)于(yu)質量優質的(de)(de)(de)FBS,通常采用血(xue)清敏(min)感性細(xi)(xi)胞(bao)(bao)(如(ru)干細(xi)(xi)胞(bao)(bao))來(lai)進(jin)行培(pei)養驗(yan)證(zheng),若(ruo)培(pei)養效果良(liang)好,則(ze)其他常規(gui)細(xi)(xi)胞(bao)(bao)系的(de)(de)(de)培(pei)養就(jiu)更不(bu)(bu)在(zai)話下。
4. 穩定性
FBS作為其他行業的(de)副產(chan)品,其生產(chan)在本質上會(hui)受到天氣、食(shi)物供(gong)應、經濟條件和牛群規模及疫情等(deng)各種(zhong)因素的(de)影響,導(dao)致(zhi)血清的(de)供(gong)應可(ke)能出現貨源、價格及批次間(jian)的(de)不穩(wen)定性,從而(er)造(zao)成實驗(yan)(yan)的(de)不順甚至(zhi)實驗(yan)(yan)失(shi)敗(bai)。在過(guo)去,國內外已(yi)有多個實驗(yan)(yan)室(shi)出現過(guo)因血清批間(jian)差異(yi)大而(er)導(dao)致(zhi)實驗(yan)(yan)結果(guo)無法重(zhong)復的(de)情況(kuang),浪費了巨大的(de)時間(jian)和金錢成本。
因此,找到穩定提供同批(pi)次FBS的(de)供應商,對于確保自己細胞實(shi)(shi)驗(yan)(yan)結果的(de)真實(shi)(shi)性和可(ke)重(zhong)復性具(ju)有重(zhong)要(yao)意義,而(er)且花在重(zhong)復實(shi)(shi)驗(yan)(yan)或檢驗(yan)(yan)新批(pi)次上的(de)時間將大大減(jian)少。
推薦Gemini100-500胎牛血清
實(shi)驗室(shi)操(cao)作中要注(zhu)意及處理方法:
1. 血清保(bao)存: 建議血清應保(bao)存在(zai)-5℃至-2O℃。然(ran)而,若存放于4℃時,請勿超過一(yi)個月。若您一(yi)次(ci)無法用完(wan)一(yi)瓶,建議您無菌(jun)分裝血清至恰當的滅(mie)菌(jun)容器內,再放回(hui)冷凍。
2. 解(jie)(jie)凍血(xue)清的方法: 建議您將血(xue)清從冷凍箱取(qu)出后(hou),先置于2~8℃冰(bing)箱使(shi)之融(rong)解(jie)(jie),然后(hou)在室溫(wen)下使(shi)之全融(rong)。但必須注意的是,融(rong)解(jie)(jie)過(guo)程中必須規則地搖(yao)晃均勻。
3. 血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普(pu)遍的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
5. Gemini血清有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量!
6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀?
胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。
7. 如何避免沉淀物的產生?
解凍Gemini血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多
上一篇:胎牛血清ST30-3302