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慧(hui)穎生物提供(gong)優質血清(qing),為實驗助(zhu)力!
Gemini人AB血清100-512
把細胞(bao)養好的(de)三個關鍵要素是:良好的(de)細胞(bao)來源,正確(que)的(de)實驗操(cao)作,以(yi)及合適的(de)培養體(ti)系。其中“合適的(de)培養體系(xi)”就(jiu)是要創(chuang)造適合細胞生長的(de)環境,給細胞建立一個滿意的(de)“家”,而胎(tai)牛血清就(jiu)好(hao)比于這個家的(de)裝修,可以提高細胞的(de)居住環境和舒適性(xing),讓(rang)細胞更好(hao)更快地生長
當然,胎牛血清并不是(shi)完美的(de),它除了可(ke)為細(xi)胞提供(gong)生長(chang)所必須(xu)的(de)蛋白、細(xi)胞因子(zi)、激素和微量元素等多種營養物質,同(tong)時也含有(you)內毒素、補體、抗體等對細(xi)胞生長(chang)有(you)危(wei)害的(de)成分,若選(xuan)擇不當,不合適的(de)FBS會嚴(yan)重影(ying)響細(xi)胞的(de)生長(chang)狀態甚至導致(zhi)細(xi)胞死亡。因此,FBS既是讓細胞快樂成長的*營養物,又是可能導致細胞死亡的“定時の炸的啊彈”!辛苦養起(qi)來(lai)的(de)細胞可能因(yin)為FBS用錯而一(yi)切歸零……
近年來無血清培養基和非動物來源的培養基越來越受到關注,但目前大部分細胞還無法適用這些培養基,并且存在費用較高和細胞生長較緩慢的缺點,因此,含有FBS的*培養基仍然是目前主流的細胞培養體系。
那么,應如何(he)為你的細胞選(xuan)購(gou)FBS呢?選(xuan)購(gou)FBS應考(kao)慮哪些標(biao)準?
1.產(chan)品檢測
每款FBS在生產上市之(zhi)前,必須經(jing)過嚴格的質控檢測。
質控環節(jie)*,以確保(bao)上市的(de)血(xue)清符(fu)合規(gui)(gui)定合乎規(gui)(gui)格,而血(xue)清產品分析證書(COA)就是FBS質控的(de)重要體現。在(zai)COA中(zhong),常規(gui)(gui)的(de)檢測(ce)指(zhi)標包括內毒(du)素、總蛋白、細菌、病毒(du)等,例如我國(guo)藥(yao)典(dian)規(gui)(gui)定,FBS中(zhong)內毒(du)素含量應≤10EU/mL,另外總蛋白為30-50mg/mL、血(xue)紅蛋白檢測(ce)不高于30mg/dL。
2. 可(ke)追溯(su)性
目前市面上存在較多以(yi)假(jia)亂真(zhen)(zhen)的FBS產(chan)品(pin),科研(yan)工作者對血清的真(zhen)(zhen)實產(chan)地、來源難以(yi)鑒別。
血(xue)清行業協會(ISIA)實(shi)施了供應鏈可追溯(su)性的(de)行業標準,以確保FBS的(de)質(zhi)量和安全性。
例(li)如,FBS供(gong)應商是否保留(liu)原產地(di)的可(ke)追溯記錄?是否持有血清生(sheng)產各階段(duan)處(chu)理(li)、運輸和商業交(jiao)易的文件?這些都是判斷FBS可(ke)追溯性需要考慮的因素。
3. 生長驗證(zheng)
我們(men)使用FBS目(mu)的是(shi)為了讓(rang)細胞更真實(shi)、健(jian)康地(di)生長。在(zai)確保了FBS的來源真實(shi)性、安全可靠性后,下一步就要(yao)對FBS的質(zhi)量,即培養(yang)細胞的效果進(jin)行鑒定(ding)了,而這(zhe)也(ye)是(shi)決定(ding)細胞能否(fou)養(yang)好(hao)的關鍵(jian)。
在細(xi)胞(bao)(bao)(bao)培(pei)養(yang)(yang)過程(cheng),質量(liang)粗糙的(de)FBS可能會導致(zhi)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)出現生長速(su)度(du)緩慢、不貼壁(bi)、容易老(lao)化等現象,從而導致(zhi)實驗受(shou)阻。經(jing)過質量(liang)驗證的(de)FBS,則(ze)可以十分確定這款FBS對哪些(xie)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)具(ju)有良好(hao)的(de)培(pei)養(yang)(yang)效果(guo),進(jin)而判斷(duan)其(qi)能否把自己的(de)細(xi)胞(bao)(bao)(bao)養(yang)(yang)好(hao)。對于質量(liang)優質的(de)FBS,通常采用血清敏感性細(xi)胞(bao)(bao)(bao)(如干細(xi)胞(bao)(bao)(bao))來(lai)進(jin)行培(pei)養(yang)(yang)驗證,若培(pei)養(yang)(yang)效果(guo)良好(hao),則(ze)其(qi)他常規細(xi)胞(bao)(bao)(bao)系的(de)培(pei)養(yang)(yang)就更不在話下(xia)。
4. 穩定(ding)性
FBS作為其他行(xing)業的(de)(de)(de)副產品,其生產在本質上會受到天(tian)氣、食(shi)物供(gong)應(ying)、經濟條件和牛群規模及疫情等各種因素的(de)(de)(de)影響,導致(zhi)血清的(de)(de)(de)供(gong)應(ying)可能出(chu)現(xian)貨源、價格及批(pi)次間的(de)(de)(de)不穩定性,從而造成實驗(yan)的(de)(de)(de)不順甚(shen)至實驗(yan)失敗。在過去(qu),國內(nei)外已有多個(ge)實驗(yan)室出(chu)現(xian)過因血清批(pi)間差異大(da)而導致(zhi)實驗(yan)結果無法重(zhong)復的(de)(de)(de)情況,浪(lang)費了(le)巨大(da)的(de)(de)(de)時間和金錢成本。
因此,找(zhao)到(dao)穩定(ding)提(ti)供(gong)同(tong)批次(ci)FBS的(de)供(gong)應商,對(dui)于確保自己細胞實驗結果的(de)真(zhen)實性(xing)和可(ke)重復(fu)性(xing)具有重要意義,而且(qie)花在(zai)重復(fu)實驗或檢驗新批次(ci)上(shang)的(de)時間將大(da)大(da)減少。
推薦Gemini人AB血清100-512
實驗(yan)室(shi)操作中要注(zhu)意及處理(li)方法(fa):
1. 血清(qing)保存: 建議(yi)血清(qing)應(ying)保存在-5℃至-2O℃。然而(er),若存放于4℃時,請勿超過一個月。若您(nin)一次無法用完一瓶,建議(yi)您(nin)無菌分裝血清(qing)至恰(qia)當的滅菌容(rong)器內,再放回(hui)冷凍。
2. 解(jie)(jie)凍血清的(de)(de)方法: 建(jian)議您將血清從冷凍箱(xiang)取出后,先置于2~8℃冰箱(xiang)使之融(rong)(rong)(rong)解(jie)(jie),然后在(zai)室(shi)溫下使之全融(rong)(rong)(rong)。但必須(xu)注意的(de)(de)是,融(rong)(rong)(rong)解(jie)(jie)過程中必須(xu)規則地搖晃均(jun)勻。
3. 血清解凍后發現有絮狀沉淀物出現,該如何處理?
血清中沉淀物的出現有許多種原因,但普遍(bian)的原因是由于血清中脂蛋白的變性所造成,而血纖維蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解凍后,也會存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但這些絮狀沉淀物,并不影響血清本身的質量。
若您欲去除這些絮狀沉淀物,可以將血清分裝至無菌離心管內,以400g稍微離心,上清液即可接著加入培養基內一起過濾。我們不建議您以過濾的方法去除這些絮狀沉淀物,因為它可能會阻塞您的過濾膜。
4. 為什么要熱滅活血清?
加熱可以滅活補體系統。激活的補體參與溶解細胞事件,刺激平滑肌收縮,細胞和血小板釋放組胺,激活淋巴細胞和巨噬細胞。在免疫學研究,培養ES細胞,昆蟲細胞和平滑肌細胞時,推薦使用熱滅活血清。
5. Gemini血清有必要做熱滅活嗎?
實驗顯示,經過正確處理的熱滅活血清,對大多數的細胞而言是不需要的。經此處理過的血清對細胞的生長只有微小的促進,或*沒有任何作用,甚至通常因為高溫處理影響了血清的質量,而造成細胞生長速率的降低。而經過熱處理的血清,沉淀物的形成會顯著的增多,這些沉淀物在倒置顯微鏡下觀察,像是“小黑點”,常常會讓研究者誤以為是血清遭受污染,而把血清放在37℃環境中,又會使此沉淀物更增多,使研究者誤認為是微生物的分裂擴增。
因此我們建議您,若非必須,您可以不需要做熱處理這一步。如此一來,不但節省您寶貴的時間,更確保血清的質量!
6. 為什么儲存在冰箱中的胎牛血清會出現沉淀?
胎牛血清沒有預老化,儲存在2-8℃時,血清中的各種蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纖維蛋白原、玻粘連蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可見的混濁。這應該不會影響血清的質量。推薦在-20℃儲存胎牛血清,避免反復凍融。
7. 如何避免沉淀物的產生?
解凍Gemini血清時,請按照所建議的逐步解凍法(-20℃至4℃至室溫),若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃),實驗顯示非常容易產生沉淀物。
解凍血清時,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發生。
請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清會變得混濁,同時血清中許多較不穩定的成分也會因此受到損害,而影響血清的質量。
血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無須做此步驟。
若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,時間過久或搖晃不均勻,都會造成沉淀物的增多