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ST30-2602胎牛血清PAN ES級別FBS
胎(tai)牛血清(Foetal Bovine Serum,簡稱FBS):是采自5-8個(ge)月胎(tai)齡牛胚(pei)胎(tai)中的胎(tai)血(xue)。此時胎(tai)牛各(ge)(ge)臟(zang)器(qi)正處生長(chang)分化(hua)階段(duan),血(xue)中含有豐富(fu)的生長(chang)發(fa)育(yu)因(yin)子,非常(chang)適合(he)各(ge)(ge)種細胞的培養,一旦胚(pei)胎(tai)發(fa)育(yu)*這些(xie)因(yin)子自動(dong)消失。因(yin)此8個(ge)月胎(tai)齡以上的牛胚(pei)胎(tai),已接近(jin)足(zu)月,不能作為胎(tai)牛血(xue)清的原料來使用。
新(xin)生牛血清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采自出(chu)生(sheng)一天~一周內的(de)新生(sheng)牛;
小牛(niu)血清(Calf Serum):采自出生10-30天的(de)小牛;
成(cheng)牛(niu)血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采自成(cheng)年牛(niu)收(shou)全血后分離得(de)到血清。
所有血清出廠前均應(ying)經過嚴格質控,并附詳細《檢測報告(gao)》,
如(ru)pH值、滲透壓(ya)、內毒素、病毒檢測、促細胞生長能力、無菌等檢查(cha)。
其(qi)中,由于內毒素(su)直接參與細胞凋亡,對細胞培養結果影響較大,且不同批次的血(xue)清,內毒素(su)差異又(you)不易控制。
內毒(du)素含量越(yue)(yue)低的(de)血清,級別就越(yue)(yue)高,以胎牛血清為例:
當血清中內(nei)毒素含(han)量≤10EU/ml時,此血清為特級胎牛血清;
當血清中(zhong)內毒素含量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清為優級胎牛(niu)血清;
當血清中內毒素含(han)量≥ 25EU/ml時,此血清為標準級(ji)胎牛血清;
胎牛(niu)血清 在細胞培(pei)養中(zhong)的作用:
1. 提供對(dui)維持(chi)細(xi)胞指數生長的(de)(de)激素,基礎培養基中沒(mei)有或量很(hen)少的(de)(de)營(ying)養物(wu)(wu),以(yi)及主要的(de)(de)低(di)分子營(ying)養物(wu)(wu)。
2. 提供結合蛋白,能識別維生素(su)、脂類、金(jin)屬(shu)和其他激素(su)等,能結合或調節它(ta)們所結合的(de)物質活力。
3. 有些情況下(xia)結合蛋(dan)白質能與有毒金屬和(he)熱原質結合,起到(dao)解(jie)毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yang)基質上所需因子來源(yuan)。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑,使在細胞傳代時(shi)使剩(sheng)余yi dan bai mei失(shi)活,保護(hu)細胞不受傷害。
7. 參與(yu)細胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清(qing)加入基礎(chu)培養基的濃度大(da)多(duo)為5%~20%(最常見為10%)的(de)。具體(ti)到不同試驗,應依據(ju)文(wen)獻報導,或細胞類型或基礎(chu)培(pei)養(yang)基的(de)成分來(lai)確定最佳濃度。
胎牛血清(qing)產品描述:
胎牛(niu)血(xue)清,是由(you)胎牛(niu)血(xue)漿去除纖(xian)維(wei)蛋(dan)白而(er)形成的(de)一種(zhong)(zhong)很(hen)復雜的(de)混合物(wu)(wu),含(han)有各(ge)種(zhong)(zhong)血(xue)漿蛋(dan)白、多肽、脂肪、碳水化合物(wu)(wu)、生長(chang)因子、激素、無(wu)機物(wu)(wu)等,其組成成份大部分已知(zhi),但還有一部分尚不(bu)清楚,這(zhe)些物(wu)(wu)質對促進細胞(bao)生長(chang)或抑制生長(chang)活(huo)性是達到生理平衡的(de)。其中(zhong)不(bu)含(han)細胞(bao)、纖(xian)維(wei)蛋(dan)白和(he)ning xue yin zi
胎(tai)牛血(xue)清在(zai)細胞培養方面通常(chang)優(you)于其他類型(xing)的血(xue)清。由于胎(tai)牛從未接觸過外界, 與新生(sheng)牛(niu)和小牛(niu)血(xue)清相(xiang)比(bi),抗體(ti)含量明(ming)顯降低(di)(di),故抗體(ti)與培養細胞發(fa)生(sheng)交叉反應的(de)風險(xian)也較(jiao)低(di)(di),是理想(xiang)的(de)細胞生(sheng)長補充劑。
所有(you)胎牛血(xue)清均在當地(di)政府(fu)獸醫部門的監督(du)下(xia)從注冊的出口(kou)屠場采(cai)集(ji),符合國際動物協會要求。
為避免(mian)不同供(gong)體間的個體差異,能夠更好保(bao)證實驗數(shu)據的連續性和穩定(ding),應使用同批(pi)次血(xue)清。
同批次血清:將經(jing)過初(chu)步檢測合格的(de)(de)很多供體(ti)胎牛(niu)的(de)(de)粗血清,混合在一起,在低溫條(tiao)件下(xia),經(jing)七次加壓過濾,最后三(san)次為0.1 µm無菌過濾處理,得到淺(qian)黃(huang)色,澄清(qing),稍(shao)粘稠(chou)液體。同一(yi)批(pi)(pi)次(ci)血清(qing)質量上基本無差(cha)異。不(bu)同廠家(jia)一(yi)個批(pi)(pi)次(ci)產量差(cha)異較大,從100升到2000升不(bu)等。批(pi)(pi)次(ci)大,更(geng)利于試驗的(de)穩定和連續的(de)可參照性。
所有血(xue)(xue)清出(chu)廠前(qian),均經過嚴格質控,每個批(pi)次附(fu)有詳細完整的《檢測報告》,包括:品名(ming),貨號,批(pi)號,血(xue)(xue)源地,生產日期(qi),保質期(qi),pH值、滲透壓、血紅蛋(dan)白、總蛋(dan)白、球蛋(dan)白、IgG、內毒素、無菌檢查(細菌、真菌、支原(yuan)體)、病毒檢查(如BVD、牛腺病毒、細胞(bao)病變效應等(deng))、促細胞(bao)生長能力、細胞(bao)毒性、BVD-1/2抗體檢查等(deng)。
胎牛血清儲存(cun)條件:
-20°C凍存。
胎牛血清(qing)解凍(dong)后,應(ying)按單次(ci)習慣用量(liang)分裝,分裝后的(de)血清(qing)仍(reng)-20°C凍存(cun)。
若置于4°C的(de)血清,應在一周(zhou)內用完。
為保證細胞培養(yang)的最佳效果,血(xue)清(qing)和培養(yang)基的配置(zhi),應遵循“現用現配"原則。配好的(de)培養液,應于(yu)一(yi)周內(nei)用完。
血清避免(mian)反復凍融,避免(mian)在4°C或更高溫度儲存過(guo)久,否則(ze)會破壞血清(qing)中有效活(huo)性成分,影響血清(qing)品質。
胎牛血清是否要熱(re)滅活:
shouxian胎牛(niu)血清不推薦熱(re)滅活。
熱滅活一般是指在做(zuo)免疫相關的(de)試(shi)驗(yan)(yan)中,通過加(jia)熱滅活掉(diao)血清中的(de)補體(ti),以避免對(dui)免疫試(shi)驗(yan)(yan)的(de)影響(xiang)。
在胎牛血(xue)(xue)清(qing)中,由于胎齡原因,尚未形(xing)成(cheng)完(wan)整(zheng)的補體(ti)系(xi)統,因此(ci),胎牛血(xue)(xue)清(qing)不會真(zhen)正干(gan)預免疫試驗。故不需滅活(huo)。
并且,熱(re)滅活(huo)反而可能導致胎牛血清中部分重要的(de)生長因子的(de)活(huo)性衰減,進(jin)而影響(xiang)細(xi)胞培(pei)養(yang)效果。
若針對(dui)某些特殊試(shi)驗(yan),對(dui)于胎牛血清一定要做(zuo)熱滅(mie)活,國(guo)際(ji)上推(tui)薦熱滅(mie)活的方(fang)法:40℃水浴(yu),20min。
胎牛血清融化方法:
血清融化 專業方(fang)法:
目的;更好保留血(xue)清中活性成(cheng)分,使細胞培養(yang)更穩(wen)定。
推(tui)薦國際血清廠家 專業融化方法(此方法國際通用(yong),適(shi)用(yong)于所有種類的血(xue)清):
操作(zuo) | 溫(wen)度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
第(di)一步 | 室溫 | 35 min | 90 min | 100 min |
或(huo)15-20℃水(shui)浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
第二步 | 20℃水(shui)浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
第(di)三步 | 37℃水(shui)浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
注意:
?在水浴過程(cheng)中(zhong)(zhong),血清的平(ping)面要(yao)沉浸在水中(zhong)(zhong)。在融(rong)化過程(cheng)中(zhong)(zhong)要(yao)慢(man)慢(man)搖動(dong)瓶身,使血清混勻,但搖動(dong)中(zhong)(zhong)盡量不要(yao)產生泡沫!
胎牛血清 使(shi)用說明
血清從(cong)-20℃取出后,融化,按推薦(jian)體積加入到基(ji)礎培(pei)養基(ji)中,混勻,制(zhi)備成新鮮(xian)培(pei)養基(ji)。(整個(ge)操(cao)作需(xu)在(zai)無菌(jun)(jun)超凈臺中進(jin)行,注意無菌(jun)(jun)操(cao)作。)配置好(hao)的培(pei)養基(ji)推薦(jian)在(zai)4℃保存,應在(zai)1周內用完。
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