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Gemini血清900-108優等FBS
胎牛血清(Foetal Bovine Serum,簡(jian)稱FBS):是采自5-8個月胎(tai)(tai)齡(ling)牛(niu)胚(pei)胎(tai)(tai)中(zhong)的(de)胎(tai)(tai)血(xue)。此時胎(tai)(tai)牛(niu)各(ge)臟器正處生(sheng)長分化(hua)階段(duan),血(xue)中(zhong)含有豐富(fu)的(de)生(sheng)長發育因子,非常(chang)適合各(ge)種(zhong)細胞的(de)培養,一旦胚(pei)胎(tai)(tai)發育,這些因子自動消失(shi)。因此8個月胎(tai)(tai)齡(ling)以上的(de)牛(niu)胚(pei)胎(tai)(tai),已(yi)接近足月,不能作為胎(tai)(tai)牛(niu)血(xue)清的(de)原料來使用。
新生牛血(xue)清(Newborn Calf Serum,簡稱NBCS):采(cai)自出(chu)生一天~一周內的新生牛;
小(xiao)牛血清(Calf Serum):采自出生10-30天的小牛;
成(cheng)牛血清(Adult Bovine Serum,簡稱ABS):采(cai)自成年牛收全血(xue)后分離得到血(xue)清。
所有血清出(chu)廠前均應經過嚴(yan)格(ge)質控,并附詳(xiang)細《檢(jian)測報告》,
如pH值、滲透壓、內毒素、病毒檢測、促細胞生長能力、無菌等檢查。
其中,由于內毒(du)素直接參(can)與細(xi)胞凋亡(wang),對細(xi)胞培(pei)養結果影響較(jiao)大,且不同批次的血清,內毒(du)素差異又不易控制。
內(nei)毒素含量越低的血清,級別就越高,以胎(tai)牛血清為(wei)例:
當血清中內毒素含量(liang)≤10EU/ml時,此血清為特級胎(tai)牛(niu)血清;
當(dang)血清中內毒素含(han)量﹥10EU/ml,≤ 25EU/ml時,此血清(qing)(qing)為優級胎牛(niu)血清(qing)(qing);
當血(xue)清中內(nei)毒(du)素含量≥ 25EU/ml時,此血清(qing)為標(biao)準級胎(tai)牛血清(qing);
胎牛血清 在細胞培養中的作用:
1. 提供(gong)對維(wei)持細胞指數生長(chang)的激素,基礎培(pei)養(yang)(yang)基中沒有或量很少的營養(yang)(yang)物(wu),以及(ji)主要的低分子營養(yang)(yang)物(wu)。
2. 提供(gong)結(jie)合蛋白,能識別(bie)維生素(su)、脂類(lei)、金屬和其他激素(su)等,能結(jie)合或調節它們(men)所結(jie)合的(de)物質活力。
3. 有些(xie)情況(kuang)下結(jie)合蛋白質(zhi)能與有毒金(jin)屬和熱原(yuan)質(zhi)結(jie)合,起到解(jie)毒作用。
4. 是細胞貼壁、鋪展在塑料培養(yang)基質上所需因子來源。
5. 起酸堿度緩沖液作用。
6. 提供蛋白酶抑制劑(ji),使在細胞傳代時使剩(sheng)余yi danbaimei失活,保護細胞不受傷害。
7. 參與細(xi)胞凍存。
在細胞培養中,胎牛血清加入基礎(chu)培養基的濃度大(da)多為5%~20%(最常(chang)見(jian)為10%)的(de)。具體(ti)到不同試驗,應依據文獻報導,或細胞(bao)類型或基(ji)礎培養基(ji)的(de)成分來確定最佳濃度。
胎牛血清產品描述:
胎(tai)牛血(xue)(xue)清(qing),是由胎(tai)牛血(xue)(xue)漿去除纖維蛋(dan)(dan)白而形成(cheng)的一(yi)種(zhong)很(hen)復雜(za)的混(hun)合(he)物,含有(you)各種(zhong)血(xue)(xue)漿蛋(dan)(dan)白、多肽、脂肪、碳水化合(he)物、生(sheng)長因(yin)子、激素(su)、無機物等(deng),其組(zu)成(cheng)成(cheng)份大部分已知,但還有(you)一(yi)部分尚不清(qing)楚,這(zhe)些(xie)物質對促(cu)進(jin)細胞(bao)生(sheng)長或抑制生(sheng)長活性是達(da)到生(sheng)理(li)平衡的。其中不含細胞(bao)、纖維蛋(dan)(dan)白和ning xue yinzi。
胎(tai)牛血(xue)清(qing)在(zai)細胞培養方面通(tong)常優于(yu)其他(ta)類型的血(xue)清(qing)。由于(yu)胎(tai)牛從未接觸過外界, 與(yu)新生(sheng)牛和小(xiao)牛血清相比,抗體含量明顯降低(di),故(gu)抗體與(yu)培養細(xi)胞(bao)發生(sheng)交(jiao)叉反應的風險也(ye)較低(di),是理想的細(xi)胞(bao)生(sheng)長(chang)補充(chong)劑。
所有胎牛血清均在(zai)當地政府獸醫部(bu)門的(de)監督(du)下從注冊的(de)出口(kou)屠(tu)場采集(ji),符(fu)合國際動物協會要求。
為避免不同供體(ti)間(jian)的(de)個體(ti)差異,能夠更好保證實驗(yan)數據的(de)連續性和穩定,應使用同批次血清(qing)。
同(tong)批次血清:將經過初步(bu)檢測合格的很多(duo)供體胎牛的粗血清,混合在一起,在低溫條件下,經七次加壓過濾,最后三次為(wei)0.1 µm無(wu)菌過(guo)濾處理,得到淺黃色,澄清,稍粘稠液(ye)體(ti)。同(tong)一批(pi)(pi)次(ci)血清質量上基本無(wu)差異。不(bu)同(tong)廠家一個(ge)批(pi)(pi)次(ci)產量差異較(jiao)大,從100升到2000升不(bu)等(deng)。批(pi)(pi)次(ci)大,更(geng)利于試驗的穩定和連續的可參照性。
所有血清出廠前(qian),均經過嚴格質控,每個(ge)批次附有詳細完整的(de)《檢測報告(gao)》,包括:品名,貨號,批號,血源(yuan)地,生產日期,保質期,pH值、滲透壓、血紅蛋(dan)白(bai)、總蛋(dan)白(bai)、球蛋(dan)白(bai)、IgG、內毒(du)素、無(wu)菌檢查(細菌、真菌、支原體)、病(bing)毒(du)檢查(如BVD、牛腺病(bing)毒(du)、細胞病(bing)變效(xiao)應等(deng))、促細胞生長能(neng)力、細胞毒(du)性、BVD-1/2抗(kang)體檢查等(deng)。
胎(tai)牛(niu)血(xue)清儲(chu)存條件:
-20°C凍存(cun)。
胎(tai)牛血(xue)(xue)清解(jie)凍(dong)后(hou),應按(an)單(dan)次習慣用量分裝(zhuang),分裝(zhuang)后(hou)的血(xue)(xue)清仍-20°C凍存。
若置于4°C的血清,應在一(yi)周內(nei)用完。
為(wei)保證細胞培養的(de)最佳效果(guo),血清和培養基的(de)配(pei)置,應遵(zun)循“現(xian)用現(xian)配"原則。配好的培養液,應于一周內(nei)用完(wan)。
血清(qing)避(bi)免反復凍融,避(bi)免在4°C或更高溫(wen)度儲存過久,否則會破(po)壞血(xue)清中(zhong)有效活(huo)性(xing)成分,影響血(xue)清品質。
胎牛血清是否要熱滅活(huo):
shouxian胎牛血清不(bu)推薦熱(re)滅(mie)活。
熱滅(mie)(mie)活一般是指(zhi)在做免疫相關的(de)試(shi)驗中(zhong),通過加熱滅(mie)(mie)活掉(diao)血清中(zhong)的(de)補體(ti),以(yi)避(bi)免對免疫試(shi)驗的(de)影響。
在胎牛(niu)血(xue)清中,由于胎齡原因(yin),尚未形成完整的補體系統,因(yin)此,胎牛(niu)血(xue)清不會(hui)真正干預免疫試驗。故不需滅(mie)活。
并且,熱滅活(huo)反(fan)而可能導(dao)致胎牛血清中部(bu)分重要的生(sheng)長因子的活(huo)性衰減,進而影響細胞培養(yang)效果(guo)。
若(ruo)針對某些(xie)特殊(shu)試驗,對于胎牛血清一定(ding)要做(zuo)熱(re)滅(mie)(mie)活,國際上推(tui)薦熱(re)滅(mie)(mie)活的方法:40℃水浴,20min。
胎牛血清融化方法(fa):
血清融化(hua) 專業方法:
目的(de);更好保留(liu)血清中活性成分,使(shi)細胞培養更穩定。
推薦國際(ji)血(xue)清廠家 專業融化方(fang)法(此方(fang)法國(guo)際(ji)通用,適(shi)用于所有種類的血清):
操作 | 溫度 | 100ml | 500ml | 1000ml |
第一步(bu) | 室溫(wen) | 35 min | 90 min | 100 min |
或(huo)15-20℃水浴 | 5 min | 18 min | 20 min | |
第二步 | 20℃水浴 | 15 min | 25 min | 30 min |
第三步 | 37℃水浴 | 20 min | 35 min | 45 min |
注意:
?在水浴(yu)過程中(zhong),血(xue)清的平面要沉浸在水中(zhong)。在融化過程中(zhong)要慢(man)慢(man)搖動(dong)瓶(ping)身,使血(xue)清混勻,但(dan)搖動(dong)中(zhong)盡(jin)量不要產生泡沫!
胎牛血清 使用說(shuo)明
血(xue)清從-20℃取(qu)出后,融化,按推薦體(ti)積加(jia)入到基礎培(pei)(pei)養(yang)基中,混勻,制(zhi)備(bei)成新(xin)鮮培(pei)(pei)養(yang)基。(整個操作(zuo)需在(zai)無(wu)菌超(chao)凈臺中進行,注(zhu)意無(wu)菌操作(zuo)。)配(pei)置好的培(pei)(pei)養(yang)基推薦在(zai)4℃保存(cun),應在(zai)1周(zhou)內用完。
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Sciencell 0500 Fetal Bovine Serum 500ML 美國源(yuan)特級
SIGMA F2442 Fetal Bovine Serum 500ML 美(mei)國源
SIGMA F0193 Fetal Bovine Serum 500ML 南(nan)美源
SIGMA F8318 Fetal Bovine Serum 500ML 澳洲源(yuan)
SIGMA F8687 Fetal Bovine Serum 500ML 澳洲源
Bovogen SFBS Fetal Bovine Serum 500ML 南美源
Bovogen SFBS Fetal Bovine Serum 500ML 新西(xi)蘭源
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SERANA S-FBS-SA-015 Fetal Bovine Serum 500ML 南(nan)美(mei)
SERANA S-FBS-US-015 Fetal Bovine Serum 500ML 美國源
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