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GEMINI （900-108）900108胎牛血清 血清開始進行試(shi)用時，如果是重新(xin)復蘇細胞，建(jian)議用原培養體系進行細胞復蘇，待細胞狀(zhuang)態進入zuiyou狀態后再(zai)進行測試。測試時不建議直(zhi)接100%直接換成新血清體系進行培養，而應該按照比例進行梯度替換(例如，shou次換(huan)液按照新(xin)舊體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后wanquan替換。對于一(yi)些對培養體系(xi)比(bi)較(jiao)敏感(gan)的細(xi)胞，可以進一(yi)步(bu)優化替換比(bi)例。)通過這種方法可以避免細胞因環境改變而出現應激或者異常造成不必要的損失。

血清在4度冰箱能放多久？對細胞有何影響呢？

根據文獻顯(xian)示(shi)血清(qing)和(he)血漿在4℃條件儲存2小時，血清中的成分就會發生變化，所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規格，建議現配現用。如果不能實現現配現用的話，配好的培養基在4℃保存的時間不要超過1周，如果期間使用頻次較高或恢復室溫次數較多時，能夠保存的時間還會減少。

血清(qing)沉淀是什么?

血清非(fei)人(ren)工(gong)產品，沉(chen)淀(dian)出來系自(zi)然現象，沉(chen)淀(dian)主要是纖維蛋白原，其(qi)次(ci)是鹽析(xi)出。如(ru)磷酸鈣等，還有一些danguchun和脂肪酸以及(ji)其(qi)他蛋白析(xi)出物質等

哪些(xie)因素(su)血清(qing)沉淀會增加？

血清(qing)熱滅活、37℃培養(yang) 、反復凍融、溶解過(guo)程中沒有搖(yao)勻、伽(jia)馬射線(xian)照射、長(chang)期存放在 2-8°C、血(xue)清加入(ru)到RPMI 1640中時、pH升(sheng)高時、在培養(yang)板或培養(yang)皿中，培養(yang)基(ji)的(de)蒸發(fa)等等因素都會導(dao)致沉淀的(de)增加。

沉淀不會(hui)影響其(qi)對細胞的促生(sheng)長作用？

技術人員對此(ci)問題有(you)過深入研究證明，血(xue)清沉淀(dian)對細(xi)胞的生(sheng)長(chang)沒有(you)影響，但有(you)一(yi)個例外：沉淀(dian)對巨噬細(xi)胞的培養會有(you)一(yi)些影響。

沉淀這(zhe)種現象發生(sheng)在所有的血清中？

“G*品(pin)牌的(de)胎(tai)牛血清沒(mei)有預老化(hua),如果存(cun)放在2-8℃，血清中的(de)各種(zhong)(zhong)蛋白或(huo)酯(zhi)類有可能會(hui)凝(ning)聚析(xi)出,出現(xian)沉(chen)淀或(huo)混濁. 這種(zhong)(zhong)不會(hui)影響血清對對細胞的(de)促生長(chang)作用(yong).我們(men)建議(yi)把血清存(cun)放在 –20℃，并避(bi)免(mian)反(fan)復凍融。S*品(pin)牌胎(tai)牛血清說明書中說: “在融化(hua)過程中混濁多絮狀(zhuang)沉(chen)淀，這種(zhong)(zhong)現(xian)象對多數血清來說是正(zheng)常的(de)，并不影響其使用(yong)質量。但它影響血清的(de)外觀，影響瓶與瓶之(zhi)間的(de)一致性。

有(you)沉(chen)淀出現的血清(qing)并不是污(wu)染(ran)

檢測(ce)血清是否被污染的(de)方法是(shi)將血(xue)(xue)清(qing)接種到(dao)血(xue)(xue)酯(zhi)板(ban)上，培養后看是(shi)否(fou)有菌(jun)(jun)落形(xing)成。在1000x顯微鏡下，有經驗的(de)通(tong)過觀(guan)察細胞液狀態和常見(jian)細菌(jun)(jun)的(de)外(wai)形(xing)即可(ke)鑒別，或(huo)者(zhe)通(tong)過有無革蘭(lan)氏染色的(de)細菌(jun)(jun)，也可(ke)以(yi)判斷血(xue)(xue)清(qing)是(shi)否(fou)被污染。

如何去(qu)除血清中的沉淀?

如想(xiang)去(qu)除這些絮狀沉淀(dian)物，可將(jiang)血(xue)清分裝到無菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因為可能阻塞濾膜。

血清溶解過程如何(he)減少沉淀

將血清從(cong)冷(leng)凍箱取出后，先(xian)置于2-8℃冰箱12-24小時左右使之溶解，然后在室溫(wen)下使之全溶。但必須注意的(de)(de)是(shi)，溶解過(guo)程中(zhong)必須規(gui)則地輕輕搖晃均勻。切(qie)勿(wu)將(jiang)剛剛從-20℃冰箱里拿出來的(de)(de)血(xue)清直接放(fang)在水浴中(zhong)，無論室溫(wen)的(de)(de)水或者37℃的(de)(de)水，因為(wei)在水浴中(zhong)血(xue)清迅速融化，很大的(de)(de)溫(wen)差(-20℃到37℃，溫(wen)差為(wei)57℃)極其容易造成血(xue)清產生沉淀。直接放(fang)65℃水浴中(zhong)更是(shi)極其殘忍的(de)(de)做法，是(shi)對血(xue)清的(de)(de)褻玩，對科學規(gui)則的(de)(de)粗暴踐踏!

胎牛血清凍存注意事項

需要(yao)長期(qi)保存(cun)(cun)的血清有必要(yao)儲存(cun)(cun)于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預留一定體積空間，不然易發生污染或玻璃瓶凍裂。大包裝的瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃融化，溫差大的情況下血清容易形成蛋白質凝聚而出現沉積和沉淀絮狀物。

血清是否(fou)需要熱滅活處(chu)理(li)?

熱滅(mie)活是指(zhi)56℃， 30分鐘加熱已chedi凍結(jie)的血清(qing)。加(jia)熱過(guo)程中(zhong)須(xu)規(gui)矩搖晃均勻(yun)。目的是(shi)使(shi)血清(qing)中(zhong)的補體成分(complement)滅活。除非有必要，一般不建議做此熱處理，因為熱處理會形成血清沉積增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有: 平滑肌細胞收縮、 肥大細胞和血小板釋放組胺、 增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。相關研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。

血清使用濃(nong)度(du)是多少(shao)?

原(yuan)則(ze)上血清添加量不要太多，通常分為5%、10%、20%幾檔，部分細胞原代提取時會使用20%血清，大部分細胞正常培養時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調校。

GEMINI （900-108）900108胎牛(niu)血清 血清(qing)(qing)批間(jian)差(cha)是客(ke)觀存(cun)在的(de)(de)(de)(de)，因為血清(qing)(qing)制(zhi)品來源于天然活(huo)體，供體牛只的(de)(de)(de)(de)生理狀況、健(jian)康狀況均(jun)不(bu)同(tong)，且(qie)受飼養(yang)環境的(de)(de)(de)(de)地形(xing)、風貌、飲(yin)食、水源等影響(xiang)，體內(nei)各(ge)類(lei)(lei)蛋白(bai)、生長因子(zi)和酶類(lei)(lei)的(de)(de)(de)(de)含(han)量均(jun)有(you)(you)巨大差(cha)異，所以(yi)血清(qing)(qing)具有(you)(you)含(han)量復雜且(qie)不(bu)固定的(de)(de)(de)(de)特性(xing)，批間(jian)差(cha)異也是有(you)(you)可能(neng)的(de)(de)(de)(de)，因此選擇批間(jian)差(cha)異小的(de)(de)(de)(de)血清(qing)(qing)不(bu)僅可以(yi)保證血清(qing)(qing)質(zhi)量，確保細胞培養(yang)效果(guo)，還能(neng)減少(shao)由于批間(jian)差(cha)異帶來的(de)(de)(de)(de)使用(yong)前測試(shi)，且(qie)避免(mian)實驗結果(guo)的(de)(de)(de)(de)不(bu)可重復性(xing)。

建議您可(ke)以一次購進多瓶(ping)同批次的血(xue)清或者批量很大的批號血(xue)清(血清效期通常為5年，建議您一次購買足夠使用1年以上的用量)，以減少由于批次的差異對您實驗的影響。