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F8318 SIGMA 澳洲源(yuan)胎牛血清(qing)庫存充足;不同于(yu)其(qi)它常用的(de)實驗方(fang)法,細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)是一(yi)個動態的(de)過程。胎牛血清(qing)作(zuo)為(wei)細(xi)胞(bao)(bao)培(pei)養(yang)一(yi)個極為(wei)重要的(de)營養(yang)來源(yuan),所(suo)以(yi)血清(qing)的(de)種類和品質對(dui)于(yu)細(xi)胞(bao)(bao)的(de)生(sheng)長產生(sheng)極大的(de)影響。針對(dui)血清(qing)如何(he)(he)(he)儲存、融化、為(wei)何(he)(he)(he)出現(xian)沉淀(dian)以(yi)及如何(he)(he)(he)減(jian)少沉淀(dian)做出詳(xiang)細(xi)說明,旨在幫(bang)助(zhu)老師(shi)解決血清(qing)出現(xian)的(de)問題。慧穎生(sheng)物庫(ku)存現貨胎牛血(xue)清、無外泌(mi)體(ti)胎牛血清,科研AB血清等
PAN ST30-3302胎牛血清
PAN ST30-2602胎牛血清
PAN P30-3302胎牛血清
GEMINI 900-108胎牛血(xue)清
Gemini 100-500胎牛血清
NTC SFBE胎(tai)牛(niu)血清
Sciencell 0510胎(tai)牛(niu)血清
Sciencell 0500胎牛血清
SIGMA F2442胎牛血清
SIGMA F0193胎牛血清
SIGMA F8318胎牛血清(qing)
SIGMA F8687胎牛血清
Bovogen SFBS胎牛血清
Bovogen SFBS新(xin)西(xi)蘭胎牛血清
SBI EXO-FBS-50A-1 無外泌(mi)體血清
GEMINI 100-512科研人AB血(xue)清
Sigma H4522科(ke)研人(ren)AB血清
Cegrogen A0500-3010胎(tai)牛血清
Cegrogen A0500-3011胎牛血(xue)清(qing)
血清開始進(jin)行(xing)試(shi)用時(shi),如果是重新復(fu)蘇細胞,建議用原培(pei)養體(ti)系進(jin)行(xing)細胞復(fu)蘇,待細胞狀態進(jin)入zuiyou狀態后再進行測(ce)試(shi)。測(ce)試(shi)時不建議直接100%直接換成新血清體系進行培養,而應該按照比例進行梯度替換(例如,shou次換(huan)液按照新舊體系1:3,第二次換液1:1,第三次換液3:1,而后wanquan替換。對于(yu)一些對培養(yang)體系比較敏感(gan)的細胞,可以進一步優化(hua)替換比例。)通過這種方法可以避免細胞因環境改變而出現應激或者異常造成不必要的損失。
血(xue)清在4度冰箱能放多久?對細胞有何影響呢?
根據文獻顯示血清和(he)血漿(jiang)在4℃條件儲存2小時,血清中的成分就會發生變化,所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規格,建議現配現用。如果不能實現現配現用的話,配好的培養基在4℃保存的時間不要超過1周,如果期間使用頻次較高或恢復室溫次數較多時,能夠保存的時間還會減少。
血清沉淀是什么(me)?
血清非人(ren)工(gong)產品,沉淀出(chu)(chu)來系自然現(xian)象,沉淀主要是纖(xian)維蛋(dan)白原,其次是鹽析出(chu)(chu)。如(ru)磷酸(suan)鈣等(deng),還有一些danguchun和脂肪酸(suan)以及其他蛋(dan)白析出(chu)(chu)物(wu)質等(deng)
哪些因(yin)素(su)血(xue)清沉淀會增加?
血清熱滅活、37℃培(pei)養(yang) 、反復凍融(rong)、溶解過程中(zhong)(zhong)沒有搖勻、伽馬射線照射、長期(qi)存放在(zai) 2-8°C、血(xue)清加入到RPMI 1640中(zhong)(zhong)時、pH升高時、在(zai)培(pei)養(yang)板或(huo)培(pei)養(yang)皿中(zhong)(zhong),培(pei)養(yang)基的蒸發(fa)等等因(yin)素(su)都會導致(zhi)沉淀的增加。
沉淀不會影(ying)響其對細胞的促生長(chang)作用?
技術人員對(dui)此問(wen)題有(you)過深入研(yan)究證明,血清(qing)沉淀(dian)(dian)對(dui)細(xi)胞的(de)生(sheng)長沒(mei)有(you)影(ying)響,但有(you)一(yi)個例外:沉淀(dian)(dian)對(dui)巨噬細(xi)胞的(de)培(pei)養會(hui)有(you)一(yi)些影(ying)響。
沉淀這種現象發生在所有(you)的血清中(zhong)?
“G*品牌(pai)(pai)的(de)(de)胎(tai)牛(niu)血清(qing)(qing)(qing)沒(mei)有預老化(hua),如果存放在2-8℃,血清(qing)(qing)(qing)中的(de)(de)各種(zhong)(zhong)蛋白或酯類(lei)有可能會凝聚析出,出現沉淀或混濁(zhuo). 這種(zhong)(zhong)不會影(ying)(ying)響(xiang)血清(qing)(qing)(qing)對(dui)對(dui)細胞(bao)的(de)(de)促生長作(zuo)用(yong).我們建議把血清(qing)(qing)(qing)存放在 –20℃,并(bing)避免反復凍融(rong)。S*品牌(pai)(pai)胎(tai)牛(niu)血清(qing)(qing)(qing)說明書中說: “在融(rong)化(hua)過程中混濁(zhuo)多絮狀沉淀,這種(zhong)(zhong)現象(xiang)對(dui)多數血清(qing)(qing)(qing)來(lai)說是正(zheng)常的(de)(de),并(bing)不影(ying)(ying)響(xiang)其(qi)使(shi)用(yong)質量。但它影(ying)(ying)響(xiang)血清(qing)(qing)(qing)的(de)(de)外觀,影(ying)(ying)響(xiang)瓶與瓶之(zhi)間的(de)(de)一致性。
有(you)沉淀出現的血清并不是污染
檢測(ce)血清是否被(bei)污染的(de)方(fang)法是將血清(qing)接種到血酯板上,培(pei)養后(hou)看是否有菌(jun)落形成。在1000x顯微鏡下(xia),有經(jing)驗的(de)通(tong)過(guo)觀察細(xi)胞液狀態和常(chang)見細(xi)菌(jun)的(de)外形即可鑒(jian)別,或者通(tong)過(guo)有無(wu)革蘭氏(shi)染(ran)色的(de)細(xi)菌(jun),也可以判斷血清(qing)是否被污染(ran)。
如何去除(chu)血清中的沉淀?
如想(xiang)去(qu)除這些絮狀沉淀物(wu),可(ke)將血(xue)清(qing)分裝到無(wu)菌離心管中,以400g離心,上清液即可直接加入到培養液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為可能阻塞濾膜。
血清溶解過程如何(he)減少沉(chen)淀
將血清從冷(leng)凍(dong)箱取出后,先置(zhi)于2-8℃冰箱12-24小時(shi)左右使之溶(rong)解(jie),然(ran)后在(zai)室溫下使之全溶(rong)。但必須注意的(de)是,溶(rong)解(jie)過程中必須規則(ze)地(di)輕輕搖(yao)晃均(jun)勻。切勿將剛剛從-20℃冰箱里拿出來的(de)血(xue)清(qing)直接放在(zai)水(shui)浴中,無論室溫的(de)水(shui)或者37℃的(de)水(shui),因為(wei)在(zai)水(shui)浴中血(xue)清(qing)迅速融化,很(hen)大的(de)溫差(cha)(-20℃到37℃,溫差(cha)為(wei)57℃)極其(qi)容(rong)易造成(cheng)血(xue)清(qing)產生沉(chen)淀(dian)。直接放65℃水(shui)浴中更(geng)是極其(qi)殘(can)忍的(de)做(zuo)法(fa),是對血(xue)清(qing)的(de)褻(xie)玩,對科學規則(ze)的(de)粗暴踐踏!
胎牛血清凍存注意事項
需要長期保存的(de)血清(qing)有必要儲存于(yu)-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留一定體積空間,不然易發生污染或玻璃瓶凍裂。大包裝的瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃融化,溫差大的情況下血清容易形成蛋白質凝聚而出現沉積和沉淀絮狀物。
血清是(shi)否需要熱滅活處理?
熱滅活是指56℃,30分鐘加熱已chedi凍結(jie)的(de)血清。加熱過程中須規矩(ju)搖晃均勻。目的(de)是使血清中的(de)補體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不建議做此熱處理,因為熱處理會形成血清沉積增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有: 平滑肌細胞收縮、 肥大細胞和血小板釋放組胺、 增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。相關研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。
血清使用濃度(du)是多少?
原則上血(xue)清添加量不要太多,通(tong)常分為5%、10%、20%幾檔,部分細胞原代提取時會使用20%血清,大部分細胞正常培養時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度,還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調校。
F8318 SIGMA 澳(ao)洲源胎牛(niu)血清庫存(cun)充足 血(xue)清批(pi)間差(cha)是客觀存在(zai)的,因(yin)為血(xue)清制品來源于(yu)天然活體,供(gong)體牛只的生理狀況(kuang)、健康狀況(kuang)均不同,且(qie)受(shou)飼養環境的地(di)形、風貌、飲食(shi)、水源等影(ying)響,體內各類蛋白、生長因(yin)子和酶類的含量均有巨(ju)大差(cha)異(yi)(yi),所以(yi)血(xue)清具有含量復雜且(qie)不固定(ding)的特性(xing)(xing),批(pi)間差(cha)異(yi)(yi)也是有可(ke)能的,因(yin)此選(xuan)擇(ze)批(pi)間差(cha)異(yi)(yi)小的血(xue)清不僅可(ke)以(yi)保證血(xue)清質量,確保細(xi)胞培養效果,還能減少由于(yu)批(pi)間差(cha)異(yi)(yi)帶來的使(shi)用前測(ce)試,且(qie)避免實驗結果的不可(ke)重復性(xing)(xing)。
建(jian)議您可(ke)以(yi)一次購進多瓶(ping)同批(pi)(pi)次的(de)血清或者批(pi)(pi)量很大的(de)批(pi)(pi)號血清(血清效期通常為5年,建議您一次購買足夠使用1年以上的用量),以減少由于批次的差異對您實驗的影響。