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PAN P30-3302胎牛(niu)血(xue)清如(ru)何試用
慧穎生物庫存現貨胎牛血清、無(wu)外(wai)泌體胎(tai)牛血清(qing),科(ke)研(yan)AB血(xue)清等
PAN ST30-3302胎(tai)牛血清
PAN ST30-2602胎牛血清
PAN P30-3302胎牛血(xue)清
GEMINI 900-108胎牛(niu)血清
Gemini 100-500胎牛血(xue)清
NTC SFBE胎牛(niu)血(xue)清(qing)
Sciencell 0510胎(tai)牛(niu)血(xue)清
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SIGMA F2442胎牛血清(qing)
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Bovogen SFBS胎牛血清
Bovogen SFBS新西(xi)蘭胎牛血清(qing)
SBI EXO-FBS-50A-1 無(wu)外泌體血清
GEMINI 100-512科研人AB血清(qing)
Sigma H4522科研人AB血(xue)清
Cegrogen A0500-3010胎牛血清
Cegrogen A0500-3011胎牛血清
血(xue)清沉淀是什么?
血清非人工(gong)產品,沉(chen)淀出來(lai)系自然現象,沉(chen)淀主要是(shi)纖維(wei)蛋白原,其次(ci)是(shi)鹽析(xi)出。如磷酸鈣等(deng),還有一些danguchun和脂肪酸以及其他蛋白析(xi)出物質等(deng)
哪些因素血清沉淀會(hui)增(zeng)加?
血清熱滅活(huo)、37℃培養(yang) 、反(fan)復凍融、溶(rong)解過程中沒有搖勻、伽馬射(she)線(xian)照射(she)、長期存放(fang)在 2-8°C、血清加(jia)入到RPMI 1640中時、pH升(sheng)高時、在培養(yang)板或培養(yang)皿中,培養(yang)基的(de)蒸發等等因(yin)素都會導致(zhi)沉淀(dian)的(de)增(zeng)加(jia)。
沉淀不(bu)會(hui)影響(xiang)其對細胞的促生長作用?
技術人員對(dui)此問題(ti)有過深入研究(jiu)證明,血(xue)清沉(chen)淀對(dui)細(xi)胞的生長(chang)沒(mei)有影響,但有一(yi)個例外(wai):沉(chen)淀對(dui)巨(ju)噬(shi)細(xi)胞的培養會有一(yi)些影響。
沉淀這種現象發(fa)生在所有(you)的血清中(zhong)?
“G*品牌的(de)胎牛血(xue)清(qing)沒有預老化,如(ru)果存放在(zai)(zai)2-8℃,血(xue)清(qing)中的(de)各種(zhong)(zhong)(zhong)蛋白或(huo)酯類有可(ke)能會凝(ning)聚(ju)析(xi)出(chu),出(chu)現沉(chen)淀(dian)或(huo)混(hun)濁. 這種(zhong)(zhong)(zhong)不會影響(xiang)血(xue)清(qing)對(dui)對(dui)細(xi)胞的(de)促生長作(zuo)用.我們建議(yi)把血(xue)清(qing)存放在(zai)(zai) –20℃,并避(bi)免(mian)反(fan)復凍融(rong)。S*品牌胎牛血(xue)清(qing)說明書中說: “在(zai)(zai)融(rong)化過程中混(hun)濁多絮狀沉(chen)淀(dian),這種(zhong)(zhong)(zhong)現象對(dui)多數血(xue)清(qing)來說是正常的(de),并不影響(xiang)其(qi)使用質量。但它影響(xiang)血(xue)清(qing)的(de)外觀,影響(xiang)瓶與(yu)瓶之間的(de)一致(zhi)性。
有(you)沉淀出現的血清并(bing)不(bu)是污染
檢測(ce)血清是否被污(wu)染方法是將(jiang)血(xue)清接種到(dao)血(xue)酯板上,培養后看是否有(you)菌落形成。在1000x顯微鏡下,有(you)經驗的(de)通過(guo)觀(guan)察細(xi)(xi)胞液狀(zhuang)態和常見細(xi)(xi)菌的(de)外形即(ji)可鑒別,或者通過(guo)有(you)無革(ge)蘭氏(shi)染色(se)的(de)細(xi)(xi)菌,也可以判斷血(xue)清是否被(bei)污染。
如(ru)何去除血清中的沉淀(dian)?
如(ru)想去除這(zhe)些(xie)絮狀沉淀物,可將(jiang)血清分裝到(dao)無菌離心管中(zhong),以400g離心,上清液即可直接加入到培養液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物,因為可能阻塞濾膜。
血清溶解過(guo)程如何減少沉淀
將血(xue)清從冷凍箱取出后,先置于2-8℃冰箱12-24小(xiao)時左(zuo)右使(shi)之溶解,然后在(zai)(zai)室(shi)溫(wen)(wen)下使(shi)之全溶。但必須(xu)注意的(de)(de)是(shi),溶解過程中(zhong)(zhong)必須(xu)規則地輕輕搖晃(huang)均勻(yun)。切勿(wu)將剛剛從-20℃冰箱里拿出(chu)來的(de)(de)血清直(zhi)接放在(zai)(zai)水(shui)浴(yu)中(zhong)(zhong),無論(lun)室(shi)溫(wen)(wen)的(de)(de)水(shui)或者37℃的(de)(de)水(shui),因為在(zai)(zai)水(shui)浴(yu)中(zhong)(zhong)血清迅速融化,很大的(de)(de)溫(wen)(wen)差(-20℃到37℃,溫(wen)(wen)差為57℃)極其(qi)容易(yi)造成血清產生沉淀(dian)。直(zhi)接放65℃水(shui)浴(yu)中(zhong)(zhong)更(geng)是(shi)極其(qi)殘忍的(de)(de)做法,是(shi)對血清的(de)(de)褻玩,對科學規則的(de)(de)粗(cu)暴踐踏!
胎牛血清凍(dong)存(cun)注意事項
需要長期保(bao)存的血清有(you)必要儲(chu)存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%,因而,血清在凍入低溫冰箱前,有必要預留一定體積空間,不然易發生污染或玻璃瓶凍裂。大包裝的瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫,待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡),使溫度與成分均一,削減沉積的發作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃融化,溫差大的情況下血清容易形成蛋白質凝聚而出現沉積和沉淀絮狀物。
血清是否需要熱滅活處理?
熱滅活(huo)是(shi)指56℃, 30分鐘加熱已chedi凍結的(de)(de)血清。加熱過程中須規矩搖晃均勻。目的(de)(de)是使血清中的(de)(de)補體成分(complement)滅活。除非有必要,一般不建議做此熱處理,因為熱處理會形成血清沉積增多,而且還會影響血清的質量。補體參與反應有: 平滑肌細胞收縮、 肥大細胞和血小板釋放組胺、 增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。相關研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。
血清使用濃度(du)是多(duo)少?
原則(ze)上血(xue)清添加量不(bu)要太多(duo),通常分為5%、10%、20%幾檔,部分細胞原代提取時會使用20%血清,大部分細胞正常培養時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度,還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調校。
PAN P30-3302胎牛血(xue)清(qing)如何試(shi)用(yong)
血清開始(shi)進(jin)行試(shi)用時,如果是重新復(fu)蘇細胞,建議用原培(pei)養體系進(jin)行細胞復(fu)蘇,待細胞狀態進(jin)入(ru)zuiyou狀態后再進行測(ce)試。測(ce)試時不建議直接100%直接換成新血清體系進行培養,而應該按照比例進行梯度替換(例如,shou次換液按照(zhao)新舊體系1:3,第二次換液1:1,第三次換液3:1,而后wanquan替換。對(dui)于(yu)一(yi)些對(dui)培養(yang)體系比較敏(min)感的細胞,可以進一(yi)步優化替換比例。)通過這種方法可以避免細胞因環境改變而出現應激或者異常造成不必要的損失。
血清在4度冰箱能放多久?對細胞有何影響呢?
根據文獻顯示(shi)血清(qing)和(he)血漿在4℃條件儲存2小時,血清中的成分就會發生變化,所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規格,建議現配現用。如果不能實現現配現用的話,配好的培養基在4℃保存的時間不要超過1周,如果期間使用頻次較高或恢復室溫次數較多時,能夠保存的時間還會減少。