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血清沉淀(dian)是什么(me)?

血清非人工產品，沉淀出(chu)來系自然現(xian)象，沉淀主要是纖維(wei)蛋白原(yuan)，其次是鹽(yan)析(xi)(xi)出(chu)。如磷酸(suan)鈣等，還有(you)一些danguchun和脂肪酸(suan)以及其他蛋白析(xi)(xi)出(chu)物質等

哪些因素血清沉(chen)淀(dian)會增加？

血清熱滅活(huo)、37℃培養(yang) 、反復(fu)凍融(rong)、溶解(jie)過程中(zhong)沒有搖(yao)勻、伽馬射線照射、長(chang)期(qi)存放(fang)在 2-8°C、血清(qing)加(jia)入到RPMI 1640中(zhong)時(shi)、pH升高(gao)時(shi)、在培養(yang)板或(huo)培養(yang)皿中(zhong)，培養(yang)基的蒸發等等因(yin)素(su)都會導致沉(chen)淀(dian)的增加(jia)。

沉淀不會影響其對(dui)細(xi)胞的(de)促生(sheng)長(chang)作用？

技術人員對(dui)(dui)此問題(ti)有(you)過深入研究證明，血清(qing)沉(chen)淀(dian)對(dui)(dui)細(xi)(xi)胞的生(sheng)長沒有(you)影響，但有(you)一(yi)個例(li)外：沉(chen)淀(dian)對(dui)(dui)巨(ju)噬細(xi)(xi)胞的培養會有(you)一(yi)些(xie)影響。

沉淀這(zhe)種現(xian)象(xiang)發生在所有的血清中？

“G*品(pin)牌(pai)的(de)(de)(de)胎(tai)牛血(xue)(xue)清(qing)沒有預老化(hua),如果(guo)存放在(zai)(zai)(zai)2-8℃，血(xue)(xue)清(qing)中的(de)(de)(de)各種蛋白或酯類(lei)有可能(neng)會凝(ning)聚析出,出現沉淀(dian)(dian)或混濁(zhuo). 這(zhe)種不會影響血(xue)(xue)清(qing)對對細胞的(de)(de)(de)促生長作用(yong).我們建議(yi)把血(xue)(xue)清(qing)存放在(zai)(zai)(zai) –20℃，并避免反復凍融。S*品(pin)牌(pai)胎(tai)牛血(xue)(xue)清(qing)說明書中說: “在(zai)(zai)(zai)融化(hua)過程中混濁(zhuo)多(duo)絮狀沉淀(dian)(dian)，這(zhe)種現象對多(duo)數血(xue)(xue)清(qing)來說是正常的(de)(de)(de)，并不影響其使用(yong)質量。但它影響血(xue)(xue)清(qing)的(de)(de)(de)外觀(guan)，影響瓶與瓶之間的(de)(de)(de)一致性。

有沉淀出現的血清并不(bu)是(shi)污(wu)染

檢測(ce)血清(qing)是(shi)否(fou)被污染的方法是(shi)將(jiang)血清(qing)接種到血酯板上，培(pei)養(yang)后(hou)看(kan)是(shi)否(fou)有(you)菌(jun)落形(xing)成。在(zai)1000x顯微鏡下，有(you)經驗的(de)通過觀察細(xi)(xi)胞液狀(zhuang)態和常見細(xi)(xi)菌(jun)的(de)外(wai)形(xing)即可鑒(jian)別(bie)，或者通過有(you)無革(ge)蘭氏染(ran)(ran)色(se)的(de)細(xi)(xi)菌(jun)，也可以判斷(duan)血清(qing)是(shi)否(fou)被污(wu)染(ran)(ran)。

如何去除血清中的沉淀?

如想去除這(zhe)些絮狀沉淀物，可將血(xue)清分(fen)裝到(dao)無菌離心管中，以400g離心，上清液即可直接加入到培養液中使用。不要以過濾的方式去除這些絮狀沉淀物，因為可能阻塞濾膜。

血清溶解過程如何減(jian)少沉(chen)淀(dian)

將血清從冷凍箱取出后，先置(zhi)于2-8℃冰箱(xiang)12-24小時左右使(shi)之(zhi)溶解，然后在室溫(wen)(wen)下使(shi)之(zhi)全(quan)溶。但必(bi)須注(zhu)意的(de)是，溶解過程(cheng)中必(bi)須規則地輕輕搖晃均勻(yun)。切勿將剛剛從-20℃冰箱(xiang)里拿(na)出來(lai)的(de)血清(qing)直接(jie)放在水(shui)浴中，無論室溫(wen)(wen)的(de)水(shui)或(huo)者37℃的(de)水(shui)，因(yin)為在水(shui)浴中血清(qing)迅(xun)速融(rong)化，很(hen)大(da)的(de)溫(wen)(wen)差(cha)(-20℃到37℃，溫(wen)(wen)差(cha)為57℃)極其容易造(zao)成血清(qing)產生沉淀。直接(jie)放65℃水(shui)浴中更是極其殘忍的(de)做法，是對血清(qing)的(de)褻玩，對科(ke)學規則的(de)粗暴踐踏!

胎(tai)牛血(xue)清凍(dong)存(cun)注意事項

需要(yao)長(chang)期保存(cun)的血清有必要(yao)儲存(cun)于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中。4℃冰箱中保存時刻切勿超過1個月。由于血清結冰時體積會增加約10%，因而，血清在凍入低溫冰箱前，有必要預留一定體積空間，不然易發生污染或玻璃瓶凍裂。大包裝的瓶裝血清凍結需采用逐漸凍結法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解。然后移入室溫，待全部溶解后再分裝。在溶解過程中需不斷悄悄搖晃均勻(小心勿形成氣泡)，使溫度與成分均一，削減沉積的發作。切勿直接將血清從-20℃進入37℃融化，溫差大的情況下血清容易形成蛋白質凝聚而出現沉積和沉淀絮狀物。

血清(qing)是否(fou)需要熱滅活處理?

熱滅活是(shi)指56℃，30分鐘加熱已chedi凍結的血清(qing)。加熱過程中(zhong)須規(gui)矩(ju)搖晃(huang)均勻。目的是使血清(qing)中(zhong)的補體成分(complement)滅活。除非有必要，一般不建議做此熱處理，因為熱處理會形成血清沉積增多，而且還會影響血清的質量。補體參與反應有: 平滑肌細胞收縮、 肥大細胞和血小板釋放組胺、 增強吞噬作用、促進淋巴細胞和巨噬細胞發作化學趨化和活化。相關研究的使用者可以考慮血清增加熱滅活處理。

血清使用濃度(du)是多少?

原則上血清(qing)添(tian)加量不(bu)要太多，通常分(fen)為5%、10%、20%幾檔，部分細胞原代提取時會使用20%血清，大部分細胞正常培養時會使用10%的血清濃度。至于某一株細胞適應什么樣的血清濃度，還需要根據細胞特性、實驗目的做測試和調校。

GEMINI 900-108胎(tai)牛血清如何試(shi)用

血清(qing)開始進行(xing)試(shi)用時(shi)，如果是重新復蘇細胞(bao)(bao)，建議用原培養體系進行(xing)細胞(bao)(bao)復蘇，待細胞(bao)(bao)狀態(tai)進入(ru)zuiyou狀態后再進行測試。測試時不建議(yi)直接100%直接換成新血清體系進行培養，而應該按照比例進行梯度替換(例如，shou次(ci)換液按照新舊(jiu)體系1:3，第二次換液1:1，第三次換液3:1，而后wanquan替(ti)換。對于一些(xie)對培(pei)養體(ti)系(xi)比較敏(min)感的細胞，可以進一步優化(hua)替(ti)換比例。)通過這種方法可以避免細胞因環境改變而出現應激或者異常造成不必要的損失。

血清在(zai)4度冰箱能放多久？對細胞有何影響呢？

根據文(wen)獻顯示血清和血漿在4℃條件儲存2小時，血清中的成分就會發生變化，所以建議用戶在使用血清要分裝成自己常用的規格，建議現配現用。如果不能實現現配現用的話，配好的培養基在4℃保存的時間不要超過1周，如果期間使用頻次較高或恢復室溫次數較多時，能夠保存的時間還會減少。