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人骨肉瘤細胞,HOS 簡介(jie):
產(chan)品名稱:人骨肉瘤細胞,HOS
分類:細(xi)胞(bao)株(系) > 人(ren)源性細(xi)胞(bao)系 > 骨,軟(ruan)骨,肌(ji)肉
細胞背景:該細胞是從一名13歲的(de)白人(ren)女性(xing)的(de)骨肉瘤(liu)組織中分離建(jian)立的(de),表現為扁平(ping)形(xing)態、低(di)飽和密度、軟瓊脂中的(de)低(di)克隆形(xing)成率(lv)和對化合物及病毒(du)感染(ran)的(de)敏感性(xing)。
培養(yang)條件:
1) 準備MEM-EBSS培養基(MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)),90%, 優質(zhi)胎牛血清,10%;1%NEAA。
2) 培養(yang)條件: 氣相(xiang):空氣,95%;二氧化碳(tan),5%。 溫度:37攝氏度,培養(yang)箱濕度為70%-80%。
3) 凍(dong)存液:90%*培(pei)養(yang)基,10%DMSO,現(xian)用現(xian)配。液氮儲存。
細胞特性:
1) 來源:骨
2) 形態:上(shang)皮細胞樣
3) 含量(liang):>1x106 個/mL
4) 污染:支原體、細菌、酵母和真菌檢測(ce)為(wei)陰(yin)性
5) 規格(ge):T25瓶
處理:
1)復蘇細(xi)(xi)(xi)胞:將含(han)有(you)1mL細(xi)(xi)(xi)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加(jia)(jia)入(ru)4mL培(pei)養基(ji)混合均勻(yun)(yun)。在1000RPM條件(jian)下離心4分鐘,棄去上清液,補加(jia)(jia)1-2mL培(pei)養基(ji)后吹勻(yun)(yun)。然(ran)后將所有(you)細(xi)(xi)(xi)胞懸液加(jia)(jia)入(ru)培(pei)養瓶中培(pei)養隔(ge)夜(或將細(xi)(xi)(xi)胞懸液加(jia)(jia)入(ru)10cm皿(min)中,加(jia)(jia)入(ru)約8ml培(pei)養基(ji),培(pei)養隔(ge)夜)。第二天(tian)換液并檢查細(xi)(xi)(xi)胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度(du)達80%-90%,即可進(jin)行(xing)傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方(fang)法:
1.棄去培養上(shang)清,用不含鈣(gai)、鎂離子(zi)的PBS潤洗細(xi)胞1-2次。
2.加2ml消(xiao)化(hua)液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于(yu)培(pei)養(yang)(yang)瓶中,置于(yu)37℃培(pei)養(yang)(yang)箱中消(xiao)化(hua)1-2分(fen)鐘,然后在顯微鏡(jing)下(xia)觀察細(xi)胞消(xiao)化(hua)情況,若細(xi)胞大部分(fen)變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tai),輕敲幾(ji)下(xia)培(pei)養(yang)(yang)瓶后加少量培(pei)養(yang)(yang)基終止消(xiao)化(hua)。
3. 按6-8ml/瓶(ping)補加培養(yang)基,輕(qing)輕(qing)打勻(yun)后吸出,在(zai)1000RPM條件下離(li)心4分(fen)鐘,棄去上清(qing)液(ye),補加1-2mL培養(yang)液(ye)后吹勻(yun)。
4. 將(jiang)細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新(xin)的含8ml培(pei)養基(ji)的新(xin)皿中或者瓶中。
3)細(xi)胞(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun):待(dai)細(xi)胞(bao)(bao)生長(chang)狀態良好(hao)時,可進行細(xi)胞(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun)。貼壁細(xi)胞(bao)(bao)凍(dong)(dong)存(cun)時,棄去培(pei)養(yang)基(ji)后(hou)加入少(shao)量胰(yi)酶,細(xi)胞(bao)(bao)變圓(yuan)脫落后(hou),加入約(yue)1ml含血(xue)清的培(pei)養(yang)基(ji)后(hou)加入凍(dong)(dong)存(cun)管中(zhong),再添加10%DMSO后(hou)進行凍(dong)(dong)存(cun)。
注意(yi)事項:
1)收到細(xi)胞后,若發現(xian)干冰已揮發干凈、凍(dong)存(cun)管瓶蓋脫落、破損及(ji)細(xi)胞有污染,請立(li)即與(yu)我們。
2)所有(you)(you)動物細胞均視為(wei)有(you)(you)潛在的生(sheng)物危害性,必(bi)須在二級生(sheng)物安全臺內操作,并請注(zhu)意防護,所有(you)(you)廢液及接觸過(guo)此(ci)細胞的器皿(min)需要滅菌(jun)后方能丟棄。
相關(guan)細胞(bao)株(zhu)細胞(bao)系有:
產(chan)品(pin)名稱(cheng)(cheng) 簡稱(cheng)(cheng) 分(fen)類(lei)
人骨肉瘤細(xi)胞 HOS 骨,軟骨,肌肉
人骨(gu)肉(rou)瘤細胞(bao) U-2OS 骨(gu),軟(ruan)骨(gu),肌肉(rou)
人成骨肉(rou)瘤細胞 MG-63 骨,軟骨,肌肉(rou)
人骨(gu)(gu)肉瘤細胞 SW1353 骨(gu)(gu),軟骨(gu)(gu),肌肉
熒光素酶(mei)轉染(ran)人成骨肉瘤(liu)細胞 U2OS-LucteT-on 骨,軟骨,肌(ji)肉
人骨(gu)肉瘤(liu)細(xi)胞 U2OSE6Tet6 骨(gu),軟骨(gu),肌肉
人骨(gu)肉(rou)瘤細胞 SF-86 骨(gu),軟骨(gu),肌肉(rou)
人成骨肉瘤細胞 well2 骨,軟骨,肌肉
人成骨肉(rou)瘤細胞(bao) LZJ 骨,軟骨,肌肉(rou)
人成骨肉瘤(liu)細胞(bao) well5 骨,軟骨,肌肉
人成骨肉(rou)瘤(liu)細(xi)胞 Saos-2 骨,軟(ruan)骨,肌肉(rou)
小(xiao)鼠骨(gu)肉瘤成骨(gu)細胞(bao) K7M2wt[K7M2-WT] 骨(gu),軟骨(gu),肌肉
大鼠骨(gu)(gu)肉(rou)瘤細胞 UMR-106 骨(gu)(gu),軟骨(gu)(gu),肌肉(rou)